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Licence Physiotoxicologie Module/ Techniques de laboratoire.

TP 6: CHROMATOGRAPHIE SUR COLONNE.

Extraire et identifier des espèces chimiques.

Objectifs : 6pSMUHU HP LGHQPLILHU OHV ŃRORUMQPV G·XQ VLURS GH PHQPOHB La chromatographie sur colonne est une chromatographie d'adsorption. L'adsorption consiste en la formation de liaisons entre les molécules d'un composé et celles de la substance adsorbante. La phase stationnaire est un solide, le plus souvent silice ou alumine remplissant une colonne.

L'échantillon est déposé en haut de la colonne. La séparation des espèces chimiques est

obtenue par l'écoulement continu d'une phase mobile, ou éluant, à travers la colonne.

La séparation est basée sur les différences de vitesses d'entraînement, vers le bas de la colonne,

des substances contenant l'échantillon. Ces vitesses dépendent de la capacité d'adsorption de

l'espèce par la phase stationnaire, et de la solubilité de cette espèce dans l'éluant.

Matériel :

-colonne Produits : - pipette pasteur - sirop de menthe - tige métallique - gel de silice - coton - SLVVHPPH G·HMX GLVPLOOpH - 2 béchers de 50 mL - spectrophotomètre + cuves - éthanol à 95 % - un flacon contenant le colorant E 102 (tartrazine) - un flacon contenant le colorant E 131 (bleu patenté)

I) Principe.

I·pŃOMQPLOORQ HVP Géposé en haut de la colonne.

IM SOMVH IL[H HVP GH OM VLOLŃH RX GH O·MOXPLQH O·pOXMQP V·pŃRXOH GX OMXP YHUV OH NMV GH

la colonne. IM VpSMUMPLRQ HVP NMVpH VXU OM GLIIpUHQŃH GHV YLPHVVHV G·HQPUMvQHPHQP GHV VXNVPMQŃHV

[PDF] Chromatographie sur colonne - Zysman-Colman