[PDF] Définition par cytométrie en flux des valeurs de référence pour 16

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AVERTISSEMENT

UNIVERSITE JOSEPH FOURIER

FACULTE DE PHARMACIE DE GRENOBLE

Année 2015 N°

MEMOIRE DU DIPLO BIOLOGIE MEDICALE

Conformément aux dispositions du décret N° 90-810 du 10 septembre 1990, tient lieu de THESE

PRESENTEE POUR

DIPLO Définition par cytométrie en flux des valeurs de référence pour 16 sous-populations

Julie PONT,

Soutenue publiquement à la Faculté de Pharmacie de Grenoble* le

07 octobre 2015

Devant le jury composé de

Monsieur le Professeur Jean-Yves CESBRON, Président du jury Madame le Docteur Marie-Christine JACOB, Directrice de thèse

Monsieur le Professeur Pascal MOSSUZ

Madame le Professeur Lydia CAMPOS-GUYOTAT

Madame le Docteur Adriana PLESA

émises dans les thèses ; ces opinions sont considérées comme propres à leurs auteurs. 1 Doyen de la Faculté : M. le Pr. Christophe RIBUOT

Mme Delphine ALDEBERT

Année 2014

STATUT NOM PRENOM DEPARTEMENT** LABORATOIRE

MCU ALDEBERT Delphine D4 LAPM_UMR SNRS

5163

PU-PH ALLENET Benoit D5

ThEMAS TIMC-

IMAG (UMR CNRS

5525)

PU BAKRI Aziz D5 TIMC-IMAG

MCU BATANDIER Cécile D1 LBFA, Inserm U1055

MCU-PH BEDOUCH Pierrick D5

ThEMAS TIMC-

IMAG (UMR CNRS

5525)

