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Comment mettre en évidence les bactéries dans leur intégralité ?

Les méthodes mettant en évidence les bactéries dans leur intégralité sont basées principalement sur les techniques de microscopie en l’absence de coloration (l’état frais), ou après coloration, et sur les techniques de culture sur milieu artificiel.

Quels sont les différents types d’ensemencement sur boites?

Il existe plusieurs techniques d’ensemencement sur boites : 1er Isolement ou épuisement : -C’est la technique des 4 quadrants qui consiste à disperser le microorganisme à la surface d’un milieu solide afin d’obtenir des colonies séparées, ainsi permet de retrouver

Quel est le risque de contamination en cas d’ensemencement de plusieurs échantillons dans le même milieu de culture ?

Analyse et interprétation des résultats : D’après les résultats obtenus, et les réponses à la question (N°08), 75% des techniciens pensent qu’il n’y a pas de risque de contamination en cas d’ensemencement de plusieurs échantillons dans le même milieu de culture, 25% ne donnent aucune réponse.

i f v m i d i-p y r é n é e s - r e n c o n t r e t e c h n i q u e m i c r o-o r g a n i s m e s e t g e s t i o n t h e r m i q u e18

l a c o-i n o c u l a t i o n l e v u r e s-b a c t é r i e s : i n t é r Ê t e t m i s e e n o e u v r e v. g e r b a u x (1) , c. br i f f o x (1) e t v. le m p e r e u r (2). (1) ifv, un i t é d e be a u n e (21200) (2) ifv, u n i t é d e vi l l e f r a n c h e / sa ô n e (69600)

Les Enjeux

principaux : réductions des coûts et des délais de production, d'une part, et préservations des qualités sensorielles et hygiéniques des vins, d'autre part. Elle doit s'inscrire dans une problématique oenologique intégrant la gestion des risques microbiologiques et l'optimisation de l'élevage.

Un intérêt de l'utilisation de biomasses

préjudiciable aux qualités sensorielles et hygiéniques des vins : production de phénols volatils dans les vins rouges par

Brettanomyces

, production d'acide acé- tique et d'acétate d'éthyle par les bacté- ries acétiques. Les bactéries lactiques mine, tyramine, putrescine), ce qui n'est normalement pas le cas des biomasses sélectionnées. Pour les vins blancs, une stabilisation microbiologique précoce peut éviter une évolution oxydative non souhaitée. Dans ces conditions, il est facile de penser que des fermentations maîtrisées et rapides conduisent à la qualité optimale. Mais, cette analyse n'est pas toujours valable. En effet, certains vins ajout de SO2. Cette phase permet une meilleure stabilisation de la cou- ou une évolution positive des composés phénoliques. La FML ne doit alors pas être trop précoce... ni trop tardive à cause des risques micro- biologiques précédemment décrits. Une affaire de compromis.

1. Le moment de l'ensemencement bactérien

Si moment du levurage est bien positionné, celui de l'ensemencement bactérien peut donc être discuté. Classiquement, il est réalisé à la de cellules /ml) chute rapidement et laisse le champ libre pour les bac- téries lactiques. Un ensemencement bactérien apporte alors environ assurer la réalisation de la FML. Le moment de l'ensemencement bactérien est donc un point clé dans la gestion de la FML : Co-inoculation levures / bactéries lactiques pour une réalisation rapide de la FML et une bonne prévention des de la FA pour une réalisation plus tardive, mais maîtrisée de la FML. L'ensemencement en cours de FA doit aussi être discuté, tandis que l'ensemencement tardif, en cours d'élevage, n'a qu'un int

érêt curatif.

