[PDF] Techniques de dosage immunologiques





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Immunologie : technique de Mancini Immunologie : technique de Mancini

La technique de Mancini ou test d'immunodiffusion radiale simple repose sur la formation de complexes immuns (complexe spécifique antigène- anticorps) en 





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Technique de Mancini : - Immunodiffusion radiale. - Technique qualitative ou quantitative. - Le gel est incorporé de l'Ac.



Introduction aux techniques immunologiques (Immunochimie) Introduction aux techniques immunologiques (Immunochimie)

Technique de Mancini. Immunodiffusion radiale. Page 12. 12. DESCLI2009 Phnom Penh. Précipitation en milieu solide. Technique d'Ouchterlony. Immunodiffusion.



TECHNIQUES IMMUNOLOGIQUES

Les techniques immunologiques reposent sur une réaction antigène-anticorps. Ces techniques sont utilisées pour mettre en évidence des antigènes ou des 



Dosage des Anticorps par la méthode de Mancini Principe de l

La concentration est exprimée par référence à une courbe standard avec un Ag de concentration connue. Test d'immunodiffusion de Mancini : − Creuser à l'aide du 



ECE SVT

Or selon la technique de Mancini concentration et efficacité de la réaction sont liées. On peut conclure que les efficacités de la thérapie génique.



Université Montpellier 1

Responsable : Boudard Frédéric Maître de Conférences



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6 août 2019 ▷ Immunodiffusion radiale = technique de Mancini. Elle consiste à ... • L'immunologie clinique (items des sections III. IV. et V.) Ces ...



tp 16 techniques dimmunoprécipitation

La technique de Mancini. La technique d'Outcherlony. Le travail à rendre : L'explication d'une immunoélectrophorèse. Les résultats pour les techniques réalisées 



Immunologie : technique de Mancini

La technique de Mancini ou test d'immunodiffusion radiale simple repose sur la formation de complexes immuns (complexe spécifique antigène- anticorps) en 





Techniques de dosage immunologiques

Technique de Mancini : - Immunodiffusion radiale. - Technique qualitative ou quantitative. - Le gel est incorporé de l'Ac.



Introduction aux techniques immunologiques (Immunochimie)

immunologiques (Immunochimie). Adrien Six (adrien.six@upmc.fr). Phnom Penh DES de Biologie Médicale. Enseignement d'Immunologie ... Technique de Mancini.



Réactions de précipitation Réactions dagglutination et d

Immunodiffusion radiale (technique du Mancini) L'agglutination immunologique est un phénomène caractérisé par la réunion.



Techniques Immunologiques et de Marquage Partie 1 M. CHERGUI A.

1-Techniques immunologiques utilisant les réactions visibles. 1-1-Les techniques de précipitation A4-L'immunodiffusion radiale (Technique de Mancini).



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Responsable : Boudard Frédéric Maître de Conférences



Techniques danalyses biochimiques

Technique immunologique et radiologique Classifications des techniques immunologiques ... L'immunodiffusion radiale simple (technique de Mancini).



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avoir reçu un rappel du vaccin son immunité adaptative peut s'activer de la façon la Le test de Mancini est fondé sur le principe d'immunodiffusion.



IMMUNOLOGIE GENERALE

2-2 Cellules de l'immunité acquise… 1-2-3 Technique de Mancini… ... antibactérienne et antivirale rejet de greffe



Radial Immunodiffusion - IIT Guwahati

Single Radial Immunodiffusion also known as Mancini technique is a quantitative immunodiffusion technique used to detect the concentration of antigen by measuring the diameter of the precipitin ring formed by the interaction of the antigen and the antibody at





Experiment (7): Single Radial Immunodiffusion and Immuno

Simple immunodiffusion (ID) technique is any technique that involving diffusion of antigen or antibody through a semi-solid medium usually agar or agarose gel resulting in a precipitin reaction Single radial immunodiffusion (RID) -Mancini test- and double immunodiffusion – Ouchterlony test- are types of ID techniques



Techniques de dosage immunologiques

Technique de Mancini a Mancini : aspect qualitatif : Présence ou asene de l’anneau de péipitation Aspect qualitatif b Test quantitatif: -La réaction positive se traduit par un anneau de précipitation dont le carré du diamètre est proportionnel à la onentation de l’Ag - La onentation est expimée pa éféene à une ou e d’étalonnage





Cours Immunologie

IMMUNOLOGIE 2LMD Dr ELOUAR I Cellules de l’immunité 1- Cellules souches : les cellules souches hématopoïétiques sont localisées au niveau de la moelle osseuse ce sont des cellules multipotente peu différenciées avec un rapport



