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et pour tous les services que tu peux nous rendre au quotidien dans le labo activité catalytique propre lors de la synthèse des acides gras Ils sont à distinguer pentakétide, son ligand naturel, et ce en utilisant une PPT de spécificité large : la Svp are present in fully a third of all trans-AT PKS characterized to date,4 



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Nous vous remercions d'avoir voulu en toute simplicité, nous faire l'honneur Figure 1: Causes de décès chez les ACHD selon le registre national allemand thoracique voir une mort subite [51] contre indiquant ainsi toute activité de visualiser la SVP et mesurer l'anneau pulmonaire, préciser l'anatomie de la valve  



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neveux qui m'ont permis de prendre une grande bouffée d'oxygène quand le besoin se All the results confirm the relevance of the Clubhouse model, which seems étaient ici au cœur des prises en charge, ainsi que la notion « d'activité » d'Hébergement et de Réinsertion Sociale (CHRS) ou encore des Groupes 



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Ce sont des équations phénoménologiques qui, sans rendre compte du détail des Vit 551UI OUSUP Mesui 55/0 Hiul-lla 5SBII H o l l a c-530 tIIH SII ECI ' •t UO I 5E-IU 1 nî'' Espacement des points selon "&PutïA" (en mm S V P ) " 7570 PRINT C H R S d ? ) 2 7 5 0 H Wollnik Brevet allemand n° 26 59 775 



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insuffisant pour faire face à plus de 30 000 demandes d'asile annuelles britannique, espagnol, italien, grec, hongrois, allemand, fran- çais, suisse ainsi que le CHRS, Paris 22 professionnels en matière d'insertion (SVP insertion) ont



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15 mar 2016 · médecine générale, tu pourras faire tout ce que tu veux » Les soirées passées jusqu'à 1h du matin, les ordinateurs qui fatiguaient plus vite que nous, A tous les Serie'all Zappeurs SVP" Un patient il donne son corps, il fait confiance, c' est important qu'il puisse tout Centre d'hébergement CHRS



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personnes à préférer la rue ou à ne pouvoir faire autrement que de s'y retrouver Très vite à la lecture de quelques études, nous en sommes arrivée à imaginer que la question Marc déplore le manque de place dans les CHRS Par ailleurs, Jérôme nous dit encore déplorer la fermeture du squat dit « l'allemand » et qui



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1 jan 1991 · sion d'un travail dans une cité à la marge d'une ville de l'Aube adjoint chargé de l'action sociale, qui doit prendre la décision finale tion montrent que l' utilisation du C h r s est l'aboutis sement d'un double lisme allemand, pur et dur Oscillant entre la gestion d'un S v p Dépannage et la visite aux 



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est probablement attribuable à la diminution de l'activité globale du Caso de encore moins nombreux que les autres patients à faire valoir leurs droits à la squat aménagé (eau + électricité), dans une caravane, dans un CHRS, dans un SVP, écoutez nos cris, donnez-moi une petite chance de pouvoir enfin avoir le  

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AVERTISSEMENT

Ce document est le fruit d'un long travail approuvé par le jury de soutenance et mis à disposition de l'ensemble de la communauté universitaire élargie. Il est soumis à la propriété intellectuelle de l'auteur. Ceci implique une obligation de citation et de référencement lors de l'utilisation de ce document. D'autre part, toute contrefaçon, plagiat, reproduction illicite encourt une poursuite pénale.

Contact : ddoc-theses-contact@univ-lorraine.fr

LIENS Code de la Propriété Intellectuelle. articles L 122. 4 Code de la Propriété Intellectuelle. articles L 335.2- L 335.10 Ecole Doctorale BioSE (Biologie-Santé-Environnement)

Thèse

Présentée et soutenue publiquement pour lobtention du titre de

DOCTEUR DE UNIVERSITE DE

LORRAINE

Mention : " Sciences de la Vie et de la Santé » par

Jonathan DORIVAL

La biologie structurale des polykétide synthases de type trans-AT

Le 18 novembre 2016

Membres du jury :

Rapporteurs : Mme Véronique RECEVEUR BRECHOT Directrice de recherche, CNRS, Marseille M Peter F. LEADLAY Professeur, Université de Cambridge, Cambridge Examinateurs : Mme Mirjam CZJZEK Directrice de recherche, CNRS, Roscoff M Benoît GUILLOT Professeur, Université de Lorraine, Nancy M. Arnaud GRUEZ Maître de conférences, Université de Lorraine,

Nancy,

Mme Kira J. WEISSMAN Professeure, Université de Lorraine, Nancy, directrice de thèse Laboratoire IMoPA: Ingénierie Moléculaire et Physiopathologie Articulaire UMR 7365 CNRS-UL, Faculté de Médecine, Bâtiment Biopôle,

9 Avenue de la Forêt de Haye, BP 184, 54505 Vandoeuvre-lès-Nancy

Merci également aux membres du jury de thèse, à Peter Leadlay pour avoir accepté de rapporter mes travaux de thèse et pour vos remarques pertinentes durant la soutenance. Un erché à me faire progresser durant chacune de nos discussions vailler avec toi en post-doc, et je suis certain de pouvoir apprendre beaucoup de choses à tes côtés. Merci de juger mes travaux que ce soit dans mon comité de suivi de thèse ou dans mon comité de thèse, tes remarques ont toujours été pertinentes, de même que tes conseils. encadrante aussi présente, prévenante malgré tes responsabilités de professeur mondialement reconnue et de mère de emment. Ton regard sur cette thèse a largement contribué à sa

réussite et je suis certain de la réussite de tous tes futurs doctorants. Je tiens à te faire savoir

que ça a été un immense plaisir de pouvoir travailler avec une encadrante si compétente, mais

également très accessible et agréable au quotidien.

