[PDF] Acide L-ascorbique - International Organisation of Vine and Wine



Previous PDF Next PDF
















[PDF] densité roche unité

[PDF] densité du granite

[PDF] densite roche

[PDF] densité des roches de la croute continentale

[PDF] densité péridotite

[PDF] propriété de pythagore triangle rectangle

[PDF] distance entre deux points maths

[PDF] comment calculer le rayon de courbure d'une lentil

[PDF] lentille convergente schéma

[PDF] calcul distance epicentre station

[PDF] calcul distance épicentrale

[PDF] localisation de l'épicentre d'un tremblement de te

[PDF] exercice détermination de l'épicentre d'un séisme

[PDF] donner l'écriture decimale d'une fraction

[PDF] fraction d'une quantité 6eme exercices

Acide L-ascorbique - International Organisation of Vine and Wine RECUEIL INTERNATIONAL DES METHODES D'ANALYSES - OIV

Acide L-ascorbique

OIV-MA-AS313-13A : R2009

1 Méthode OIV-MA-AS313-13A Méthode Type IV

Acide L-ascorbique

1 Principe des méthodes

Les méthodes proposées permettent de doser l'acide ascorbique et l'acide déhydroascorbique présents dans les vins et les moûts. L'acide L-ascorbique est oxydé par action du charbon actif en acide déhydroascorbique. Ceci forme un composé fluorescent par réaction avec l'orthophénylènediamine (O.P.D.A.). Un essai témoin en présence d'acide borique permet de déterminer la fluorescence parasite (par formation d'un complexe acide borique - acide déhydroascorbique) et de la déduire du dosage fluorimétrique.

2 Méthode (méthode fluorimétrique)

2.1. Appareillage

2.1.1. Fluorimètre.

Utiliser un spectrofluorimètre équipé d'une lampe à spectre continu en se plaçant à la puissance minimale de la lampe. Les longueurs d'onde d'excitation et d'émission optimales pour l'essai seront déterminées préalablement et dépendent de l'appareil utilisé. À titre indicatif la longueur d'onde d'excitation se situe au voisinage de 350 nm, la longueur d'onde d'émission au voisinage de 430 nm.

Cuves de 1 cm de trajet optique.

2.1.2. Filtre en verre fritté de porosité 3.

2.1.3. Tubes à essai (diamètre : 10 mm).

2.1.4. Agitateur pour tubes à essai

2.2.Réactifs

2.2.1. Solution de dihydrochlorure d'ortho-phénylènediamine (C

6 H 10 Cl 2 N 2

0, p. 100, préparée extemporanément.

2.2.2. Solution d'acétate de sodium trihydraté à 500 g/l.

2.2.3. Solution mixte d'acide borique et d'acétate de sodium

Dissoudre d'acide borique dans 100 ml de solution d'acétate de sodium à

500 g/l. Cette solution doit être préparée extemporanément.

2.2.4. Solution d'acide acétique (

20 = 1,05 g/ml) dilué à 56 p. 100 (v/v) de pH voisin de 1,2. RECUEIL INTERNATIONAL DES METHODES D'ANALYSES - OIV

Acide L-ascorbique

OIV-MA-AS313-13A : R2009

2

2.2.5. Solution de référence d'acide L-ascorbique à par litre

Dissoudre, au moment de l'emploi, 50 mg d'acide L-ascorbique, préalablement déshydraté dans un dessiccateur à l'abri de la lumière, dans 50 ml de solution d'acide acétique.

2.2.6. Charbon actif très pur pour analyses

1 Placer dans une fiole conique de 2 litres de capacité, de charbon actif, ajouter 500 ml d'une solution d'acide chlorhydrique, ( 20 = 1,19 g/ml) à 10 p.

100 (v/v). Porter à l'ébullition, filtrer sur filtre en verre fritté de porosité 3.

Recueillir le charbon ainsi traité dans une fiole conique de 2 l de capacité. Ajouter 1 l d'eau, agiter et filtrer sur filtre de verre fritté de porosité 3. Répéter

deux fois cette opération. Placer le résidu dans une étuve réglée à 115 ± 5 °C

pendant 12 heures (une nuit par exemple).

