avec le support les différentes étapes d'une chromatographie sur couche mince ( CCM) sont : préparation de l'éluant (phase mobile) préparation de la plaque
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Savoir réaliser et interpréter une chromatographie sur couche mince (mélanges colorés et incolores) 2) Principe de la CCM 3) CCM de colorants alimentaires
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o Chromatographie de colorants alimentaires o Mélange Chromatographie sur couche mince Réaliser et couche mince (mélanges colorés et incolores)
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Chromatographie de différentes encres Réaliser la chromatographie Coller votre chromatogramme Le commenter IV Colorants alimentaires
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colorants, en utilisant la technique de chromatographie de partage sur papier plus qu'en chromatographie sur couche mince) ; sécher et faire une seconde
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✓ Connaître et comprendre le principe de la C C M ✓ Réaliser une C C M sur l' exemple des colorants alimentaires ✓ Utiliser cette méthode pour identifier trois
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de laboratoire : la chromatographie sur couche mince, pour séparer et identifier de constituants d'un mélange I - Chromatographie de colorants alimentaires
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La chromatographie sur couche mince, ou sur plaque (CCM), est effectuée surtout en car ils font partie de notre vie alimentaire : les colorants de la série E
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avec le support les différentes étapes d'une chromatographie sur couche mince ( CCM) sont : préparation de l'éluant (phase mobile) préparation de la plaque
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L'éluant, autrement appelé phase mobile, solubilise et entraîne le long du support (ou phase fixe) les colorants Chaque espèce chimique composant ces
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tsspec1_02.doc Page 1 sur 4 JFC
ÉTUDE DE COLORANTS AÉTUDE DE COLORANTS AÉTUDE DE COLORANTS AÉTUDE DE COLORANTS ALIMENTAIRESLIMENTAIRESLIMENTAIRESLIMENTAIRES
1. Les colorants alimentaires.
N N C N N O 3 S O O S O 3Tartrazine : E 102
Ils font partie de la liste des additifs alimentaires E1xx. (code européen) Les trois les plus rencontrés sont (ils sont en vente dans les rayons dédiés à la pâtisserie) :
NN SO 3 SO 3 C 2 H 5 C 2 H 5 C 2 H 5 C 2 H 5 HO bleu patenté : E 131Vous allez tenter de séparer les différents constituants d'un mélange de ces colorants par chromatographie.
O 3 SN N HO SO 3-E122 : Azorubine
2. Chromatographie sur papier. Réalisez différentes chromatographies des même mélanges sur cellulose (papier) pour six éluants différents. Laissez 2 cm entre les dépôts et 2 cm avec le bas de la feuille (réalisez les dépôts en plusieurs fois). Séchez et donnez au papier une forme cylindrique de diamètre inférieur à celui du diamètre intérieur de la cuve en attachant les bords opposés avec des agrafes : il ne faut pas que les deux bords du chromatogramme soient en contact ni que le chromatogramme touche la paroi de la cuve. Réaliser l'élution avec les éluants proposés. Séchez les chromatogrammes. Observez, déterminez l'éluant le plus approprié et interprétez les résultats. Composition des éluants 1 : Eau pure 2 : Éthanol à 95° 3 : Éthanol / eau dans le rapport 50/50 en volume 4 : Eau salée à 20 g.L
-15 : Eau salée à 100 g.L
-16 : Éthanol à 95° / eau salée à 40 g.L
-1 dans le rapport 50 / 50 en volume2. Chromatographie sur colonne.
Vous allez réaliser la chromatographie d'un mélange du colorant vert et du colorant rouge dans une
colonne de silice et pour trois éluants différents. (éluants 1 , 2, et 6) ; l'objectif, ici est de séparer et de recueillir les différents colorants.Décrivez les résultats des trois chromatographies ; proposez une solution pour réaliser la récupération
complète des trois colorants séparés.tsspec1_02.doc Page 2 sur 4 JFC 3. Identification des colorants par spectrophotométrie. 3.1. Réalisez les spectres d'absorption (solutions diluées) en lumière visible de la tartrazine, du bleu patenté et de la solution verte (une goutte pour 20 mL d'eau) ; la solution de référence est l'eau. 3.2. Tracez, observez et interprétez les trois spectres obtenus. Spectrophotomètre (principe de fonctionnement)
tsspec1_02.doc Page 3 sur 4 JFC chromatographie : Procédé de séparation de différentes
substances en solution ou en suspension dans un liquide. (Il existe plusieurs techniques de chromatographie : sur papier, sur couche mince, sur colonne échangeuse d'ions et en atmosphère gazeuse, utilisées dans les laboratoires de recherche et d'analyse pour séparer les protéines, les acides aminés, les acides gras etc...) Réalisation d'une chromatographie sur couche mince . Lorsqu'un solvant (ou éluant) se déplace par capillarité sur un support, il entraîne avec lui des solutés qui migrent à des vitesses différentes : la vitesse de migration de chaque composé dépend de son affinité avec le solvant utilisé (par exemple, sa solubilité dans ce solvant...) et de son affinité avec le support. les différentes étapes d'une chromatographie sur couche mince (CCM) sont : préparation de l'éluant (phase mobile) préparation de la plaque (phase stationnaire) ; dépôt de gouttes de différentes solutions (corps purs et mélanges) ; séchage. migration de l'éluant révélation de la chromatographie (à chaque tache correspond un corps pur différent) analyse de la chromatographie