Nord : Université de la méditerranée (France), Université Louis Pasteur de Strasbourg bien voulu concevoir, définir le thème de recherche, pour son dynamisme et sa Mots clés: plantes médicinales, huiles essentielles, extraits végétaux,
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[PDF] THEME ETUDE PHYTOCHIMIQUE DE PLANTES MEDICINALES
22 avr 2010 · Touafek Ouassila THEME ETUDE PHYTOCHIMIQUE DE PLANTES MEDICINALES DU NORD ET DU SUD ALGERIENS Soutenu le : 22 / 04
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Thèse de Doctorat Unique, Biochimie-Microbiologie
Obame Engonga Louis Clément
iUNIVERSITE DE OUAGADOUGOU
Unité de Formation et de Recherche
Sciences de la Vie et de la Terre
(UFR-SVT)Centre de Recherche en Sciences Biologiques
Alimentaires et Nutritionnelles (CRSBAN)
Pôle Régional d'Excellence en Biotechnologies deOuagadougou (PREBO)
Docteur ès Sciences Biologiques Appliquées
Spécialité: Biochimie-Microbiologie
(Substances à Activités Antimicrobienne et Antioxydante)THESE DE DOCTORAT UNIQUE
Présentée par :
OBAME ENGONGA Louis Clément
Maître ès Sciences
Pour l'obtention du Grade de
Sur le Thème :
Soutenu le 26/02/2009, devant la commission d'examen : Président: Pr. Mouhamadou Diop SALL, Professeur Titulaire de Classe Exceptionnelle Université Cheikh Anta Diop Dakar, Sénégal. Membres: Pr. Alfred S. TRAORE, Professeur Titulaire, Université de Ouagadougou. Pr. Ange Antoine ABENA, Professeur Titulaire, Université Marien NGOUABI de Brazzaville, Congo.Pr. Issiaka Z. KABORE, Directeur de Recherches,
IRSS/CNRST.
Pr. Jean KOUDOU, Directeur de Thèse, Maître de Conférences, CAMES. Etude Phytochimique, Activités Antimicrobiennes etAntioxydantes de Quelques Plantes Aromatiques et
Médicinales Africaines
Thèse de Doctorat Unique, Biochimie-MicrobiologieObame Engonga Louis Clément
iiPréface du Président de RA-Biotech.
L'Ecole Doctorale Régionale de Ouagadougou offre une formation doctorale de biotechnologie dans ses options : Biotechnologie microbienne et cellulaire, Biotechnologie Animale et Biotechnologie végétale. Elle regroupe la plus part des Universités Ouest Africaine de Biotechnologie (RA-BIOTECH) fruitde la coopération inter-universitaire et dont le siège est au CRSBAN, à l'Université de Ouagadougou. Les
membres fondateurs de ce réseau : Bénin, Burkina Faso, Côte d'Ivoire, Guinée-Conakry, Mali, Niger, Togo
Les Universités et structures de
formation des pays ci-dessous constituent d'autres partenairescomme le Centre International de Recherche Développement sur l'Elevage en zone Subhumide (CIRDES)-
Bobo Dioulasso, EISMV-Sénégal.
Ce réseau sous régional bénéficie de l'appui de plusieurs partenaires de l'enseignement supérieur
(Association des Universités Africaines-AUA, UNESCO, Banque Mondiale, CAMES, Agence Universitaire de la Francophonie, Agence Africaine de Biotechnologie-AAB, etc.L'école Doctorale que le réseau anime assure une formation de haut niveau à travers une recherche
utilitaire sur plusieurs thématiques touchant la vie quotidienne des populations africaines. Cette école a
permis au CRSBAN d'être érigé en pôle régional d'excellence en Biotechnologie d'une part par l'AUA et
d'autre part par l'AUF. Elle accueille des étudiants de plus de 14 pays d'Afrique centrale de l'Ouest.
Le réseau bénéficie aussi du soutien de certains spécialistes des biotechnologies des universités du
Nord : Université de la méditerranée (France), Université Louis Pasteur de Strasbourg (France), Centre de
Génétique Moléculaire de Gif-sur-Yvette-CNRS (Paris France), Université de liège (Belgique) ; Faculté
Universitaire de Gembloux (Belgique), Université de Rome, Université Agronomique de Wageningen.
