[PDF] BIOLOGIE MOLÉCULAIRE Techniques de génie gé

View - Download BIOLOGIE MOLÉCULAIRE

Previous PDF

Next PDF

BIOLOGIEMOLÉCULAIRE

COURSDE3

ÈME

ANNÉEGBA

2016 -2017

CAROLINESTRUB

caroline.strub@umontpellier.fr

6 x 1,5h de cours

1,5h de TD

Etude dun article scientifique par groupe de 4

= > évaluation : Poster (Format A4) + oral (15-20 minutes ) en Janvier 2017 = > plus dinfo pendant les TP

SOMMAIRE

Biologie moléculaire

IMatériel génétique

II Réplication

III Transcription et traduction

IV Mutations, réparations de lADN

VEpigénétique

1

Biotechnologies

Techniques de génie génétique (ER,

Clonage, PCR, amplifications

isothermales)

Techniques de séquençage, méthodes de

séquençage nouvelle génération (NGS).

Introduction à la biologie synthétique.

Physique

Microbiologie

Virologie

Biochimie

Génétique

BIOLOGIE

MOLÉCULAIRE

1953 : Structure de lADN

(Crick et Watson)

DÉFINITIONETHISTORIQUE

2

Prix Nobel 1962 (Watson, Crick et Wilkins)

Structure moléculaire de lADN

RosalindFranklin,

The darklady of DNA

Cristallographie au rayon X sur

"fibre de thymus de veau»

Phénotype

Gènes

Protéines

Biologie moléculaire

léchellemoléculaire géniegénétique,biotechnologies. 3 qLe dogme central de la biologie moléculaire (W. Crick 1956) qLe dogme central de la biologie moléculaire (années 2000) Les différences par rapport au dogme des années 60 : Les rétrovirus (HIV), les virus à ARN et les prions 4 qLes années 2010 : Isogène, promotérome, épigénome

Les prions

qProtéine infectieuse / PRoteinaceousInfectiousparticle Découverte en 1982 par S. Prusiner(Prix Nobel 1997) qAgent pathogène non conventionnel => Dégénérescence du système nerveux central Pas dacide nucléique, pas de réponse immunitaire

Le prion dérive dune protéine endogène :

structure I R identique structures II R , III R et IV R différentes. 5

Conversion de la protéine "sauvage»

en protéine "prion»

Processus auto-catalytique

(cas sporadique ou contamination)

Polymérisation de type amyloïde

qPropagation du prion qChez les mammifères : maladies neurodégénératives : Encéphalopathies spongiformes transmissibles (Aspect spongieux du cerveau) qLes EST se définissent par laccumulation dans le système nerveux central, de particules infectieuses de nature protéique (prions) : Chez lhomme : le kuru (Tribu Papou 1957) Prix Nobel D. Gajdusek1976, La Maladie de Creutzfeldt-Jakob (hormone de croissance) Chez dautres mammifères : La scrapie chez le mouton, lESB chez les bovins vLEncéphalopathie Spongiforme Bovine

1996 : La crise sanitaire de la maladie de la vache folle

(Royaume Uni)

Bétail nourrit aux farines animales

Les prions

6

190000 animaux diagnostiqués

qApparition dun nouvelle forme dEST en GB à la fin des années 90 proche de la maladie de Creutzfeldt-Jakob sur jeunes adultes

Transmission inter-espèce de lESB ?

Les prions

qBILAN de cette crise sanitaire majeure : Effondrement de la consommation de la viande de buf Interdiction des farines animales dans lalimentation du bétail

Développement du principe de précaution

214 victimes humaines (jusquà 2009)

Temps dincubation de lEST ?

7 8 9 10 11 12

SOMMAIRE

Biologie moléculaire

IMatériel génétique

II Réplication

III Transcription et traduction

IV Mutations, réparations de lADN

et Epigénétique

Biotechnologies

Techniques de génie génétique (ER,

Clonage, PCR, amplifications

isothermales)

Techniques de séquençage,

méthodes de séquençage nouvelle génération (NGS). 13

I -MATÉRIELGÉNÉTIQUE

1.1 Structure moléculaire des acides nucléiques

Les acides nucléiques sont constitués de chaînes linéaires de nucléotides reliés par des ponts phosphodiesters

Structure dun NUCLÉOTIDE

Base + Pentose + Groupement phosphate

PENTOSES

OH

Ribose

Désoxyribose

ADN = acide désoxyribonucléiqueARN = acide ribonucléique

Nucléosides = Base + Pentose

Base

Désoxyribose

BASESAZOTÉES

Purines

Pyrimidines

Uracile (U)