Je r-encadrant mais pas que. Merci

patience néce

structurale en générale. Je te suis très reconnaissant (tiens, on dirait le Vosgien) pour ces trois

ans et demi que tu as passé à me "parenter" au sein du labo, je suis certain que tes nombreux conseils, tant scientifiques que dans la vie de tous les jours, me serviront au quotidien. Et merci pour toutes ces missions synchrotron passées avec toi, les nombreux fous rires et là-bas, et un immense merci pour le congrès de Montreal avec toi, que de supers souvenirs !

Je tiens également à remercier Benjamin pour tellement de choses. Tu as déjà été une sorte

de granre). Merci pour ton humour, parfois assez cynique mais toujours tellement bon ! Toi et Marie- Eve avaient énormément compté pour moi et je suis certain que ce sera toujours le cas dans oup aidé et merci pour tous ces moments de rigolades.

Merci également à toi Christophe, à la fois pour les discussions scientifiques, mais aussi pour

Merci égaleme

remercier pour ta contribution et ton implication énorme dans le projet LkcE. Merci également pour toutes tes idées dans les clonages qui nous ont beaucoup fait avancer !

Un grand merci à Sabrina avec qui on a formé le binôme de choc des purificateurs de

! Merci aussi pour ton sourire, ta bonne humeur et ton coté "maman poule" !

Je tiens à remercier également Jocelyne, dit Jojo, à la fois pour ta bonne humeur, ton énergie

et pour tous les services que tu peux nous rendre au quotidien dans le labo. conseils que vous avez pu me fournir lors de ce stage et encore au cours de ma thèse. Merci également à Sophie et Hortense, Sophie pour tes questions et tes remarques toujours très pertinentes différentes manips et Hortense pour ta gentillesse quotidienne. moments ma solitude du rez-de-chaussée. Ton humour, ton sourire, ta gentillesse et tes bons conseils

ont été vraiment précieux pour moi. Je suis heureux que tu ais trouvé un super post-doc aux

States !

Merci à toi mon Titi, pour tous les délires (parfois tellement débiles mais toujours aussi bons),

tu es et tu resteras toujours un ami très proche ! On a partagé beaucoup de choses durant mes trois ans, y compris le sujet DD et je garde chaque moment en mémoire. Je suis heureux que tu puisses vivre ton rêve Caincain, aux pays des alligators et des cannibales ! Toi et ta femme êtes des personnes vraiment supers ! aussi délirant ! Merci pour tous ces supers moments !! Toutes les

moments où on a pu parler plus sérieusement, bref tout ça a été très précieux pour moi. Soit

dit en passant (transition parfaite pour toi mon JC), une question me taraude : Elle est où la balle !? Oh JC, my god, my brother ! Comment ne pas te remercier ! Un immense merci pour ta

gentillesse, ton côté barjot que tu caches plutôt bien, pour tes innombrables conseils et les

! Partager ces années avec toi a été un grand bonheur, mais ! Ne change jamais ; je vous souhaite tout le meilleur à toi et Juju !

Un grand merci à toi M. Flo ! Pour tout

partagé, tu es arrivé ! Je souhaite que tu fasses , tu le mérites plus que tout ! -mol Comment ne pas te remercier mon Beubeu ! On se suit depuis la L2 et chaque année a vraiment ! Bon courage pour la p toujours ouverte nuyer sans toi aussi ;)

Merci à toi ma ptite Daf. Ta bonne humeur, ton côté naturel et ton extrême gentillesse ont

toujours compté énormément à mes yeux ! Je te souhaite tout le meilleur, et je suis assez

dégouté de fuir au moment où toi, Flo et Géraud débarquez au labo perdra pas de vue, loin de là. J'ai que des souvenirs merveilleux avec toi ! Un grand merci aussi à ma ptite Mahdia, à qui je souhaite tout plein de courage et tout le

meilleur, à la fois dans ta thèse et dans ta vie de ptite louloute ! Ta joie de vivre a toujours été

hyper réconfortante pour moi.

Un immense merci à ma super

tu sais déjà ce que tu représentes pour moi ! Ta douceur, ton sourire, ta s

toujours énormément touché, et ton soutien durant cette dernière année de thèse a été très

important pour moi. Je suis et je resterai toujours hyper proche de toi mes yeux et voir le Groot posé fièrement au-dessus de mon bureau pour me souvenir de tous les supers moments passés avec toi ! Et il y en a tellement !

