Challenge-tests (tests de croissance) : Cas concret : tests de croissance en beurre fermier au Conseils en développement / réduction du taux de sel
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Trame ACTALIA Produits laitiers
Valérie MICHEL
Pôle Microbiologie Laitière
ACTALIA Unité produits laitiers
Challenge-test sur Listeria monocytogenes :
I·H[HPSOH ŃRQŃUHP GX NHXUUH MX OMLP ŃUX Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - GemblouxACTALIA -
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2 2 Plan -3UpVHQPMPLRQ G·$F7$IH$ HP GX 507 48$IH0$ -Réglementation européenne et L. monocytogenes dans les produits laitiers -Challenge-tests (tests de croissance) : -Intérêts ? -FRQGLPLRQV GH PLVH HQ ±XYUH -HQPHUSUpPMPLRQ GHV UpVXOPMPV G·XQ PHVP GH ŃURLVVMQŃH -Cas concret : tests de croissance en beurre fermier au lait cru de vache Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - GemblouxACTALIA -
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3 Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - Gembloux3UpVHQPMPLRQ G·$F7$IH$
-TECHNOLOGIE FROMAGERE & MICROBIOLOGIE LAITIERE -INNOVATION TECHNOLOGIQUE ² Produit / process -ENVIRONNEMENT & DD -INGENIERIE DE FORMATION -VEILLE DOCUMENTAIRE SCIENTIFIQUE & TECHNIQUE Recherche ² Transfert - Expertise ² Conseils3UHVPMPLRQV MQMO\PLTXHV G·H[SHUPLVH
qualifié Institut Technique Agro-Industriel parACTALIA -
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4A25 Mamirolle
39 Poligny
A74 la Roche/ Foron
A04 A17Surgères
A35 :Rennes
Carmejane
Pôle Technologie
fromagère & laitièreA75 Paris ML /
Modélisation
A74 : Pôle ML
Pôle Microbiologie Laitière
BB01 Une équipe pluridisciplinaire : 33 personnes sur 8 sites6 Dr Ingénieurs, 15 Ingénieurs, 9 Techniciens spécialisés et 3 adm.
Le pôle développe et propose depuis plus de 45 ans, des compétences uniques en technologie fromagère et microbiologie laitière,UHŃRQQXHV HQ )UMQŃH HP j O·LQPHUQMPLRQMO
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5 ª Des missions et recherches général pour des connaissances et le développement spécifiques pour la filière laitière fff Ressourcement continu des spécialistes & TransfertITAI : une double vocation
ª Des prestations privées : expertises, études , analyses, conseils, formations, audits, recherche privée. f f f Transformateurs laitiers (groupes industriels, PME, TPE, fermiers), affineurs, syndicats de produits, distributeurs, fournisseurs www.actalia.eu Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - GemblouxACTALIA -
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6Ź Des prestations sur-mesure
- Recherche privée PME et Grands comptes - Mise au point de procédés (ex. caillés modèles / flores G·LQPpUrP ou pathogènes) - Innovation technologique Produit-Process - Conseils en développement / réduction du taux de sel - Appui technique, suivi qualité pour les syndicats de produits traditionnels- Expertise, conseil / résolutions de problèmes de fromagerie (optimisation technologique, amélioration de rendements, qualités nutritionnelles des fromages etc.).