Détection des antigènes à l’aide de tests immunologiques

maisons de soins les prisons les écoles et parmi les agents de santé et les travailleurs de première ligne ainsi que pour la recherche des contacts Pour les patients ayant obtenu un résultat de TDR négatif la prise en charge dépendra des performances du TDR utilisé et de la prévalence de la COVID-19 dans la communauté (voir annexe 1)



UNIVERSITÉ DE SIDI BEL ABBES Département de médecine

L'électrophorèse permet de séparer un mélange protéique par la migration de ces constituants sous l'effet d'un champ électrique Effectuée sur un support en gel de polyacrylamide et en présence de dodécyl sulfate de sodium elle sépare les protéines en fonction de leur poids moléculaire



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des publications référencées à la fin de cette technique (voir références 2 et 3) et sur le site internet www vaccine uab edu Afin de faciliter l’analyse des résultats un programme Excel® a été créé afin de convertir le nombre de colonies en “indice d’opsonisation” Ce programme “opsotiter3” peut être obtenu

Techniques de dosage immunologiques

Techniques de dosage immunologiques

I. Introduction :

Les techniques de dosage immunologiques reposent sur une réaction antigène-anticorps.

dosage de différentes substances ŽƵŵŽůĠĐƵůĞƐĚĞů͛ŽƌŐĂŶŝƐŵĞŝŶǀŝƚƌŽ͘

Ces techniques sont utilisées pour mettre en évidence soit des antigènes soit des anticorps.

antigénique recherchée. correspondant à celle des anticorps recherchés.

Les anticorps sont habituellement recherchés dans le sérum. On peut plus exceptionnellement les rechercher dans

d͛ĂƵƚƌĞƐŵŝůŝĞƵdžďŝŽůŽŐŝƋƵĞƐƚĞů que le liquide céphalorachidien.

Il existe de nombreuses techniques permettant de détecter les antigènes ou les anticorps. Le choix de la technique

est fonction de différents paramètres : ĂĨŽƌŵĞĚĞů͛ĂŶƚŝŐğŶĞ : soluble ou particulaire. - Méthodes de précipitation - Méthodes utilisant un marqueur

Ce sont les méthodes les plus sensibles. Selon le marqueur utilisé, on peut distinguer trois types de techniques :

La radioimmunologie ͗ďĂƐĠĞƐƵƌů͛ƵƚŝůŝƐĂƚŝŽŶĚ͛ƵŶŵĂƌƋƵĞƵƌƌĂĚŝŽĂĐƚŝĨ͘

II. Réaction Ag-Ac :

͛ŝŵŵƵŶŽ-analyse est basée sur la formation des complexes immuns in vitro c'est-à-ĚŝƌĞůĂĐŽŵďŝŶĂŝƐŽŶĚ͛ƵŶĠƉŝƚŽƉĞ

La njŽŶĞĚ͛ŝŶƚĞƌĂĐƚŝŽŶĞŶƚƌĞů͛ĂŶƚŝĐŽƌƉƐĞƚů͛ĂŶƚŝŐğŶĞƐĞůŝŵŝƚĞĂƵƉĂƌĂƚŽƉĞĚĞů͛ĂŶƚŝĐŽƌƉƐĞƚăů͛ĠƉŝƚŽƉĞĚĞů͛ĂŶƚŝŐğŶĞ͘

Cette association nécessite une bonne complémentarité stérique entre les deux sites réactifs.

Les épitopes et les paratopes engagent des interactions non covalentes et réversibles, de type liaisons de Van der

Waals, liaisons hydrophobes, liaisons électrostatiques et liaisons hydrogènes.

ĞƐĐŽŶĚŝƚŝŽŶƐŝŶĨůƵĞŶĕĂŶƚů͛ŝŶƚĞƌĂĐƚŝŽŶŐ-Ac sont représentées par la température, le PH, la force ionique, le temps

Les anticorps utilisés dans les techniques de dosages immunologiques sont de deux types : - Des sérums polyspécifiques (Ac polyclonaux). - Des anticorps monoclonaux. Les antigènes utilisés sont soit des Ag solubles soit des Ag particulaires.

La mise en évidence de la réaction Ac-ŐƉĞƵƚġƚƌĞĨĂŝƚĞĚ͛ƵŶĞŵĂŶŝğƌĞ͗

- Directe : ŐĠŶĠƌĂůĞŵĞŶƚǀŝƐŝďůĞăů͛ƈŝůŶƵ͕ƐŽƵƐĨŽƌŵĞĚ͛ƵŶĞƉƌĠĐŝƉŝƚĂƚŝŽŶŽƵĚ͛ƵŶĞĂŐŐůƵƚŝŶĂƚŝŽŶ, ƐŽŝƚăů͛ĂŝĚĞ

Ě͛ƵŶŵĂƌƋƵĂŐĞĚĞů͛ƵŶĚĞƐĚĞƵdžƌĠĂĐƚĂŶƚƐ;ĂŶƚŝŐğŶĞŽƵĂŶƚŝĐŽƌƉƐͿƉĂƌun radio-isotope, un fluorochrome ou

une enzyme.

