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Thème Santé

TP 13 : CCM (Chromatographie sur Couche Mince)

1) Objectif

Savoir réaliser et interpréter une chromatographie sur couche mince (mélanges colorés et incolores).

2) Principe de la CCM

Chromatographie vient du grec " Khrôma » (couleur) et " Graphein » (écrire). Cette technique permet de

séparer les espèces chimiques présentes dans un mélange homogène

échantillons à tester, ainsi que les échantillons témoins, sont disposés sur une plaque de chromatographie

(phase fixe) plongée dans un éluant (phase mobile).

3) CCM de colorants alimentaires

a) Protocole expérimental Méthode de préparation de la CCM : http://itarride.chez-alice.fr/simul_anim/prepa-chromato.swf

La cuve à élution est un bécher

haut contenant un liquide appelé " éluant » sur une hauteur

0,5 cm.

Elle doit être fermée de manière

à c

La plaque de chromatographie est

sur . Il faut la prendre sur les côtés pour éviter les traces de doigts qui

A 1 cm du bord inférieur, tracer

délicatement au crayon un trait Les dépôts ne devront pas tremper

Marquer par des croix ou des

traits les emplacements correspondant aux échantillons à déposer en gardant un espace minimum avec les bords de la plaque. Repérer par un chiffre ou une lettre les emplacements.

Déposer les échantillons avec une

pipette pasteur ou un pic en bois

Eventuellement, sécher les dépôts

avec un sèche-cheveux.

Introduire délicatement la

plaque dans la cuve et veiller à ce que la ligne de dépôt ne soit

Refermer la cuve, ne plus la

toucher et laisser éluer.

Thème Santé

b) Résultats et exploitations

Les échantillons te

B V R J

Interpréter le chromatogramme

hauteurs différentes. ˬoit sa grosseur et sa forme) correspond à une espèce chimique. même espèce chimique.

Remarque :

Dans le cas où les dépôts ne sont pas colorés (ceux qui est le cas la plupart du temps), pour faire apparaître

les taches (révélation), on place le chromatogramme sous une lampe UV : les espèces chimiques absorbant

introduire la plaque dans des récipients satur

4) CCM de médicaments

Visionner la vidéo " faux médicaments ».

P chimiques présentes dans le médicament " Aspégic ».

Compléter le chromatogramme ci-.

Thème Santé

Sur la paillasse professeur :

Éluant colorants alimentaires :

600 40 g.L1 + 120 mL

Éluant médicaments :

ormique (ou méthanoïque HCO2H) + 280 mL de cyclohexane C6H6 + 420 mL

3COOCH2CH2CH2CH3)

Ethanol

5 béchers de 250 mL

UPSA, Aspirine du Rhône, Aspirine pH 8, Actron, Doliprane

Papier Whatman

Plaques CCM

Ciseaux

5 Pipettes Pasteur

Agitateur

Lampe UV

Récipient contenant du sable et du diiode I2

Sur les paillasses élève :

3 colorants alimentaires

piques à apéritif

Bocal à chromato + couvercle

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