L'importance des biotechnologies dans la résolution des problèmes de développementsocioéconomiques des pays de l'Afrique sub-saharienne (Alimentation, Santé, Environnement ; etc.) justifie
amplement la mise en place de cette formation. Elle est cogérée par un comité pédagogique international
africain, constitué par des enseignants, des chercheurs, tous spécialistes dans les divers domaines de
biotechnologies.La mutualisation des expériences par toutes ces compétences est un atout majeur pour la formation des
ressources humaines de qualité au profit du continent africain et de l'humanité.Pr. Alfred S TRAORE
Professeur titulaire de Biochimie Microbiologie
CRSBAN/UFR-SVT/Université de Ouagadougou
Thèse de Doctorat Unique, Biochimie-MicrobiologieObame Engonga Louis Clément
iiiDédicaces
A mes Parents ;
Pour tous les sacrifices que vous avez consentis à mon égard afin que je puisse mener à bien mes études. Vous avez su m'inculquer le sens du devoir, de la responsabilité, de la dignité, de l'honneur et de l'humilité. Je ne pourrais jamais vous rendre ce que vous avez fait pour moi, mais j'espère seulement que vous trouverez dans ce modeste travail, un réel motif de satisfaction. A mon père Engonga Paulin et ma soeur Assong Perpetue qui nous ont quittés si tôt. Indéfectible attachement ; A mère Meye Jeannette dont l'espoir repose sur la réussite de ses enfants ; A mes enfants Angué Obame Ludzzy Kharla et Mezui m'Engonga Harrys Francky, trouvez ainsi résumé en quelques pages le dur travail de ma vie et un exemple à suivre ;A mon grand frère Edou Prosper qui fut en même temps un père et un frère, mon seul soutien dans des moments durs et pénibles de mes études ;
A mes petits frères et soeurs Nkogo Hubert, Nguema Modeste, Abessolo Gisèle, Ada Estelle, Esseng Bérigise, Edzang Ngomo, Essono Ngomo etNgomo Ngomo ;
A mes neveux et nièces Akono Patchely, Edou Marouchka, Obone Wendy,Meye Dharlyse; Perpetue, Samuella, Wilfred etc.
A mes amis Nana Wend Lamita Adéline, Zame Ovono Hervé,A Tous les Etudiants Gabonais au Burkina Faso
A mes cousins et cousines
A mes tantes et oncles
Thèse de Doctorat Unique, Biochimie-MicrobiologieObame Engonga Louis Clément
ivRemerciements
Le présent travail a été effectué au Burkina Faso au Centre deRecherche en Sciences Biologiques
Alimentaires et Nutritionnelles (CRSBAN) de l'Université de Ouagadougou.Bien de personnes ont été très actives à l'accomplissement de cette oeuvre aussi voudrai-je
personnellement leur témoigner ma très grande reconnaissance en ces mots.A l'intention du :
Professeur Mouhamadou Diop SALL, Professeur Titulaire de Classe Exceptionnelle à l'UniversitéCheikh Anta Diop de Dakar, qui malgré ses multiples occupations a accepté d'évaluer ce travail et de
présider mon Jury de soutenance. Professeur Alfred TRAORE, Directeur du CRSBAN, Président de l'Ecole Doctorale RABIOTECH,pour avoir accepté mon inscription en troisième cycle et dans son laboratoire CRSBAN, et pour avoir
bien voulu codiriger ce travail et sièger dans ce Jury. Professeur Jean KOUDOU, Maître de Conférences CAMES, Directeur de cette Thèse, pour avoirbien voulu concevoir, définir le thème de recherche, pour son dynamisme et sa rigueur scientifique.
Professeur Issiaka Z. KABORE, Directeur de Recherches IRSS/CNRST, pour ses conseilspratiques, ses enseignements en Maitrise et DEA, pour avoir évalué ce travail et sièger dans ce Jury.
