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Protocole extraction des pigments chlorophylliens et chromatographie. Beaucoup de produits cosmétiques contiennent de la chlorophylle surtout des produits
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Extraction et séparation de la chlorophylle
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Extraction et séparation de la chlorophylle
La chromatographie sur couche mince permet une séparation des pigments dans un On obtient donc plusieurs couleurs suivant les pigments chlorophylliens.
Protocole extraction des pigments chlorophylliens et
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Comment réaliser une chromatographie de pigments chlorophylliens ?
Protocole de la chromatographie
- Déposer à environ 2 cm du bas de la bande, une dizaine de gouttes de la solution de chlorophylle brute obtenue, en séchant entre chaque dépôt. - Verser du solvant organique dans l'éprouvette ; la tache de chlorophylle brute doit être située au-dessus du niveau du solvant.Quel est le principe de l'extraction des pigments chlorophylliens dans les feuilles ?
1) Principe
Plusieurs gouttes de solution de chlorophylle sont déposées sur la phase fixe à l'aide d'un capillaire pour former une t?he. La plaque de silice est mise en contact avec la phase liquide qui va migrer et entrainer les pigments de la chlorophylle par capillarité.Quelle technique permet de séparer les pigments chlorophylliens ?
Les chlorophylles et les caroténo?s sont solubles dans des solvants organiques et peuvent donc être séparés à l'aide de solvants ou de mélanges de solvants des lipides.- Elle peut être extraite en utilisant différents solvants, tels que l'acétone ou l'éthanol, qui permettent sa solubilisation. Cependant, la chlorophylle n'est pas stable et peut se dégrader, phénomène que l'on observe en automne lors du jaunissement des feuilles.
Principe :
C'est une technique de séparation des substances présentes dans un mélange ; elle utilise la migration
d'un liquide appelé phase mobile (mélange de solvants) sur un support solide appelé phase stationnaire
(une plaque de silice). Les constituants du mélange sont séparés dans le cas présent en fonction de leur
polarité. Le protocole proposé ici permet la substitution de l'éther de pétrole (CMR de classe 2) par des
solvants non CMR.Matériel :
-1 plaque de silice (référence : 35818131 servilab, Plaque de CCM Sil G/UV254 50 plaques) -1 pilon + mortier -1 pincée de sable fin -10 mL d'éthanol dans une éprouvette de 10mL ou 25mL -1 filtre + entonnoir -1 bêcher de 50mL -3 feuilles d'épinards (ou : Arum, feuilles de millepertuis, feuilles de géranium...) -1 pipette en plastique type capillaire (référence : 7075335 servilab) pour le dépôt -1 bêcher de 100mL forme haute recouvert d'un couvercle de boite de pétri en verre (cuve chromatographique) -1 solvant composé d'un mélange 30/70 d'acétate d'éthyle et de cyclohexane (solvants non CMR)Protocole :
Attention : la plaque CCM doit être manipulée avec des gants.1.Extraire les pigments en broyant les feuilles à l'aide d'un
mortier, ajoutez 10 mL d'éthanol et une pincée de sable.Filtrer et récupérer l'extrait obtenu
2.Au préalable vous aurez versé l'éluant dans le bêcher de
forme haute que vous aurez recouvert du couvercle de boite de Pétri, servant de cuve à chromatographie. Attendre 5 min avant d'y ajouter la plaque de silice une fois le dépôt fait de sorte que les vapeurs de l'éluant aient saturé la cuve3.Tracer la ligne de dépôt au crayon à environ 1.5cm du bord
4.A l'aide de la pipette en plastique effectuer le dépôt de
l'extrait chlorophyllien. Ne pas hésiter à déposer une goutte, attendre qu'elle soit absorbée, puis en déposer une seconde. La tâche doit être fine 5 mm de diamètre. Attention : le dépôt de l'extrait ne doit pas être en contact avec la phase mobile5.Attendre environ 15 min lorsque le front de migration arrive à
1.5cm du bord supérieur de la plaque.
Règles d'hygiène et de sécurité
-Port de la blouse. -Port des gants. -Port des lunettes pour l'utilisation du solvant. -Les solvants sont à manipuler sous hotte. Attention : le solvant ne doit pas être jeté dans les éviers (solvants dans le bidon plastique de récupération prévu à cet effet). Eric de Rancourt - Lycée F. Rabelais de Chinon - eric.de-rancourt-mimerand@ac-orleans-tours.frquotesdbs_dbs10.pdfusesText_16[PDF] chromatographie d'adsorption sur colonne de silice
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