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Quelles sont les étapes du clonage ?
Les étapes du clonage moléculaire incluent : l'extraction de l'ADN d'une source, la digestion de l'ADN avec des enzymes de restriction, la ligation de l'ADN à un vecteur d'insertion, la transformation de la bactérie hôte avec le vecteur d'insertion, la sélection et la vérification de la présence de la séquence d'ADN
Quel sont les types de clonage ?
Il existe deux types de clonage, le clonage naturel et le clonage artificiel.
Comment réaliser un clonage ?
Le clonage consiste à isoler un ovule auquel on lui retire son noyau avec une très fine aiguille.
Cette étape permet de retirer la part d'ADN de la mère déjà présente dans l'ovule.
Ensuite, on prélève le noyau d'une cellule de l'individu à cloner.
LA MULTIPLICATION DE LA CONSTRUCTION GÉNIQUE : LE CLONAGE
C'est alors un plasmide recombiné.
Le plasmide recombiné est ensuite réintégré dans une bactérie hôte, Escherichia coli.
Par culture de cette bactérie, on obtient une multiplication rapide du plasmide.
C'est l'étape de clonage de la construction génique.

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Quelles sont les différentes étapes du clonage ?
Étapes du clonage moléculaire
la digestion de l'ADN avec des enzymes de restriction ; la ligation de l'ADN à un vecteur d'insertion ; la transformation de l'organisme hôte (comme une bactérie) avec le vecteur d'insertion ; la sélection et la vérification de la présence de la séquence d'ADN clonée.
Comment sélectionner les clones recombinants ?
deux gènes de résistance, l'un à l'ampicilline, l'autre à la tétracycline peuvent servir de marqueurs pour sélectionner aisément les clones transformés par des plasmides recombinés.
Quelles sont les caractéristiques d'un vecteur de clonage ?
PROPRIÉTÉS DES VECTEURS DE CLONAGE
Réplication autonome et indépendante de l'ADN de la cellule hôte. 2. Petite taille: pour permettre l'insertion de grand fragment d'ADN étranger 3. Présence de gènes de sélection: sélection des cellules hôtes qui ont intégré un vecteur.
L'insertion du fragment d'ADN dans le plasmide doit inactiver le gène de résistance au deuxième antibiotique. Les bactéries transformées par les plasmides recombinants sont donc résistantes au premier antibiotique (ampicilline) et sensibles au deuxième antibiotique (tétracycline).

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