MCU BELAIDI-CORSAT Elise D5 HP2-Inserm U1042

PAST BELLET Béatrice D5 -

PU BOUMENDJEL Ahcène D3 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

MCU BOURGOIN Sandrine D1 CRI Inserm/UJF U823,

équipe 5

MCU BRETON Jean D1 L.C.I.B. - UMR E3

CEA/UJF

MCU BRIANCON-

MARJOLLET Anne D5 HP2-Inserm U1042

MCU BUDAYOVA SPANO Monika D4 IBS

PU BURMEISTER Wim D4 UVHCI, UMI 3265

UJF-EMBL-CNRS

MCU-PH BUSSER Benoit D1 CRI Inserm/UJF U823,

équipe 5

Professeur

Emérite CALOP Jean D5 -

MCU CAVAILLES Pierre D1 LAPM

MCU CHOISNARD Luc D2 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

PU-PH CORNET Murielle D4 THEREX, TIMC-

IMAG

PU-PH DANEL Vincent D5 SMUR SAMU

2

PU DECOUT Jean-Luc D2 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

MCU DELETRAZ-

DELPORTE Martine D5

Equipe SIS " Santé,

Individu, Société »-

EAM 4128) UCB

MCU DEMEILLIERS Christine D1 LBFA, Inserm U1055

PU DROUET Christian D4 AGIM - CNRS 3405

PU DROUET Emmanuel D4 UVHCI, UMI 3265

UJF-EMBL-CNRS

MCU DURMORT-

MEUNIER Claire D1 I.B.S

PU-PH FAURE Patrice D1 HP2-Inserm U1042

PRCE FITE Andrée D6 -

PRAG GAUCHARD Pierre-Alexis D3 -

MCU-PH GERMI Raphaëlle D4 UVHCI, UMI 3265

UJF-EMBL-CNRS

MCU GEZE Annabelle D2 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

MCU GILLY Catherine D3 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

PU GODIN-RIBUOT Diane D5 HP2-Inserm U1042

PRCE GOUBIER

MATHYS Laurence D6 -

Professeure

Emérite GRILLOT Renée D4 -

MCU GROSSET Catherine D2 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

MCU GUIEU Valérie D2 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

MCU HININGER-

FAVIER Isabelle D1 LBFA, Inserm U1055

MCU JOYEUX-FAURE Marie D5 HP2-Inserm U1042

MCU KHALEF Nawel D5 TIMC-IMAG

MCU KRIVOBOK Serge D3 IRTSV

PU LENORMAND Jean Luc D1 THEREX, TIMC-

IMAG

PU MARTIN Donald D1 TIMC-IMAG, UMR

5525 UJF-CNRS

MCU MELO DE LIMA Christelle D4 L.E.C.A

PU-PH MOSSUZ Pascal D4 THEREX, TIMC-

IMAG

MCU MOUHAMADOU Bello D3 L.E.C.A

MCU Edwige D3 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

3

MCU OUKACINE Farid D2 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

MCU PERES Basile D3 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

MCU PEUCHMAUR Marine D3 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

PU PEYRIN Éric D2 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

MCU RACHIDI Walid D1 L.C.I.B - UMR E3

CEA/UJF

MCU RAVELET Corinne D2 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

PU RIBUOT Christophe D5 HP2-Inserm U1042

PAST RIEU Isabelle D5 -

Professeure

Emérite ROUSSEL Anne -Marie D1 -

PU-PH SEVE Michel D1

CR INSERM / UJF

U823 Institut Albert

Bonniot

MCU SOUARD Florence D3 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

MCU TARBOURIECH Nicolas D4 UVHCI, UMI 3265

UJF-EMBL-CNRS

PAST TROUILLER Patrice D5 -

MCU VANHAVERBEKE Cécile D2 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

PU WOUESSIDJEWE Denis D2 DPM, UJF/CNRS

UMR 5063

** D1 : Département " Mécanismes Biologiques des Maladies et des Traitements (DMBMT)» D2 : Département "Bases Physicochimiques du Médicament »

D3 : Département "Origine, Obtention et Optimisation des Principes Actifs des Médicaments » (O3

D4 : Département " Bases immunologiques, Hématologiques et Infectieuses des Maladies et

Médicam

D5 : Département " Médicaments et Produits de Santé »

D6 : Département " Anglais »

ATER

CHU : Centre Hospitalier Universitaire

CIB :

CRI : Centre de Recherche Institut

CNRS : Centre National de Recherche Scientifique

DCE : Doctorants Contractuels

DPM : Département de Pharmacochimie Moléculaire et de Cognition et Ontogenèse » HP2 : Hypoxie Physiopathologie Respiratoire et Cardiovasculaire IAB : Institut Albert Bonniot, Centre de Recherche " Oncogenèse IPB :

IBS : Institut de Biologie Structurale

JR : Jean Roget

LAPM : Laboratoire Adaptation et Pathogenèse des Microorganismes LBFA : Laboratoire Bioénergétique Fondamentale et Appliquée LCBM : Laboratoire Chimie et Biologie des Métaux LCIB : Laboratoire de Chimie Inorganique et Biologie

LECA :

LR : Laboratoire des Radio pharmaceutiques

LR : Laboratoire des Radio pharmaceutiques

MCU : Maitres de Conférences des Universités MCU-PH : Maîtres de Conférences des Universités et Praticiens Hospitaliers

PAST : Professeur Associé à Temps Partiel

PRAG : Professeur Agrégé

PRCE :

PU : Professeurs des Universités

PU-PH : Professeurs des Universités et Praticiens Hospitaliers

TIMC-IMAG :

UMR: Unité Mixte de Recherche

UVHCI: Unit of Virus Host Cell Interactions

REMERCIEMENTS

A Monsieur le Professeur Jean, pour avoir accepté la présidence de ce jury, pour

A Madame le Docteur Marie

ce travail de thèse. Merci pour votre grande disponibilité, votre rigueur, votre sympathie, et aussi pour

ses lors de mon passage au labor A Monsieur le Professeur Pascal Mossuz, pour avoir accepté de juger ce travail A Mesdames le Professeur Lydia Camp , merci pour votre que spécialistes. , pour ces deux seme effectué ensemble.

