8 oct 1972 · a) Méthodes de MESCHER (1963) b) Remarques personnelles 11-1-2- Chromosomes polytènes a) Dissection des larves et préparation des
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Les larves de drosophiles sont toujours entourés par une enveloppe chitineuse gènes sur le chromosome 3 est polarisée : à l'extrémité 3' on retrouve le gène lab, de la larve, on peut en déduire que le domaine d'expression du gène ant
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8 oct 1972 · a) Méthodes de MESCHER (1963) b) Remarques personnelles 11-1-2- Chromosomes polytènes a) Dissection des larves et préparation des
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4 chromosomes: c'est sur la drosophile que TH Morgan (Prix Nobel 1933) L' œuf (en haut, 0,5 mm) donne une larve (24 h), puis deux autres larves (milieu) et
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chromosome X (Braendle et al , 2005) lorsque l'on nourrit moins des larves de drosophiles, les caste-specific behavior in the ant Camponotus floridanus
Les gènes homéotiques
ques distincts, le complexe Antennapedia (ANT-C) et le complexe Bithorax (BX-C ) et le patron d'expression des gènes homéotiques de la drosophile et ceux des gènes à boite homéo- tered in tandem in four large gene complexes located on separate chromosomes segments de la larve et de l'adulte (Lewis, 1978
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Des analyses génétiques ont montré que les gènes AINTEGUMENTA (ANT) et division des cellules mais pas la duplication des chromosomes Des larves de drosophiles obtenues par ces croisements (se développant normalement à
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convictions L'une est que le modèle drosophile chromosomes) de cosmides ou de bac ANT-C et BX-C et rapidement glandes salivaires de la larve La
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melanogaster MEIGEN : Drosophila orena spec nov du Came ractérise par des chromosomes sexuels en Y Sa formule est ainsi la suivante : trois chez D erecta puisque à côté de femelles norm ales ay a n t un abdom en à extrém ité
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CENTREDEBRAZZAVILLE
Serviced'Entomologiemédicale
desCulicidaeetdesSimuliidaeRAPPORTDESTAGE
ParP.CARNEVALE
ChargédeRecherchesstagiaire
RAPPORTDESTAGE
ETUDEDELACYTOGENETIQUEETLAGENETIQUE
DESCULICIDAEETDESSIMULIIDAE
Baséesurunséjourde45joursdansles
laborptoiresdesProfesseurs -J.B.KITZMILLER, -G.B.CRAIGJr., -K.H.ROTHFELS,DepartmentofZoology,..Urbana.
UniversityofIllinois,U.S.A.
DepartmentofBiology,
UniversityofNotre-Dame,
Notre-Dame,Indiana,U.S.A.
DepartmentofBotany,
UniversityofToronto,
Toronto,
Ontario,CANADA.
CYTOGENETIQUEDESANOPHELES
1-1-1-1-2-Elevagedesmutantsd'A.albimanuG.
1-1-3-Quelquestechniquesutiles.
a-Techniqued'isolementdesfemelles b-Techniquedecomptagedesoeufs c-Techniquedecopulationforcie d-Techniquedeponteforcée1-2-1-Produitsutilisés
a-Fixat:eut: b-Colorant c-Milieuxdemontage1-2-2-Dissectiondeslarves
1-2-3-Obtentiondeschromosomes
a-"Squashtechnic" b-"Taptechnic"1-2-4-Préparationpermanente
1-3-1-Rappelsuccint
1- 3-2-J:1atiri e 1
a-Priparationspersonnelles b-Collectionsmisesànotredisposition1-4-1-Rappelssuccints,
1-4-2-Matériel
1-4-3-Observations
II-CYTOGENETIQUEETn'AEDESAEGYPTI.
11-1-Cytogénétiqued'Aedesaegypti
tènes. a)MéthodesdeMESCHER(1963) b)Remarquespersonnelles.11-1-2-Chromosomespolytènes
a)Dissectiondeslarvesetpréparationdes glandessalivaires. tènes. bl)Observationspersonnelles b2)TravauxdeMESCHER(1963)etRAI c)Discussionetperspectives.11-1-3-Chromosomesmitotiques.
a)Principalestechniques b)Observations.11-2Génétiqued'Aedesaegypti.
a)Souchesetobservationspersonnelles -Matériel -Remarques b)Elevagederoutinedesmutants c)Conservàtiondessouches11-2-2-Cartesgéniques
a)Rappelssuccincts .al)Phénomènerdte.linkage a2)Caractèresliésausexe a3)Phénomènedecrossing-over b)Locationd'ungène bl)Croisements b2)Interprétationdesrésultats aegypti.11-3-1Luttebiologique
..Principes b -T'echniquesA-Stérilisationdes
"\Al-ChimiostérilisationsA2-Irradiation
Manipulationsgénétiques
Bl-Distorsiondusex-ratio'
B2-Translocationschromosomiques
B3-Contrôlegénétiquedesvecteurs
filairesPremiersrésultats
d·-Perspectives11-3-2-Cytotaxonomie.
