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Matériel et protocole pour le TP 1 : Carotte domestiquée et d'élevage

I - Matériel

Matériel biologique : Carottes orange et carotte de couleur autre qu'orange (jaune, blanche, violette,

rouge), carotte sauvage

Matériel pour chromatographie : agitateur, bande de papier Wattman, éprouvette , bouchon avec

crochets de suspension, papier aluminium, solvant à chromatographie

Matériel pour coloration : lames de rasoir ou scalpel, solution de phloroglucine à 2% , Béchers de

50 ml ou coupelles profondes, pinces moyennes, lunettes, gants, solution d'acide chlorhydrique

II - Protocoles

1 - Protocole de la chromatographie

-Préparer l'éprouvette : suspendre le papier à chromatographie à l'aide d'un crochet fixé sur un bouchon, le placer dans l'éprouvette pour repérer le niveau du solvant à mettre (le papier doit tremper d'un demi cm dans le solvant). Veiller à prendre le papier uniquement par les bords sans poser vos doigts sur la zone de migration. -Retirer le papier, verser le solvant jusqu'au niveau repéré et fermer l'éprouvette sans le papier. -Tracer un trait au crayon à 2 cm du bas de la bande de papier pour marquer l'emplacement du dépôt. Déposer la solution de pigments avec la pipette (ne pas hésiter à faire un gros dépôt). -Superposer une dizaine de gouttes de la solution en séchant entre chaque goutte à l'aide d'un sèche- cheveux. -Suspendre le papier à chromatographie, le placer dans l'éprouvette en vérifiant que les dépôts de pigments sont bien situés au-dessus du niveau du solvant et fermer. -Recouvrir l'éprouvette d'un cache noir et laisser migrer le solvant à l'obscurité pendant 20 à 30 minutes.-

2 - Protocole de coloration de la lignine

-Réaliser des coupes fines de carotte d'épaisseur d'environ 2 mm. -Immerger ces coupes de racines de carotte 15 à 20 minutes dans la solution de phloroglucine -Les immerger 5 minutes dans l'acide chlorhydrique qui révèle la coloration rouge des tissus lignifiés. www.morandsvt.frquotesdbs_dbs29.pdfusesText_35

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