2. Les risques de la co-inoculation

techniques. Saccharomyces cerevisiae transforme les sucres, ainsi

la phase de croissance, une petite quantité d'acide acétique est pro-duite (de l'ordre de 0.25 g/l pour les vins secs). Les bactéries lactiques

l'acide citrique (présent en faible quantité, env. 0.25 g/l) est dégradé, in- de diacétyle. Ce dernier peut donner des notes beurrées aux vins jeunes. pas la FA, cette succession métabolique peut être modi- sont en effet capables de dé- grader massivement les su- cres résiduels en produisant acides acétique et D lacti- que. C'est la piqure lactique.

Mais, pratiquement, cette

altération ne peut se déclen- l'acide malique, voir de l'aci- de citrique. De plus, en des- sous d'un pH de l'ordre de

3.2, les bactéries lactiques

régressent spontanément en

A l'inverse, les bactéries lac-

tiques peuvent être victimes d'un milieu trop défavorable, limitant leur implantation. re, la plus active pour les micro-organismes, augmente pour les valeurs de pH basses, mais aussi pour des températures en hausse. Le pH joue donc un double rôle pour les bactéries lactiques : inhibiteur en temps que au pressurage ne doit pas dépasser 25 mg/l pour un moût de pH 3.0 et

50 mg/l pour un moût de pH 3.3. Hors, pour éviter le brunissement d'un

s'impose. Donc du point de vue pratique, pour co-inoculer un moût acide, Figure 1 : Comparaison de moments d'ensemencement

Figure 2

des bactéries dans un Chardonnay (populations à 10 jours)

i f v m i d i-p y r é n é e s - r e n c o n t r e t e c h n i q u e m i c r o-o r g a n i s m e s e t g e s t i o n t h e r m i q u e

rouge ou en blanc type chardonnay), soit de décaler l'ensemencement bactérien pour attendre la combinaison du SO2 par le métabolisme levu- rien. L'ensemencement séquentiel peut alors être réalisé quelques jours La température au moment de l'ensemencement bactérien est aussi un élément important à prendre en compte. Contrairement aux idées re- çues, une température fraîche (maximum 16°C) favorise l'implantation d'effet de la souche de levure utilisée sur le délai de réalisation de la FML d'un chardonnay ensemencé en Les meilleurs résultats de co-inoculation levures / bactéries lactiques ont été obtenus pour les vins rou- ges primeurs. De nombreux travaux ont été réalisés conjointement avec l'unité IFV de Villefranche / Saône la faible quantité de jus initial. Pour éviter une situa- dose réduite de bactéries lactiques. Il est ainsi possible de faire chevaucher les deux fermentations, sans pro- pré-fermentaire à chaud (MPC) est de plus en plus uti- lisée pour les vins primeurs. L'extraction préalable de

composés phénoliques, la plus grande quantité de jus, ainsi que la macération écourtée, impose une gestion

différente de la co-inoculation. Pour garder son intérêt en termes de gain de temps pour la réalisation de la FML, il est alors conseillé d'utiliser une dose normale de bactéries lactiques (Fig. 4).

Conclusions

L'intérêt de la co-inoculation levures / bactéries lacti- ques est fort pour les vins primeurs (notamment les vins rouges) pour des raisons de contraintes de temps. Il est fort aussi pour les vins rouges présentant des risques d'altérations microbiologiques importants. L'intérêt de la co-inoculation est moyen pour les vins qualités sensorielles. Il est indispensable de bien ap- préhender les conditions d'implantation des bactéries. L'intérêt de la co-inoculation est nul pour les vins rou- ges à risques microbiologiques modérés qui peuvent sans SO2. Il est aussi nécessaire de rappeler l'importance du choix de la biomasse dans la réussite d'un ensemencement bactérien. L'IFV sélectionne des souches de bactéries lactiques et développe des biomasses en parte- nariats avec des fabricants et distributeurs. Les résultats présentés ont été obtenu avec Lalvin 31, Vitilactic F et FML Expertise S, pour les vins rouges et, avec Vitilactic H+, pour les vins blancs.

Figure 3

Figure 4

: Gamay avec macération pré-fermentaire à chaudquotesdbs_dbs14.pdfusesText_20
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