- Indirecte : ďĂƐĠĞƐƵƌů͛ĠƚƵĚĞĚĞƐĐŽŶƐĠƋƵĞŶĐĞƐďŝŽůŽŐŝƋƵĞƐĚ͛ƵŶĞƚĞůůĞƌĠĂĐƚŝŽŶƉĂƌĞdžemple ͗ů͛ĂĐƚŝǀĂƚŝŽŶĚƵ

complément, la cytotoxicité et opsonisation etc͙

Quelques applications de la réaction Ag-Ac :

1) Diagnostic des maladies infectieuses (bactéries, virus, parasites, champignons) :

- Diagnostic direct ͗ƌĞĐŚĞƌĐŚĞĚĞů͛ĂŐĞŶƚŝŶĨĞĐƚŝĞƵdž͘

- Diagnostic indirect ͗ƌĞĐŚĞƌĐŚĞĚ͛ĂŶƚŝĐŽƌƉƐspécifiques.

2) Diagnostic de pathologies affectant le système immunitaire :

- Déficits immunitaires - Maladies auto-immunes - Hypersensibilités - Syndromes lymphoprolifératifs.

III. ĞĐŚŶŝƋƵĞƐĚ͛ŝŵŵƵŶŽƉƌĠĐŝƉŝƚĂƚŝŽŶ :

1. Caractéristiques:

Une réaction de précipitation est une réaction mettant en jeu des antigènes solubles et des anticorps spécifiques

précipitants. La formation de complexes immuns aboutit à un édifice multimoléculaire qui peut dans certaines

conditions précipiter en solution.

Dans cette réaction :

- Les antigènes sont solubles et ayant plusieurs épitopes. - Les anticorps sont précipitants, polyclonaux.

2. Méthodologie:

- Selon le milieu dans lequel se déroule la réaction : Ces réactions pĞƵǀĞŶƚƐ͛ŽďƐĞƌǀĞƌ :

* Soit en milieu liquide * Soit en milieu gélifié. - Selon le procédé : * Techniques passives * Techniques accélérées par un champ électrique.

A. Précipitation en milieu liquide:

A.1 ͗ĞƚĞƐƚĚĞů͛ĂŶŶĞĂƵŽƵƌŝŶŐƚĞƐƚ :

ůƐ͛ĂŐŝƚĚ͛ƵŶƚĞƐƚ actuellement abandonné.

A. 2 ͗ĞĐŚŶŝƋƵĞƐƋƵĂŶƚŝƚĂƚŝǀĞƐĚ͛ŝŵŵƵŶŽƉƌĠĐŝƉŝƚĂƚŝŽŶĞŶŵŝůŝĞƵůŝƋƵŝĚĞ :

- Techniques permettant la quantification des CI formés en se basant sur un des phénomènes suivants:

Néphélémétrie.

Turbidimétrie.

- Techniques automatisables. - Dosage des protéines spécifiques dans les différents liquides biologiques.

B. Précipitation en milieu gélifié:

- Passives et celles accélérées par un champ électrique. - Les Ag et Ac diffusent dans le milieu gélifié.

- La précipitation est obtenue ĚĂŶƐůĂƌĠŐŝŽŶĚƵŐĞůŽƵů͛ŐĞƚů͛Ac se trouvent dans des proportions permettant la

formation du réseau. - Le gel utilisé retient les précipités dans ses mailles.

- Le gel peut être vierge c'est-à-dire sans réactif ou incorporé ĚĞů͛ŐŽƵĚĞů͛Đ͘

On retrouve:

- Techniques passives:

La technique du Mancini.

- Techniques Ě͛ŝŵŵƵŶŽƉƌĠĐŝƉŝƚĂƚŝŽŶĞŶŵŝůŝĞƵŐĠůŝĨŝĠaccélérées par un champ électrique:

* ͛lectrosynérèse. * Le Laurell * ͛Immunoélectrophorèse. * ͛Immunofixation.

Ces techniques Ě͛ŝŵŵƵŶŽƉƌĠĐŝƉŝƚĂƚŝŽŶĞŶŵŝůŝĞƵŐĠůŝĨŝĠ sont appliquées :

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