2.3. Mode opératoire

2.3.1. Préparation de l'échantillon de vin ou de moût

Prélever un volume de vin ou de moût et le diluer à 100 ml dans une fiole jaugée avec la solution d'acide acétique à 56% afin d'obtenir une solution dont la concentration en acide L-ascorbique soit comprise entre 0 et 60 mg/litre. Homogénéiser le contenu de la fiole jaugée par agitation. Ajouter de charbon actif et laisser en contact durant 15 min. en agitant de temps en temps. Filtrer sur papier filtre ordinaire en éliminant les premiers millilitres de filtrat. Dans deux fioles jaugées de 100 ml introduire 5 ml de filtrat et, respectivement,

5 ml de solution mixte d'acide borique et d'acétate de sodium (essai témoin) et

5 ml de solution d'acétate de sodium (dosage). Laisser en contact durant

15 minutes en agitant de temps en temps, compléter à 100 ml avec de l'eau

distillée. Prélever 2 ml du contenu de chacune des fioles, ajouter dans un tube à essai, ajouter 5 ml de solution d'ortho-phénylènediamine ; mélanger à l'aide de l'agitateur ; laisser la réaction se développer durant 30 min. à l'obscurité, puis effectuer la mesure au spectrofluorimètre.

2.3.2. Courbe d'étalonnage

Dans trois fioles jaugées de 100 ml placer respectivement 2, 4 et 6 ml de solution de référence d'acide L-ascorbique, compléter à 100 ml avec la solution d'acide acétique. Homogénéiser par agitation. Les solutions de référence préparées contiennent respectivement 2, 4 et 6 mg d'acide ascorbique/100 ml. Ajouter de charbon actif dans chacune des fioles et laisser en contact durant

15 min. en agitant de temps en temps. Filtrer sur papier filtre ordinaire en

éliminant les premiers millilitres.

Introduire respectivement 5 ml de chacun des filtrats recueillis dans trois fioles

jaugées de 100 ml (première série). Répéter l'opération dans une deuxième série

1

Une des appellations commerciales est "norite"

RECUEIL INTERNATIONAL DES METHODES D'ANALYSES - OIV

Acide L-ascorbique

OIV-MA-AS313-13A : R2009

3 de trois fioles jaugées. Ajouter dans chacune des fioles de la première série (correspondant à l'essai témoin) 5 ml de solution mixte d'acide borique et d'acétate de sodium et dans chacune des fioles de la deuxième série 5 ml de solution d'acétate de sodium. Laisser en contact durant 15 min. en agitant de temps en temps. Compléter à

100 ml avec de l'eau distillée. Prélever 2 ml du contenu de chacune des fioles,

ajouter 5 ml de solution d'ortho-phénylènediamine, agiter. Laisser la réaction se développer durant 30 min. à l'obscurité, puis effectuer la mesure au spectrofluorimètre.

2.3.3. Détermination fluorimétrique

Régler, pour chaque solution de la courbe d'étalonnage et pour la solution du dosage, le zéro de l'échelle des mesures sur l'essai témoin correspondant. Effectuer ensuite la mesure de l'intensité de la fluorescence pour chaque solution de la gamme d'étalonnage et pour le dosage. Tracer la courbe d'étalonnage. Elle doit être linéaire et passer par l'origine. Reporter sur cette droite la valeur relative au dosage et déduire la teneur C en acide ascorbique + acide déhydroascorbique de la solution analysée.

2.4. Expression des résultats

La concentration du vin en acide L-ascorbique + acide déhydroascorbique exprimée en milligrammes par litre sera :

C·X F

F = facteur de dilution

BIBLIOGRAPHIE

Norme AFNOR, 76-107, ARNOR, Tour Europe, Paris.

PROM T., F.V., O.I.V., 1984, n° 788.

quotesdbs_dbs2.pdfusesText_3