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Séparation des pigments chlorophylliens par chromatographie de partage sur colonne avec différents supports. Page 7. 6. Annexe 1 : Fiche réactifs. Page 8. 7.



Extraction et séparation de la chlorophylle

La chromatographie sur couche mince permet une séparation des pigments dans un On obtient donc plusieurs couleurs suivant les pigments chlorophylliens.



Protocole extraction des pigments chlorophylliens et

Protocole extraction des pigments chlorophylliens et chromatographie. Beaucoup de produits cosmétiques contiennent de la chlorophylle surtout des produits 



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a) Extraction de la chlorophylle brute. L'extraction des pigments peut se réaliser sur différents types de feuilles de plantes supérieures et aussi.



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  • Comment réaliser une chromatographie de pigments chlorophylliens ?

    Protocole de la chromatographie
    - Déposer à environ 2 cm du bas de la bande, une dizaine de gouttes de la solution de chlorophylle brute obtenue, en séchant entre chaque dépôt. - Verser du solvant organique dans l'éprouvette ; la tache de chlorophylle brute doit être située au-dessus du niveau du solvant.
  • Quel est le principe de l'extraction des pigments chlorophylliens dans les feuilles ?

    1) Principe
    Plusieurs gouttes de solution de chlorophylle sont déposées sur la phase fixe à l'aide d'un capillaire pour former une t?he. La plaque de silice est mise en contact avec la phase liquide qui va migrer et entrainer les pigments de la chlorophylle par capillarité.
  • Quelle technique permet de séparer les pigments chlorophylliens ?

    Les chlorophylles et les caroténo?s sont solubles dans des solvants organiques et peuvent donc être séparés à l'aide de solvants ou de mélanges de solvants des lipides.
  • Elle peut être extraite en utilisant différents solvants, tels que l'acétone ou l'éthanol, qui permettent sa solubilisation. Cependant, la chlorophylle n'est pas stable et peut se dégrader, phénomène que l'on observe en automne lors du jaunissement des feuilles.
Chromatographie sur papier : on dépose une goutte de pigments

Hyp : la chlorophylle absorbe les photons de la lumière et convertit l'énergie lumineuse pour permettre

la photolyse de l'eau et les oxydoréductions mises en évidence précédemment.

2. La lumière, source d'énergie de la photosynthèse est captée par la chlorophylle.

TP BAC : TP : Extraction de la chlorophylle + spectroscope a) Extraction de la chlorophylle brute.

L'extraction des pigments peut se réaliser sur différents types de feuilles de plantes supérieures et aussi

sur des thalles d'algues, quelle que soit leur couleur apparente due à des pigments supplémentaires.

Protocole

: 1 page 196. b) Sépar.ation des pigments chlorophylliens.

Démonstration : séparation des pigments dans une ampoule à décanter. Cette expérience montre que

les pigments (verts et jaunes : chlorophylles et caroténoïdes) sont solubles dans les solvants organiques.

La solution se sépare en 2 phases : La phase

éthérée, verte, contient la plupart des pigments et la phase hydro-alcoolique (ou hydro-acétonique), jaune, une partie des xanthophylles seulement. Elle permet de recueillir une solution très propre permettant de réaliser un spectre ou une chromatographie.

Cette expérience peut être réalisée chez toutes les plantes "vertes", même chez celles dont les feuilles

apparaissent colorées en rouge violet. Avec une feuille de prunus à feuilles rouges, les solutions d'extraction

(hydro alcoolique ou hydro acétonique) apparaissent vert jaune. La séparation montre une phase éthérée bien

verte (elle contient les pigments solubles dans les solvants organiques, chlorophylles et caroténoïdes) et une

phase hydro alcoolique (ou hydro acétonique), rouge violacée qui contient outre un peu de xanthophylle, des

pigments anthocyaniques solubles dans l'eau.

Remarque : les couleurs variées de ces types de feuilles sont dues aux proportions relatives des différents types de pigments

(chlorophylles et caroténoïdes) et anthocyanes, ces dernières pouvant varier du rouge au bleu.

Principe : la chromatographie consiste à entraîner des molécules par un solvant sur un support (papier

ou gel de silice). Sur un support donné et avec un solvant donné, chaque pigment possède une vitesse

de déplacement qui lui est propre.

Manipulation

: séparation par chromatographie. Suivez le protocole page 196 pour la réalisation.

Résultats

Chromatographie sur papier :

on dépose une goutte de pigments bruts sur une feuille de papier. On place la feuille de papier dans un récipient hermétique dans lequel on a placé un solvant approprié. Le solvant monte dans la feuille par capillarité en entraînant les pigments de manière différentielle selon leur affinité avec le solvant. On peut distinguer ainsi deux catégories principales de pigments : les chlorophylles (vertes) et les caroténoïdes (jaunes).

Pigments

Xanthophylles

c). Spectre d'absorption de la chlorophylle brute.

Principe

: Doc 3 page 197.

Manipulation

: analysez le spectre d'absorption de votre chlorophylle brute, puis des pigments séparés dans l'ampoule à décanter, à l'aide su spectroscope.

H Résultats : (3 page 197)

Les chlorophylles et les

caroténoïdes absorbent certaines radiations dites actives pour la photosynthèse, dans la gamme de longueurs d'onde visibles comprises entre 400 et 700 nm.

L'absorption maximale se

réalise - dans le bleu (< 500nm) et - dans le rouge (650-700 nm).

A partir d'une solution de

pigments, on peut donc mesurer les caractéristiques d'absorption de la lumière en réalisant un spectre d'absorption à l'aide d'un spectrophotomètre UV visible classique, qui permet de mesurer l'absorption en fonction de la longueur d'onde. A : Spectre de la lumière blanche. B : Spectre d'absorption de la chlorophylle brute (mélange de pigments)

La réalisation de la photosynthèse par les chloroplastes des végétaux met en jeu un ensemble de

molécules particulières, nommées pigments photosynthétiques. Le terme de "pigment" correspond au

fait que ces molécules sont colorées, de part leur capacité à capter certaines radiations lumineuses.

Ces pigments sont de trois types : (structures hors programme) H Les chlorophylles, présentes chez tous les végétaux autotrophes au carbone.

Les chlorophylles sont constituées

d'un noyau tétrapyrrolique avec un magnésium en son centre, et estérifié avec un alcool à très longue chaine en C 20 (le phytol).

Dans la membrane des thylakoïdes, les

chlorophylles sont associées à des protéines et forment des complexes protéines/pigments. H Les caroténoïdes, présents chez tous les végétaux autotrophes au carbone.

Les caroténoïdes sont des molécules

constituées de 40 carbones, avec deux extrémités cyclisées reliées par une longue chaîne de 8 unités isoprènes.

H Spectres d'absorption : (5 page 197)

Les chlorophylles et les caroténoïdes absorbent certaines radiations dites actives pour la photosynthèse, dans la gamme de longueurs d'onde visibles comprises entre 500 et 700 nm. H Les phycobilines, présents exclusivement chez les algues et les cyanobactéries.quotesdbs_dbs2.pdfusesText_2
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