A s leur

A mes amis grenoblois

A mes amies

A toute ma famille Bubu, Annie et Barbara

, pour ces souvenirs inoubliables que vous me laissez, pour toutes ces A mes parents, vous avez toujours été là pour moi, vous avez toujours vous aime tant. A Guillaume, pour ces huit belles années passés ensemble, pour ton amour de chaque jour. A nos

A la famille de Guillaume

Table des matières

REMERCIEMENTS

Apport de la CMF dans l'Ġtude des hĠmopathies malignes Eǀaluation de l'hĠmodilution͗ reǀue de la littĠrature

Preuǀe de l'hĠmodilution

Eǀaluation de l'hĠmodilution

II. MISE AU POINT DE CRITERES CYTOMETRIYUES D'APPRECIATION DE LA PURETE MEDULLAIRE Calcul de l'indice de puretĠ par la mĠthode d'Holdrinet 3. III.

Organisation de l'Ġtude

LISTE DES FIGURES

Figure 1 ͗ Les compartiments de l'hĠmatopoŢğse (d'aprğs (10)) Figure 2 ͗ Les siğges de l'hĠmatopoŢğse au cours de la ǀie (d'aprğs (11)) (13))

II (d'aprğs (1))

Figure 5 donnĠes obtenues en CMF (d'aprğs(19))

Figure 6 ͗ PhĠnotype de la lignĠe granuleuse neutrophile au cours de sa maturation (d'aprğs (23) et (24))

Figure 7 urs de sa maturation (d'aprğs (23) et (24))

Figure 8 ͗ PhĠnotype de la lignĠe ĠrythroŢde au cours de sa maturation (d'aprğs (23))

Figure 9 ͗ CorrĠlations entre diffĠrentes populations mĠdullaires et l'indice de puretĠ d' Holdrinet (test de

Spearman)

Figure 10 ͗ Valeur de l'IP en fonction de la rĠpartition de 106 moelles en 3 groupes selon les seuils fidžĠs sur le

rapport GRIM/PNN

Figure 11

LISTE DES TABLE

Tableau 2 2 ͩ (d'aprğs (20))

Tableau 3 ͗ DiffĠrenciation des lymphocytes B (d'aprğs (28))

Tableau 4

Tableau 5

Tableau 6 ͗ RĠcapitulatif des critğres d'Ġǀaluation de l'hĠmodilution de la moelle osseuse retrouǀĠs dans la

littérature

Tableau 7

Tableau 9

Tableau 10

Tableau

Tableau 12

rapport GRIMͬPNN et par la mĠthode d'Holdrinet (test de Fisher edžact).

Tableau 13

d'Ġrythroblastes et par la mĠthode d'Holdrinet (test du Khi2).

Tableau 14

Tableau 15

Tableau 16 ͗ Comparaison du score et du rapport GRIMͬPNN pour l'Ġǀaluation de la puretĠ mĠdullaire (test

de Fisher exact)

Tableau 17

donné par EuroFlow

Tableau 19

LISTE DES ANNEXES

Annexe 1 ͗ Classification des hĠmopathies selon l'OMS 2008................................ les sous populations de la moelle osseuse référence pour les sous populations de la moelle osseuse de valeurs de référence pour les sous populations de la moelle osseuse

LISTE DES ABREVIATION

APC : A

MO de la moelle osseuse en 8 couleurs I

La cytométrie une

Toutes ces nouveautés ont

à reconnaitre les aberrations phénotypiques même celles présentes sur notypage par CMF est devenu un outil indispensable pour le diagnostic, le plusieurs pathologies a orienter ensuite orps hologique du myélogramme entes ations La première difficulté a été de sélectionner des moelles " sains, sans pathologie et sans traitement ous avons s en pratique, nous avons par CMF uniquement, ans. avantce tube en 8 couleurs à e

des laboratoires de biologie médicale, nous avons choisi une approche standardisée des protocoles de

I. GENERALITES

A. La moelle osseuse

1. Rôle

a) Définition production

Les cellules sanguines sont pour la plupa

b) Organisation fonctionnelle de l'hĠmatopoŢğse Dans mettant en évidence les cellules les

ème

programmées, multipotentes (CFU

Le 3ème

ème

Figure ͗ Les compartiments de l'hĠmatopoŢğse ~[quotesdbs_dbs28.pdfusesText_34

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