- Expertise en ferments lactiques et propioniques- Expertise au niveau de la maîtrise de O·MU{PH des fromages par le contrôle des écosystèmes
- Réalisation G·HVVMLV sur plateforme normalisée pour GC & Centres R&D - Ingénierie de formation : transformateurs fermiers, artisans, industriels,"Pôle Technologie
fromagère & laitière www.actalia.euLes rendez-vous de la diversification ²
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7Pôle Microbiologie Laitière
- Isolement, identification et caractérisation des différentes flores technologiques, G·MOPpUMPLRQ et pathogènes, - Sélection personnalisée de ferments pour des objectifs technologiques déterminés, - Conservation et entretien sur le long terme de matériel biologique confié (bactéries, levures, phages,écosystèmes complets"),
- Expertise dans le domaine des bactériophages de bactéries lactiques.Une expertise et des
méthodes pour répertorier, comprendre et maîtriser la biodiversité desécosystèmes microbiens
www.actalia.euACTALIA -
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8Pôle Microbiologie Laitière
Sécurité Sanitaire
- AQR* combine modélisation du process et du comportement bactérien pour estimer le niveau de contamination aux différentesétapes de la vie du produit
- Accompagnement pour la mise en place de plans de maîtrise sanitaire (HACCP"), - Etude du comportement des produits pour suivre O·pYROXPLRQ des microorganismes indésirables artificiellement inoculés (challenge- tests) ou prédire O·pYROXPLRQ des germes indésirables en fonction des caractéristiques du produit (par utilisation de 6\P·SUHYLXVPour prévenir et
maîtriser le risque pathogène, et agir efficacement en cas de crise www.actalia.eu Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - GemblouxACTALIA -
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9Le RMT QUALIMA
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Les partenaires
ITAIActalia, ADIV, ADRIA,
Aérial, CTCPA, IFIP
Organismes de recherche
Irstea / Inra Theix /
Université Blaise Pascal Clermont
Ferrand
AnsesDGAL, BZMA
QUALIMA
CNIEL cellule AQR
ACTIA, DGER
Etablissement
ENVAEtablissements
agricolesENIL St Lô Thère, ENILBIO,
Lycée Louis Mallet St Flour
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QUALIMA
1. V (PrPO; CCP) de la qualité et de la sécurité microbiologiques des aliments,2. Validation des procédés et la prise en compte de
3. auto-contrôles.
Objectifs du RMT Actia QUALIMA
..sont de déterminer les méthodologies Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - GemblouxACTALIA -
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QUALIMA
1. Caractériser les procédés : salage, traitement
NaCl, cartographie teneur en eau3. Modéliser : études de cas (procédé/souche/aliment)
4. Identifier les besoins en R&D nécessaires
pour générer les données manquantesPré-requis ʹ points clefs
Acquisition de
données " terrain »Initier des
projetsExploitation des
données existantes Contribuer à identifier les leviers à impact significatif sur Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - GemblouxACTALIA -
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13 Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - GemblouxACTALIA -
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14 ¾ Un partenariat structuré et une visibilité sur la thématique, ¾ Un catalyseur de travaux conjoints avec les pouvoirs publics etLR UE, les interprofessions et les entreprises.
Antériorité: Le RMT Actia " Durée de vie
microbiologique des aliments » (07.2008-12.2013) Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - GemblouxACTALIA -
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15Objectifs prioritaires :
(CE) 2073/20052. Evolution des moyens techniques de détermination de la durée
de vie microbiologique des aliments3. Vecteur de diffusion des outils opérationnels
AE Un réseau au service des entreprises de -alimentaire et des pouvoirs publics.Journées de formation pour
les opérateurs des IAA sur la DVM et ses outils Participation à la rédaction Guide LRUE sur la réalisation des tests de croissanceL. monocytogenes (version 2-2008)
Développement expertise / projets
Ex: challenge-tests sporulés, EIL aw, mallette
pédagogique DVM, www.symprevius.orgACTALIA -
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16 -3UpVHQPMPLRQ G·$F7$IH$ HP GX 507 48$IH0$ -Réglementation européenne et Listeria monocytogenes dans les produits laitiers -Challenge-tests (tests de croissance) : -Intérêts ? -FRQGLPLRQV GH PLVH HQ ±XYUH -HQPHUSUpPMPLRQ GHV UpVXOPMPV G·XQ PHVP GH ŃURLVVMQŃH -Cas concret : tests de croissance en beurre fermier au lait cru de vache Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - Gembloux PlanACTALIA -
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DANGERE
17 Réglementation européenne et L. monocytogenes Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - GemblouxDANGER
Listeria monocytogenes rappel
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18 Réglementation européenne et L. monocytogenes Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - GemblouxNombre de cas /an en France de 1999 à 2014
(source InVs, nov 15) Un pathogène toujours présent et pour lequel, malgré des mesures de maîtrise dans les IAA, augmente en France et en EuropeListeria monocytogenes incidence
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19 Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - Gembloux Listeria monocytogenes matrices alimentaires concernées Réglementation européenne et L. monocytogenesProduits carnés,
produits laitiers, produits " composites » dans les produits les plus concernés parListeria monocytogenes
Alertes L. monocytogenes
et fromages au lait cru en 2015, RASFF AEAlertes très nombreuses !
