elisa 4eme generation

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Enzyme-Linked ImmunoSorbant Assay (ELISA)

The ELISA assay is a widely used biochemical assay to detect in a sample the presence of and quantity of proteins such as hormones and antibodies and bacteria or viruses The ELISA assay uses the coupling of antigens and antibodies and relies on the specificity and affinity of antibodies for antigens

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ELISA technical guide and protocols

The volume per well should be the same as the capture antibody used in step 1 Remove the blocking buffer and add the samples and standards Cover the plate and incubate for 1 hour at RT Remove the solution and wash the plate with 200 l per well wash buffer for 3 x 5 minutes on a shaking platform

What are the advantages and disadvantages of indirect ELISA?
The indirect assay, the most popular format for ELISA, has the advantages and disadvantages: A wide variety of labeled secondary antibodies are available commercially. Versatile because many primary antibodies can be made in one species and the same labeled secondary antibody can be used for detection.
What are the advantages of competitive ELISA?
This type of ELISA has the following advantages: The key event of competitive ELISA (also known as inhibition ELISA) is the process of competitive reaction between the sample antigen and antigen bound to the wells of a microtiter plate with the primary antibody.
What determines the sensitivity of an ELISA?
However an antigen is captured to the plate (by direct adsorption to the surface or through a pre-coated "capture" antibody, as in a sandwich ELISA), it is the detection step (as either direct or indirect detection) that largely determines the sensitivity of an ELISA.
How do you determine a minimum concentration using ELISA?
When determining the minimum concentration that can be reliably measured by ELISA, consider the following: The standard curve: As the concentration range of ELISA is typically 0 - 1000 pg/mL, the data points on the standard curve for this range correspond to 0, 15.6, 31.25, 62.5, 125, 250, 500, and 1000 pg/mL.

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