Professeur Ange Antoine ABENA, Doyen de la Faculté des Sciences de la Santé de l'UniversitéMarien NGOUABI de Brazzaville, qui malgré ses multiples occupations, a bien voulu juger et rapporter
ce travail.Mes remerciements vont également aux :
Professeur Jean-Claude CHALCHAT, Directeur de laboratoire de chimie des huiles essentielles, Les Cezeaux, Aubière, pour son aide dans les mesures physiques des huiles essentielles. Professeur Aboubakar S. OUATTARA, Maître de Conférences, pour m'avoir conseillé certains protocoles de microbiologie utilisés dans ce travail. Professeur Nicolas BARRO, Maître de Conférences, pour ses conseils et pour avoir bien voulu instruire mon dossier de soutenance de thèse. Dr Imaël Nestor BASSOLE, pour sa disponibilité, sa gentillesse, ses conseils scientifiques, linguistiques et ses travaux qui ont constitué une de nos sources d'inspiration. Dr François EBA, Directeur de LAPLUS qui a bien voulu m'accueillir dans son laboratoire. Dr Prosper EDOU pour la récolte des plantes, les conseils pratiques et pour l'assistance dans la manipulation et la rédaction de la thèse. Dr Brice KUMULUNGUI, pour ses conseils, son apport dans l'apparition de certains articles. Thèse de Doctorat Unique, Biochimie-MicrobiologieObame Engonga Louis Clément
vAux différents Chefs de laboratoires de m'avoir donné l'occasion d'effectuer ce travail de recherche,
et de m'avoir ainsi permis de travailler dans un environnement dynamique, avec des instruments analytiques très performants. A l'équipe de recherches du CRSBAN : Pr. Y. TRAORE, Dr P. NIKIEMA, Dr C. T. A.OUATTARA, Dr J. ILBOUDO, Dr M. BENGALY
et Dr P. SAVADOGO qui m'ont initié et donné goût à la recherche à travers leurs enseignements. A l'équipe de recherches de LAPLUS : Dr EBA F., Dr EDOU P, Dr MEGNE R. et Dr RENAMY, pour leur disponibilité et leur accueil. A nos aînés du CRSBAN, Dr S. SANON, Dr C. NANA, Dr A. SAWADOGO, Dr D. KAROU, Dr M TIENDREOBEOGO et Dr W M. C. NADEMBEGA pour leurs conseils et leur bon exemple.Nous tenons à remercier les institutions suivantes qui ont contribué à la réalisation du travail :
Ecole Normale Supérieure (ENS), Laboratoire pluridisciplinaire des Sciences (LAPLUS), Libreville Gabon Institut de Pharmacopée et Médecine Traditionnelle (IPHAMETRA), Libreville Gabon. Centre International de Recherche Médicale (CIRM), Franceville Gabon. Laboratoire de Chimie des Glucides, Chimie des Huiles essentielles Les Cezeaux, 63177 Aubière,France.
La Banque Mondiale à travers le Réseau Ouest Africain de Biotechnologie (RABIOTECH), L'Etat gabonais à travers les bourses et stages. Aux techniciens du CRSBAN, A. TRAORE, A. TRAORE, D KABORE, E. TRAORE, P. KAGEMBEGA pour leur assistance technique et leur convivialité. Aux familles NANA Roger, OUEDRAOGO Benoît, CISSE Bouba, NEYA Béli et SAWODOGOGilbert pour leur soutien affectif.
A mes amis NANA Roseline, MEWONO Ludovic, EGNOLE Dieudonné, OBONE Carine, ABDOUL-LATIF M. Fatouma, ZAME Hervé, MEZEME Rodrigue, NANA Pauline, NANA Caroline, NANA Sonia, NANA Marlyse, BILONGA André, EBANG Narcisse, KABORE Marie Jeanne, KAYUMBA Joséphine, EVOUNA Fortunin, OUATTARA Lassina et COMPAORE Rakèta qui me sont restés fidèles dans les moments difficiles. A tous mes collègues de l'Ecole Doctorale RABIOTECH de la première promotion et des autrespromotions pour leur collaboration franche et à tous ceux qui de près ou de loin ont contribué de quelque
manière que ce soit à l'élaboration de cette oeuvre, soyez en remerciés. Thèse de Doctorat Unique, Biochimie-MicrobiologieObame Engonga Louis Clément
viRésumé
Les plantes médicinales représentent une des s ources de médicaments pour environ 80 % despopulations africaines. Le savoir-faire des guérisseurs traditionnels, d'une valeur inestimable, est un point
de départ pour l'investigation pharmacologique et phytochimique de ces médicaments naturels.Dans le cadre de ce travail, nous nous sommes intéressés à valider l'utilisation en pharmacopée
traditionnelle de quelques plantes médicinales et à huiles essentielles africaines. Ce travail est aussi
l'étape préliminaire du programme de prospection des plantes aromatiques susceptibles d'être exploitées
dans les domaines médical et industriel pour la production d'huiles essentielles.La détection et l'identification des composés naturels présentant un intérêt thérapeutique
potentiel ont été effectuées. 36 extraits végétaux et 6 huiles essentielles, provenant de 16 plantes
supérieures, ont été soumis à un screening chimique et biologique. Les extraits aqueux, chloroformiques
et méthanoliques des parties aériennes ont été sélectionnés sur la base de leurs activités antioxydante et
antimicrobienne. Le fractionnement bioguidé a permis de mettre en évidence la présence des composés
chimiques, responsables des activités antifongique, antibactérienne et antioxydante des extraits : phénols
totaux, flavonoïdes, tanins et proanthocyanidines. Les tests antioxydants ont été réalisés par la
décoloration de la ȕ-carotène et le piégeage du radical DPPH. Les résultats ont montré d'une part une
excellente corrélation entre les deux méthodes utilisées, et d'autre part, entre ces activités et les teneurs en
phénols totaux. Les extraits et les huiles essentielles étudiés ont montré une bonne activité antioxydante.