III-CYTOTAXONOMIEDESSIMULIIDAE
de111-1-depréparationdeschromosomes.
111-1-1-Dissectionùeslarves
a)Technique"pushandpull"deNEWMAN b)TechniquedeDUNBAR c)Technique"ouvrirettirer" a)TechniquedeROTHFELSetDUNBAR:"Feulgen technique" technique"111-1-3-Montagespermanents
a)TechniquedeNEWMAN b).TechniqùedeROTHFELS c)TechniquedeDUNBAR111-2-Observations
111-2-1-Observationspersonnelles
Prosimuliumfuscum.
111,,2-2..Cytotaxonornie
chromosomesgéantsde a)LecomplexeSimuliumdamnosum b)Lesespècesjumelles c)Leproblèmeduchromosome'sexuel d)PolyplordieetParthénogénèse e)Leproblèmedeshybrides f)phyl/étiques.CONCLUSIONETCONSIDERATIONS
sansmodificationsessentiellesdubiotope. quenuisance. lasciencequinousintéresse.ROTHFELS.
- 2 - Ce stagenousapermissuccessivement -lacytoginétiquedesanophèles, -lacytogénétiquedessimulies. delrJRIGHTetPAL(1957).1-CYTOGENETIQUEDESANOPHELES
61801,U.S.A.).
Selon(corn.pers.)onpeutdire,qu'iderares
Sud(Anophelesdarlingi.!.muneztovari).
lesimportantstravauxqui's'yrattachent. ',\,1 --3 etKITZMILLER,1971). d'expressionbiochimique. p.réparatîons -élevageméticuleuxdes -optimaleparbac,1enent,
débutduquatrièmestade. 1 -dissection,fixationetcoloration, -premièreobservation, -écrasement("squashtechnic") lés, -bonnededeibandesdonc -unecartographiecorrecte.Apartirdecettedeonpeutalorsobser-
- 4 - lesparticu1iiresqu'ellesC'estcetteUrbana.
depuisplusieursgénérations -Anophe1es -Anophe1esquadrimacu1atus -Anophe1esatroparvus corn.pers.). ceuxdesespèces sontplusnettes. eaudoucedé-ionisée, - 5 - 250 chromosomesn'enserontqueplusnets. ximaleduarticletarsal, mentairesurletroisièmearticletarsal, lesetdesfemelles"sauvages"albimanus. 6 dor saleduc0b aye"exp0séea ux p i qûr e sdesan0pr."es.est!'asé echa que ves. lephénotype.: -sauvages, -bisignatus -trisignatus -"deformedhindtarsus" individusdontlestarsesposté- -mâle-femelle -sauvage-mutant représentés - 7-. le!:lieuxmarqué. a)Techniqued'isolementdesfemelles. ron2à 3cm.Attendrelaponteetcompterlenombred'oeufs. b)Techniquedecomptagedesoeufs. touslesoeufssanslesabîmer. lesoeufsselontroiscatégories -oeufsnormalementéclos, - 8 - l'intérieur. sultats nés+
Nb.d'oeufsnon
nonembryonnés+Nb.d'oeuf3nonéclos). donne,enréalitéaucunelarveviable. c)Techniquedecopulationforcée.Cettes'emploiecouremmentpourBaintenirles
élevagesdpunctipennissA.!::..!.
serfaceventraleverslehaut. auniveaudel'abdomendelafemelle.Aumoment - 9 - d)Techniquedeponteforcée. lesdeuxheuresquisuiventsamutilatioa.1-2-Préparationsdeschromosomes.
1-2-1-Produitsutilisés
a)Fixateurs estfaitedanslefixateur. rf.Deuxmilieuxsontcourammentutilisés
fonctiondel'habiletédumanipulateur. leurchoixest -10- unedissectionpluslente.Inconvénientfixationpluslente.
glandessalivairesenquelque60secondes. b )Col0ran·t. dansunflaconde100ml. soudrelapoudreenremuantleflacon. dre'toutelapoudre.à45%.
