[PDF] Suivi virologique des hépatites chroniques B

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Prolonger votre offre de soins, jour après jour

Suivi virologique

des hépatites chroniques Bdes hépatites chroniques B à la lumière des recommandations européennes

EASL 2009

Dr Jean-Dominique POVEDA

LaboratoireCerba

Prolonger votre offre de soins, jour après jour Prolonger votre offre de soins, jour après jour

Introduction

•Epidémiologie •Le virus •Le diagnostic •Les traitements actuels •Les recommandations 2009•Les recommandations 2009 -En matière de diagnostic et de suivi virologique -En matière de traitement -En matière de suivi sous traitement Prolonger votre offre de soins, jour après jour

Les recommandations EASL 2009

Gastroentérologie clinique et biologique 2009, 33, 539-554

JHepatology2009, 50, 227-242

Prolonger votre offre de soins, jour après jour Hépatite B : épidémiologie : zones d'endémie

Source : OMS

Prolonger votre offre de soins, jour après jour Hépatite B : épidémiologie hépatites B chroniques

Source : CDC

Prolonger votre offre de soins, jour après jour Hépatite B : épidémiologie : hépatites aiguës : USA Incidence of acute hepatitis B, by year, United States, 1982 - 2007 (CDC) Prolonger votre offre de soins, jour après jour Hépatite B en France : hépatites aiguës, passage à la chronicité

Source : INVS-BEH-20/21-Mai 2009

Prolonger votre offre de soins, jour après jour Hépatite B en France : hépatites chroniques, mortalité

Source : INVS-BEH-20/21-Mai 2009

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Le virus de l'hépatite B

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Cycle de réplication du VHB

Source : CCO

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AcAnti-HBe

DNAVHB

ALT activité

HépatiteBchronique: histoirenaturelle

AgHBe

PhaseImmuno-

Tolérance

Clairance

Immune

Etatde

portageinactif

Réactivation

FoieInflammation et

fibroseminimes

Inflammation

chroniqueactive

Hépatite

modéréeet fibroseminime

Inflammation

active Yim HJ, et al. Hepatology.2006;43:S173-S181.Indicationsoptimalesdutraitement

DNAVHB

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Marqueurs d'une hépatite B chronique

Découverte systématique :

-AgHBs,Acanti-HBctotaux,Acanti-HBs -Confirmation de l'AgHBspar neutralisation. -Persistance de l'AgHBsplus de 6 mois -Acanti-HBcIgMnégatifs ou limites

Bilan d'évaluation virologique :

-AgHBs, -Acanti-HBeet si négatif AgHBe. -ADN circulant +++ -Acanti-Delta, ARN Delta siAcpositifs -Autresco-infectionspossibles (VIH-VHC) -Acanti-HBcet anti-HBsinutiles Prolonger votre offre de soins, jour après jour

Marqueurs d'une hépatite B chronique

Immuno

tolérance

Immuno

élimination

Latence

Portage inactifRéactivationMutant pré-

Core

Mutant S ?

HCB occulte ?

Ag HBs++++++++++±

Ac anti-HBc++++++ ou±

Ac anti-HBc IgM-±-±--Ac anti-HBc IgM-±-±--

Ac anti-HBs-----±

Ag HBe++-±-±ou+

Ac anti-HBe--+±+±ou+

ADN viral+++++±ou+++++±à++

Prolonger votre offre de soins, jour après jour Hépatites B chroniques : Intérêt de l'ADN viral

PortageinactifHépatitechroniqueAgHBe+

Fluctuant

103-108

copies/ml<104copies/ml>106copies/ml

HépatitechroniqueAgHBe-

Prolonger votre offre de soins, jour après jour Hépatite B chronique : bilan initial si AgHBenégatif

Portage inactif ou risque évolutif ?

•Rémission spontanée possible ? •Evolution vers la fibrose ? •Un seul bilan insuffisant Source : Gastroentérologie clinique et biologique 2009, 33, 539-554 Prolonger votre offre de soins, jour après jour Hépatites B chroniques : Intérêt de l'ADN viral : Etude REVEAL :CV comme facteur prédictif d'évolution (Clin Liv Dis 2007, 11, 797-816) •Lien direct entre charge virale et risque de progression vers CHC •CV > 300 copies/ml (60 UI/ml) et < 104copies (2.000

UI/ml) :

»RR = 1.1

•CV > 104copies (2.000 UI/ml) et < 105copies (20.000

UI/ml)

»RR = 2,3

•CV > 106copies (200.000 UI/ml)

»RR = 6,1

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VHB : les tests moléculaires disponibles

Détection et quantification de l'ADN viral circulant: •Hybridation •PCR •PCR temps réel

Analysequalitative du génome détecté:

•Détermination du génotype : intérêt ? •Recherche de mutations ponctuelles -Mutants pré-core -Mutants d'échappement -Mutants de résistance au traitement Prolonger votre offre de soins, jour après jour Tests de quantification de l'ADN viral : hybridation sur filtre Prolonger votre offre de soins, jour après jour

Pré-amplificateur*R

9 (¯¯T"HS°&

%S99S±²0°³&:´:´µ

G¸°

EI BT /F9 9.96 Tf

1 0 0 1 141.84 315.04 Tm

[(ARNcible

Label Extender*

(LE)

Sondes*

marquées hybridées à l'Amplificateur* Quantification de l'ADN viral : hybridation : ADN branché

Hybridationsavec

amplification du signal avec automatisation des résultats en quelques heures...

Microplaque

(LE)

Capture

Extender

(CE)

Sonde de Capture

Prolonger votre offre de soins, jour après jour Quantification de l'ADN viral : PCR en temps réel automatisée Prolonger votre offre de soins, jour après jour

Quantification de l'ADN viral : performances

•Les tests d'hybridation -2.000-100.000.000 copies/mL •La PCR "classique» -60-38.000UI/mL •La PCR en temps réel -TaqManRoche,RealtimeAbbott

Sensibilité :10-20UI/mL

Linéarité :100-170.000.000 UI/mL

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Recommandations 2009. Mesure de l'ADN viral

Source : Gastroentérologie clinique et biologique 2009, 33, 539-554 Prolonger votre offre de soins, jour après jour

Standardisation en UI/ml. Facteurs de conversion

•1 UI = environ 5 copies

Source : CCO

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Génotypage par la technique InnoLiPATM

Amplicons degénotype 1

SUBSTRAT

CHROMOGEN

EPRECIPITE

PHOPHATAS

EALCALINESTREPTAVIDIN

E

SONDES

spécifiques de génotypes E

BIOTINE

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