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20 Réglementation européenne et L. monocytogenes Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - GemblouxCritères de Sécurité :
applicable au produit mis sur le marché » Listeria monocytogenes : 2 cas de figure
1. " denrées alimentaires prêtes à être consommées et permettant le
développement de L monocytogenes »AE ABSENCE dans 25 g
contrôle du fabriquant2. " denrées alimentaires prêtes à être consommées et ne permettant pas
le développement* de L monocytogenes » AE <100 ufc/g (n=5, C=0), produits mis sur le marché pendant toute leur durée de conservation * aw définies : - pH<4,4 ou aw<0,92 - pH<5,2 et aw<0,94 ou preuves scientifiquesAE si NC, pas de mise sur le marché
Dans les fromages, 0,94 disponibilité en eau : pas un facteur limitant Règlement CE 2073:2005 " critères microbiologiques applicables aux denrées alimentaires » ACTALIA -
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Réglementation européenne et L. monocytogenes Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - Gembloux Règlement CE 2073:2005 " critères microbiologiques applicables aux denrées alimentaires » 2. " denrées alimentaires prêtes à être consommées et ne permettant pas
le développement* de L monocytogenes » * aw définies ou preuves scientifiques AE de la chaine alimentaire (FBO) (art 3 du CE2073/2005) L. monocytogenes : moyens
études proposées en annexe II
du régl CE 2073/2005 ACTALIA -
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L. monocytogenes : moyens
études proposées en annexe II
du régl CE 2073/2005 Réglementation européenne et L. monocytogenes Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - Gembloux ACTALIA -
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L. monocytogenes : moyens
études proposées en annexe II
du régl CE 2073/2005 Réglementation européenne et L. monocytogenes Études :
tests de croissance Biblio
Physico-
chimie Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - Gembloux ACTALIA -
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-3UpVHQPMPLRQ G·$F7$IH$ HP GX 507 48$IH0$ -Réglementation européenne et Listeria monocytogenes dans les produits laitiers -Challenge-tests (tests de croissance) : -Intérêts ? -FRQGLPLRQV GH PLVH HQ ±XYUH -HQPHUSUpPMPLRQ GHV UpVXOPMPV G·XQ PHVP GH ŃURLVVMQŃH -Cas concret : tests de croissance en beurre fermier au lait cru de vache Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - Gembloux ACTALIA -
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Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - Gembloux Challenge-tests
Définition Challenge-tests = Test de croissance NF V01-009 (lignes directrices pour la réalisation de tests de croissance microbiologique) Inoculer artificiellement un produit alimentaire et suivre le comportement du micro-organisme AE Reproduire une situation réelle. en conditions de laboratoire et/ou de halle expérimentale et suivre le comportement petit nombre de pathogènes dans un produit alimentaire souvent complexe ! ACTALIA -
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Pourquoi faire un test de croissance ?
Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - Gembloux Challenge-tests : intérêts ?
-organisme dans son produit AErespect des critères de sécurité du CE 2073/2005 AEPour Listeria monocytogenes, < 100 UFC/g tout au long de la conservation ? A faire quand pas de bibliographies disponibles, pas de ACTALIA -
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Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - Gembloux Challenge-tests : ŃRQGLPLRQV GH PLVH HQ ±XYUH Caractérisation
de la chaîne du froid Distributions des
températures Caractéristiques physico-
chimiques pH, aw, microflore, Conditionnement
Air, vide, AM
Procédé de fabrication
Etapes du procédé
Description et composition
du produit Durée de vie,
Littérature scientifique
Capacité de croissance
Microbiologie
prévisionnelle Probabilité de croissance,
Simulation de croissance
Données historiques
Prévalence,
Dénombrement
Matrice
alimentaire Besoin de connaissances sur le produit
Besoin de connaissances sur le
pathogène ACTALIA -
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Préparation
de l'inoculum Stress ?
