[PDF] Série 6: Chromatographie dexclusion stérique

View - Download Série 6: Chromatographie dexclusion stérique

Previous PDF

Next PDF

Méthodes de Séparation 2010-2011 Nathalie Younan Série 6: Chromatographie d'exclusion stérique

Exercice 1 : Indices de Kovats

Au cours de la séparation d'un mélange d'hydrocarbures, les temps de rétention mesurés sont :

Propane 2.23 min

Isobutane 5.71 min

Butane 6.67 min

Quel est l'indice de Kovats pour chaque composé ?

Exercice 2 : Perte de charge dans une colonne

1) Citer l'équation de Darcy en présentant les différents paramètres qu'elle contient.

2) Lorsqu'on compare une colonne de longueur L et une colonne de longueur 2L (de

même diamètre intérieur, avec des grains de phase stationnaire identiques et une même qualité de remplissage), comment la perte en charge (pression en tête de colonne) évolue-t-elle : - à débit identique ? - à débit divisé par deux ?

RAPPEL

Le volume total V

M de la phase mobile dans la colonne peut être décomposé en deux parties : - le volume interstitiel V i (extérieur des pores) - le volume des pores V p Pour une molécule de taille intermédiaire, le volume d'élution est : V e =V i +KV p

K, coefficient de diffusion, représente le degré de pénétration d'une espèce présente

dans le volume V p (0Exercice 3 : Une colonne de filtration sur gel a un rayon r de 0.80 cm et une longueur l de 20 cm. a) Calculer le volume de la colonne. b) Le volume V i de la phase mobile en dehors des particules du gel est de 18.1 ml et le volume total de la phase mobile est de 35.8 ml. Déterminer le coefficient K pour un soluté élué à 27.4 mL. Méthodes de Séparation 2010-2011 Nathalie Younan

Exercice 4 :

Une colonne HPLC d'exclusion moléculaire avec résine polystyrène a un diamètre de

7.8 mm et une longueur de 30 cm. La proportion solide des particules du gel occupe

20% du volume, les pores occupent 40% et le volume entre les particules 40%.

a) A quel volume les molécules totalement exclues sortiraient de la colonne ? b) A quel volume sortiraient les plus petites molécules ? c) Un mélange de polyethylène glycols de masses moléculaires différentes est élué entre 23 et 27 mL. Qu'est-ce que cela implique concernant les mécanismes de rétention de ces solutés dans la colonne ?

Exercice 5 :

On chromatographie une solution dans le tetrahydrofuranne (THF) d'un mélange de polystyrènes de masses moléculaires connues sur une colonne (I.D=7.5mm, L=

300mm) dont le domaine de perméation s'étend de 400 à 30 000 daltons. La phase

éluante est du THF. Son débit est 1mL/min. La détection UV est effectuée à 254nm. A partir du chromatogramme obtenu reproduit ci-après : a) Calculer le volume d'exclusion total (volume interstitiel) et le volume des pores de la colonne utilisée. b) Calculer le coefficient de diffusion K pour le composé de masse 3250 Da. c) On observe quelquefois en chromatographie d'exclusion stérique des valeurs de K supérieures à 1. Interpréter ce phénomène.

Exercice 6 :

Les composés suivants sont séparés par chromatographie d'exclusion stérique. a) Par quelle méthode peut-on évaluer la masse moléculaire de composés inconnus ? b) Estimer la masse moléculaire du soluté inconnu.

Composés Vr (mL) Masse moléculaire (Da)

Blue Dextran 2000 17.7 2.10

6

Aldolase 35.6 158000

Catalase 32.3 210000

Ferritin 28.6 440000

Thyroglobulin 25.1 669000

Inconnu 30.3 ?

quotesdbs_dbs30.pdfusesText_36

[PDF] chromatographie dexclusion exercice corrigé

[PDF] volume hydrodynamique

[PDF] chromatographie par perméation de gel (gpc)

[PDF] exercice chromatographie corrigé pdf

[PDF] qcm sur la chromatographie

[PDF] qcm chromatographie chimie analytique

[PDF] qcm chromatographie phase gazeuse

[PDF] exercices acides aminés biochimie

[PDF] qcm chromatographie pdf

[PDF] ionisation de l'histidine

[PDF] calcul phi acide aminé

[PDF] ionisation des acides aminés cours

[PDF] méthode de dosage des acides aminés

[PDF] 20 acides aminés tableau

[PDF] dosage des acides aminés par hplc