Comment insérer un gène dans un plasmide ?
L'insertion d'une séquence d'ADN bicaténaire dans un plasmide nécessite un traitement préalable par une enzyme de restriction.
On choisit une enzyme qui a un site unique dans la séquence plasmidique.
Après action de l'enzyme de restriction, le plasmide circulaire est linéarisé.Comment cloner un gène ?
Cloner un gène consiste donc à l'insérer dans un plasmide.
Un clone sera le transformant bactérien qui contient ce plasmide particulier.
Dans ce cas on parle de clone car tous les individus de la colonie bactérienne sont génétiquement identiques.Quels sont les types de clonage ?
Il existe deux types de clonage, le clonage naturel et le clonage artificiel.
- Les étapes du clonage moléculaire incluent : l'extraction de l'ADN d'une source, la digestion de l'ADN avec des enzymes de restriction, la ligation de l'ADN à un vecteur d'insertion, la transformation de la bactérie hôte avec le vecteur d'insertion, la sélection et la vérification de la présence de la séquence d'ADN
Il consiste à insérer un fragment d'ADN (dénommé insert) dans un vecteur approprié comme un plasmide par exemple (voir exp4 pour une explication sur les plasmides). Le nouveau plasmide ainsi créé sera ensuite introduit dans une cellule hôte, en générale la bactérie Escherichia coli.
LE GENIE GENETIQUE ET LE CLONAGE D'ADN
Le clonage animal
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Génétique biotechnologies végétales et santé des plantes
Les recherches en Génétique et Amélioration des Plantes (GAP) au
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Production & Operations Management
1 Statistique descriptive 2 Introduction
Fiche résumée du cours de Statistiques par GBiau 1
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