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TP Présence de phycoérythrine par chromatographie •Matériel privilégié :

Algues rouges ( Chondrus crispus...)

•Protocole expérimental : Protocole d'extraction d'une solution de chlorophylle brute - Placer dans un mortier un peu de sable fin. Ajouter les feuilles bien vertes coupées en petits

morceaux.- Broyer à l'aide du pilon.- Ajouter progressivement environ 10 ml d'alcool à 90° et continuer à broyer 5 min.- Filtrer le contenu du mortier. Vous obtenez une solution de chlorophylle brute

•Protocole de la chromatographie

- Repérer le bas de la bande de papier à chromatographie (Whatman) : extrémité opposée à l'orifice

par lequel la bande sera suspendue.- Veiller à prendre le papier uniquement par les bords sans poser vos doigts sur la zone de

migration.- Déposer à environ 2 cm du bas de la bande, une dizaine de gouttes de la solution de chlorophylle

brute obtenue, en séchant entre chaque dépôt.- Verser du solvant organique dans l'éprouvette ; la tache de chlorophylle brute doit être située au-dessus du niveau du solvant.

- Suspendre le papier à chromatographie à l'aide d'un crochet fixé sur un bouchon, le placer dans

l'éprouvette et fermer. Faire l'obscurité en recouvrant l'éprouvette d'un cache noir et laisser

migrer le solvant.- Repérer les différents pigments en localisant la phycoérythrine. •Remarque :

De la même manière que précédemment, il serait intéressant de disposer d'un document de secours

pour que les élèves puissent comparer le résulat de leur manipulation avec la place de ce pigment

sur une chromatographie de référence.•Capacités testées :

- Respecter un protocole.- Confronter les données de l'expérimentation avec les résultats proposés sur un document de

référence.quotesdbs_dbs43.pdfusesText_43