L'alignement des séquences est utilisé dans deux situations : pour comparer des séquences homologues, de longueur comparable, pour comparer un gène et l'ARNm qui en est issu pour mettre en évidence la structure morcelée des gènes d'eucaryotes et repérer exons et introns.
Le calcul du score d'alignement est plus intéressant : il consiste à attribuer à chaque correspondance un score élémentaire ; par exemple : identité +1, mésappariement 0, brèche -1.
Pour l'alignement parfait de deux séquences de 32 nucléotides, le score serait de 32.
L'alignement multiple permet entre autres d'identifier les régions très conservées qui sont en général associées à des fonctions biologiques importantes, conservées dans l'Évolution.