Les analyses CPG/SM des extraits et des huiles essentielles ont permis de mettre en évidence laprésence d'une série de composés : chrysophanol et émodin (Syzygium rowlandii), néophytadiène et
cubébène (Gambeya africana), 1, 1-sulfoxyl bis -(4-chloro) benzène et phénol (Leucas martinicensis),
phthalate de diéthyle et -pinène (Canthium mutiflora), 1,2-Benzène dicarboxylate de bis 2-éthyl héxyle
(Piptadeniastrum africanum), 1,2-Benzène dicarboxylate de butyl phényl méthyle (Distemonanthus
benthamanus). Les composés majoritaires dans les huiles essentielles sont le tétradécan-3-one (30,6%)
pour Cochlospermum planchonii, l'acétate d'octyle (60 %) pour Canarium schweinfurthii, le -3-carène
(72,31 %) pour Aucoumea klaineana, le terpinène-4-ol (27,33%) pour Dacryodes buettneri, le sabinène (21,76 %) pour Dacryodes édulis,et enfin le myrcène (55,42%) pour Daniella klainei.Les tests de sensibilité des microorganismes ont été effectués sur le milieu Mueller Hinton solide
en utilisant la technique des puits, tandis que les CMI, CMF et CMB ont été évaluées en utilisant la
technique de microdilution. L'étude des propriétés antimicrobiennes des extraits et des huiles essentielles
a montré qu'ils possèdent des activités antibactérienne et antifongique. L'activité microbicide ou/et
microbiostatique a été confirmée par la détermination des CMI, CMF et CMB qui varient de 0,25 à 16 %
(w/v) pour les huiles essentielles et de 6,25 à 200 µg/ml pour les extraits à la concentration de 1 mg/ml.
Enfin, les résultats obtenus montrent aussi que les activités antimicrobienne et antioxydante sont
liées à la composition chimique.Mots clés: plantes médicinales, huiles essentielles, extraits végétaux, antimicrobien, antioxydant,
composés phénoliques. Thèse de Doctorat Unique, Biochimie-MicrobiologieObame Engonga Louis Clément
viiAbstract
Medicinal plants represent one of natural source of drugs for nearly 80 % of african populations.The skills of traditional healers, with a priceless value, represent a starting point for the pharmacological
and phytochemical investigation of these natural drugs. Within the framework of this work, we initially
were interested to validate the use in traditional pharmacopeia of certain medicinal plants used in Burkina
Faso and Gabon.
This work is also the preliminary stage of the program of prospect ion of the aromatic plants likely to be exploited in the medical and industrial fields for the production of essential oils.We have also performed the detection and the id
entification of natural compounds that expected apotential therapeutic interest. 36 extracts and 6 essential oils from 16 higher plants were subjected to a
chemical and biological screening. Aqueous, chloroformic and methanolic extracts of aerial parts were
selected according to their antioxidant and antimicrobial activities. The fractionation by guided bio essays
of extracts has showed the presence of chemical compounds, responsible of antifungal, antibacterial and
antioxidant activities: total phenols, flavonoids, tannins and proanthocyanidins. Moreover, antioxidant
activity is carried out according to ȕ-carotene bleaching test and DPPH radical scavenging activity. The
results have showed an excellent correlation between the two methods used moreover between theseactivities and the concentration of total phenols; in addition, extracts and essential oils have exhibited
good antioxidant activities. A comparative analysis of the polar extracts was carried out to detect the
possible presence of common compounds. Saponins, tannins, proanthocyanidins and flavonoids werequotesdbs_dbs29.pdfusesText_35