ARN

Thymine (T)

ADN

Cytosine (C)

ADN

Guanine (G)

ADN

Adénine (A)

ADN 14

AT (ADN) /AU (ARN) : 2 liaisons H (E = -21 kJ)

Lappariement des bases azotées seffectue par liaisons hydrogènes

CG (ADN et ARN) : 3 liaisons H (E = -63 kJ)

Squelette

"sucre-P»

Extrémité

3 OH

Extrémité

5 P 15 qAcide faible qSens denroulement droit qSuper enroulements qEtat intermédiaire : relâché qDénaturation de lADN double brin par chauffage qLADN, support de linformation génétique est constitué de deux brins (DS "double strands») complémentaires et antiparallèles (= bicaténaire)

0,38 nm

1,9 nm

Petit sillon 0,6 nm

Pb / tour : 10,4

Rotation / pb34,6°

qLa double hélice dADN possède un petit et un grand sillon (fixation de molécules "intercalentes» de lADN)

Squelette sucre -P

Paires de base

Espacement entre pb:

16 grand sillon 1,2 nm

3,54 nm

10,4 pb/ tour

2,53 nm

11 pb/ tour

4,56 nm

12 pb/ tour

2,55 nm

2,37 nm

1,84 nm

ABZ tour dhélice :

STRUCTUREALTERNATIVESDELADN DS

qLADN est une molécule polymorphe : importance pour la régulation de lexpression génique

La plus communeDimère ADN/ARNSéquences GC

17

1.2 Matériel génétique

18 qChromosome circulaire pelotonné (dble hélice enroulée en super hélice) vOrdres de grandeur :

Chromosome circulaire (E. coli 1 mm, de 4,6x10

6 pbà 5,5x10 6 pb) vComposition :

ARN30%

60% ADN (dont 90% codant)

Protéines (Polymérases)

10%

1.2.1 Génophorede procaryotes

Topoisomères

de lADN

Forme relâchée

Surenroulement

= désenroulement

Surenroulement +

Superhélice

Topoisomèresde lADN

19 qPlusieurs chromosomes dans le noyau (dble hélice enroulée en superélice) vOrdres de grandeur :1 chromosome ~ 10 8 pb vComposition :

Quelques définitions :

qHaploïdie / Diploïdie : 1 exemplaire / une paire de chaque chromosome (homme : 23 paires, levures : 16-18 chromosomes (ou paires), moisissures : 4-8 chromosomes) qNucléole : structure riche en ARN, site de synthèse de lARNr qDivision cellulaire végétative : bourgeonnement ou scissiparité

50%ADN (dont 10% codant)

10% ARN

Protéines

(histones "+») 40%

1.2.2 Matériel génétique des eucaryotes

Octamères

dhistones

2 x H2A

2 x H2B

2 x H3

2 x H4

Queues N-terminales

qLe nucléosome est lélément structural de base (fibre de base = 200 pbet 10 nm de diamètre) 20 21

1.Double hélice classique : 10 pb/ tour.

2.Nucléosome : lhélice senroule autour

des histones (200 pb/ nucléosomes ; 10 nm de diamètre)

3.Nucléosomes se regroupent en

senroulant sous forme de fibres de 30 nm de diamètre (6-7 nucléosomes/tour) = solénoïde.

4.Chacune de ces fibres senroulent sous

forme de spirale (superhélicede 50 fibres,

500 nm de diamètre).

5.Spirales se regroupent sous forme de

mini-bandes visibles en microscopie optique (environ 18 spirales ou > 1 M de pb). Succession denroulements qui caractérisent la molécule dADN au niveau des chromosomes.quotesdbs_dbs50.pdfusesText_50

[PDF] biologie moléculaire exercices corrigés pdf

[PDF] biologie moleculaire problemes corriges

[PDF] biologie moléculaire qcm corrigés

[PDF] biologie physiopathologie humaine 1ere st2s cours

[PDF] biologie physiopathologie humaine terminale st2s

[PDF] biologie probleme rezolvate

[PDF] biologie tout le cours en fiches pdf

[PDF] biologie vegetala si animala variante rezolvate

[PDF] biologie végetale

[PDF] biologie végétale cours 1ere année biologie

[PDF] biologie végétale cours l1

[PDF] biologie vegetale cours pdf

[PDF] biologie végétale raven pdf

[PDF] biomaster

[PDF] biomaster traitement des graisses