Je tiens aussi à remercier Alex, Môsieur l'ingénieur en chef, avec qui chaque discussion était

intéressante

de protéines et je continuerai à les propager autour de moi. Merci pour toutes tes explications

techniques sur les différents appareils du labo et merci pour tous les délires, chansons, etc Merci à Boubou pour ta bonne humeur, pour ta simplicité et pour tous les moments de rigolade

Merci à ma ptite Syrine, pour toutes les fois où tu as pu me faire attraper des énormes fous

rires avec tes blagues à deux balles d'égyptienne ! Vous êtes géniaux G-Rhô et toi ! Je tiens à remercier également la présidente de notre association A-team of BioSE, Laurie, qui ement pour ta gentillesse, tout le soutien que tu as pu me témoigner durant ces deux dernières années de thèse. Je veux également remercier deux personnes merveilleuses, qui ont toujours cru en moi. Merci votre bonté et votre générosité, nous s Je tiens également à remercier une des personnes qui compte le plus à mes yeux. A toi mon frérot avoir un frère si formidable compte tellement pour moi. Tu as été un exemple pour moi

désormais mon quotidien avec beaucoup de joie. Merci à toi Anaïs, ma chérie de tout ce que

roire aussi fort en venu de finir ta thèse. Un immense merci à mes beaux-parents, pour tous ces bons repas chez vous, pour votre gentillesse, et pour tout ce que vous avez pu faire pour nous deux. Un gros merci à ma ptite qu'un de super pour qui je serais présent le plus possible ! Je remercie bien évidemment le reste de la petite famille, à mes cousins et cousines qui mes sont tellement chers, Samsou et Laurie, Didine et Bilou, ma Jod, Pascaline, Romu, Nini et Amadou, ma ptite Marie, Simon, Maëlle et Arthur. Un grand merci également à mes oncles et chouchouté durant toutes ces années.

Un immense merci à ma Mémé qui a toujours été présente pour moi et qui nous a toujours

tant donné malgré le peu de moyens que vous aviez, merci pour la maison de Gruissan dans laquelle on a tous pu passer des supers vacances et merci pour tous ces merveilleux moments

être fier de son petit-fils de là où il est. Sache en tout cas que je pense très souvent à toi et

Je profite de cette occasion pour

Ton adorabilité,

té taquine,

extrêmement proche ! Merci pour tous ces délires, ces moments de complicité avec toi et merci

de ton soutien et de remonter le moral dans mes moments de doute ! capitale être là quand tu auras besoin pour rendre la tienne toujours meilleure. Merci à Djihed, ma doudou adorée, pour toute ta douceur, ton humour, ton caractère en or, bref, tu sais à quel point tu comptes pour moi ! Merci à ma ptite Camille, mon poussin, pour son extrême gentillesse, sa patience, son soutien

indéfectible, pour tous les mots gentils que tu as pu me dire. Ta sincérité, ton innocence et ta

folie (si proche de la mienne) te rendent tellement unique. Merci à Beren qui, même si on ne se voit pas beaucoup, est une amie vraiment précieuse. Ta ! Ne doutes jamais de toi, vois le bon côté des choses,

Un grand merci également à ma Lili, pour ta gentillesse et toutes ses fois où tu es là pour moi !

juste pour me faire rire, me remotiver ou me donner plein de tendresse ! Tu es juste géniale, ne change jamais !!! Cette liste est bien sûr incomplète et je tiens à remercier toutes les personnes qui ont contribué à rendre cette expérience aussi enrichissante sur le plan humain que sur le plan scientifique. Quelques proverbes bretons appris durant les premiers jours de post-doc : Horizon pas net, reste à la buvette. Qui trop écoute la météo, passe sa vie au bistrot. Celui qui marche droit trouve toujours la route assez large.

ABREVIATIONS

AbrŽviations

AbrŽviations

6-dEB : 6-dŽoxyŽrythronolide B

A : adŽnylation

ACP : acyl carrier protein

ADN : acide dŽsoxyribonuclŽique

AT : acyltransfŽrase

ATP : adŽnosine triphosphate

-ME -mercaptoŽthanol

C : condensation

Cy

CD : dichroïsme circulaire

CoA : coenzyme-A

Cryo-EM : cryo-microscopie Žlectronique

Da : dalton

DATD

DEBS : 6-dŽoxyŽrythronolide B synthase

DD : domaine de docking

DH : dŽshydratase

DMSO : dimŽthylsulfoxide

DO : densitŽ optique

E : ŽpimŽrase

AbrŽviations

EMAA : Žthyl-mŽthyl-acŽtoacŽtate

ER : Žnoyl rŽductase

FAD : flavine adŽnine dinuclŽotide

FAS : acide gras synthase

FMN : flavine mononuclŽotide

GC-MS : chromatographie en phase gazeuse couplŽe ˆ de la spectromŽtrie dequotesdbs_dbs46.pdfusesText_46