-11- c)Milieuxdemontage.Ilexistedeuxtypesdemontagedechromosomes
-montagètemporaire tion.Ceciimpliquedeuxinconvénients sontpluslisibles. -Montagepermanent.1-2-2-Dissectiondeslarves.
tantssurunpapierfiltre. unegouttedefixateur. -Placerladanscettegoetteetcettelarve facedorsaleverslehaut. quesdelalarve. -12-Observations
desmodificationsentrapidement desintactes.1-2-3-Obtentiondeschromosomes
Lorsquedesglandessont23lecolo
lamelle(cf.sché.maO. toujourslacoloration. a)"Squashtechnic" bienattentionànepasfaireglisseL -13- suivantlesutilisateurs -€crasementaveclepouce, -écrasementaveclapaumedelamain, l'indexdel'autre aprèschaqueécrasement. b)"Taptechnic" oü onpeutmieuxdoserl'intensitédel'impactetchoisir' oùonl'applique. mosomesimparfaitementétalés. etque"Godhe1psus". tapertrèsintensémentsurlalamelle. -14-Leslamesdechromosomespeuventêtreà
contredemandebeaucoupplusdetemps. notredisposition. Pourconserverceslamesdefaçonpermanenteily adiffé laisserceslames30minutesau cooléthylique:C2H50Hà95%5minutes
C2H50Rà100%5minutes
-recouvrird'unelamelleordinaire, 1 indéfiniment. autosomes -15-1-3-1-Rappelsuccint.
LesAnophelinipossèdent3chromosomes(
-lechromosomeIl) lechromosome lesbrasdroitetgaucheduIl, lesbrasdroitgauchQduchromosomeIll.Cesbrassont€longueursetmita
faiblegrossissement. saformuleseraXXouXY. nousavonsunelarvefemellelechromosomeXX sinousavonslarvelechromosomeXeu 91-3-2-Matériel
a)Préparationspersonnelles. quantelamespourlesespècessuivantes -A.albimanus -A.atroparvus -A.quadrimaculatus -16-Ayantnoslarvesselonlamfthodeetla
duProfesseurnousavonspucomparerlesréélevéeseneausalée:
somessontctbandessontmieuxmarquéesque h)Collectionsmisesanotre nuneztov.:lri. -leshomologiesautosomales, trechaque -chromosomiquepr€sentéparA. darlingi•. quesdecartographiecytog€nétique. -17- tions). plane. pattern"este ssent i eIlet a rbitraire.Dansunpremiertemps,i1 dechromosomesavantdelesschématiser.Leschèmadoitmontrer
tés, sériedephotographiespourchaquebras, 18 1 ,1(,................" grédecolorationàchaquebande, inversions"(KITZMILLER,com.pers.). chromosome. qui$'effectuedelafaçon"suivante -chromosomeXdedistaleaucentromère, -chromosome3D:dedistaleaucentromère, pratiquedeschromosomes. lamorphologieexternedeschromosomes,1"agencementdesbandes,
-19.·' -1acolorationetformedechaquebande, cédentes. etlesdifférences.Ilnefautpasqu'ilyaun com.pers.). coreuniversellementadmise. modèleinitial. tion.1-4-1-Rappelssuccints
les'reconnaître. -déficienceoudé18tion. 20- formealorsuneboucle("loop"). chromosomeconnu. -duplication. -inversion.Alasuited'unerotationde180
0 uneportiondechromosomeest vidu·.esthétérozygotèpouruntyped'inversionily aformation leurrapportaveclesphénomènesde pesd'inversion -inversionpéricentrique(fig.6) -inversionparacentrique(fig•.7) obtiendra -21-Enconséquence,uneinversionsupprimele
tantcecrossing-over. nous noustrouvonsdansunesituationoùtousleslocidesgènes -encroixaustadepachytene, -enanneauàladiakinèse, -en8àlamétaphase. que(CRAIG,corn.pers.).1-4-2-Matériel.
-22- laF.2sontcroisésentreeux.AlaF.3ilfaut:
location, larvesdechaque"famille"detranslocation. danssaprochainepublication.1-4-3-Observations.
tionsdeoréférence. -AIlT(2R-3L)zonesdelOB-42A -ABT(X-2L)zonesderupture4c-25AA9T(ZL-3R)zonesderupture19A-33C
117T(X-3R)zonesderupture1E-26B
-1·,9T(2R-3R)zonesderupture7A-2913 -M18T(Y-2R)zonederupturel4A -K18T(X-3R)zonesderuptureSB-27AK9T(X-3L)zonesderuptu!."e2A"
-K14T(2R-3L)zonesderupturel3C-40C. -23- nombreetdesgènesdansleschromosomes. desgènes.Onpeutaussieffectuerunindirectainsique
pourcentagesdecrossing-over. espèceconsidérée. l'autreauseind'unemêmepopulation. jumeIles)• sante 24lité.••). -25-