Nombre de lots
1 ou 3 ?
Préparation
des échantillons liquide vs solide Souches
Terrain ou collection ?
Seule ou mélange
Matrice
alimentaire Challenge-tests : ŃRQGLPLRQV GH PLVH HQ ±XYUH Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - Gembloux Réalisation des challenge-tests
EURL Lm TECHNICAL GUIDANCE DOCUMENT
for conducting shelf-life studies on Listeria monocytogenes in ready-to-eat foods Version 3 6 June 2014
Inoculation des
échantillons
Volume minimal
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Mesure des paramètres
physico-chimiques méthodes validées Analyses
microbiologiques méthodes validées Conditions de conservation
des échantillons scénario thermique de laquotesdbs_dbs28.pdfusesText_34
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21Réglementation européenne et L. monocytogenes Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - Gembloux Règlement CE 2073:2005 " critères microbiologiques applicables aux denrées alimentaires »
2. " denrées alimentaires prêtes à être consommées et ne permettant pas
le développement* de L monocytogenes » * aw définies ou preuves scientifiques AE de la chaine alimentaire (FBO) (art 3 du CE2073/2005)L. monocytogenes : moyens
études proposées en annexe II
du régl CE 2073/2005ACTALIA -
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22L. monocytogenes : moyens
études proposées en annexe II
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23L. monocytogenes : moyens
études proposées en annexe II
du régl CE 2073/2005 Réglementation européenne et L. monocytogenesÉtudes :
tests de croissanceBiblio
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chimie Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - GemblouxACTALIA -
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24-3UpVHQPMPLRQ G·$F7$IH$ HP GX 507 48$IH0$ -Réglementation européenne et Listeria monocytogenes dans les produits laitiers -Challenge-tests (tests de croissance) : -Intérêts ? -FRQGLPLRQV GH PLVH HQ ±XYUH -HQPHUSUpPMPLRQ GHV UpVXOPMPV G·XQ PHVP GH ŃURLVVMQŃH -Cas concret : tests de croissance en beurre fermier au lait cru de vache Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - Gembloux
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Challenge-tests
Définition Challenge-tests = Test de croissance NF V01-009 (lignes directrices pour la réalisation de tests de croissance microbiologique) Inoculer artificiellement un produit alimentaire et suivre le comportement du micro-organisme AE Reproduire une situation réelle. en conditions de laboratoire et/ou de halle expérimentale et suivre le comportement petit nombre de pathogènes dans un produit alimentaire souvent complexe !ACTALIA -
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-organisme dans son produit AErespect des critères de sécurité du CE 2073/2005 AEPour Listeria monocytogenes, < 100 UFC/g tout au long de la conservation ? A faire quand pas de bibliographies disponibles, pas deACTALIA -
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Caractérisation
de la chaîne du froidDistributions des
températuresCaractéristiques physico-
chimiques pH, aw, microflore,Conditionnement
Air, vide, AM
Procédé de fabrication
Etapes du procédé
Description et composition
du produitDurée de vie,
Littérature scientifique
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prévisionnelleProbabilité de croissance,
Simulation de croissance
Données historiques
Prévalence,
Dénombrement
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alimentaireBesoin de connaissances sur le produit
Besoin de connaissances sur le
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Nombre de lots
1 ou 3 ?
Préparation
des échantillons liquide vs solideSouches
Terrain ou collection ?
Seule ou mélange
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alimentaire Challenge-tests : ŃRQGLPLRQV GH PLVH HQ ±XYUH Les rendez-vous de la diversification ² 27/01/16 - GemblouxRéalisation des challenge-tests
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Inoculation des
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Volume minimal
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