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[PDF] TP SPECTRE DABSORPTION - Pierron 1 / 3

LSVT12

© PIERRON LSVT12Spectre d"absorption

⮚ EXTRAIT DU BO:

Notions et contenus :

La photosynthèse est la succession de deux phases : dans les thylakoïdes, une phase photochimique dans laquelle grâce à la

collecte des photons par les pigments, ...

Activités envisageables :

▪ Séparation de pigments photosynthétiques par chromatographie. ▪ Étude des spectres d"absorption de pigments chlorophylliens. ▪ Comparaison du spectre d"action et du spectre d"absorption pour un végétal.

CADRE PÉDAGOGIQUE :

On cherche à comprendre comment la photosynthèse rend les êtres vivants chlorophylliens autotrophes.

On se propose alors de découvrir les propriétés des pigments végétaux vis-à-vis de la lumière solaire.

On émet l"hypothèse selon laquelle les pigments absorbent la totalité des longueurs d"onde de la lumière blanche.

Objectifs de méthode :

▪ Réaliser : suivre un protocole ▪ Raisonner : adopter une démarche explicative ⮚ Objectifs de connaissances :

Les plantes chlorophylliennes absorbent la lumière principalement dans les longueurs d"onde bleu et rouge.

⮚ Coin laboratoire: Gestion du temps : TP réalisable le jour même, pas de préparation préalable.

Achat à prévoir : épinards, produits chimiques : alcool Réf. 382980, piles pour l"appareil Mesura® Color Réf.22020

MATÉRIEL:

▪ Matériel frais : épinards ▪ Matériel de mesure : un colorimètre autonome : Mesura-color Réf.22020 ▪ ( vérifier la mise en place de 2 piles LR6 - 1,5 volts) Réf. 04760 ▪ Matériel d"extraction de la chlorophylle : - mortier, Réf. 00115 (mortier et pillon) - pilon, - sable, Réf. 800980 - ciseaux, Réf. 00654 - entonnoir, Réf. 06564 - filtre, Réf. 007410 - dispositif de filtration Réf. 00698 (Support pour entonnoir) ▪ Verrerie : - cuve à face parallèle, livrée avec l"appareil de mesure - pipettes 5 ml Réf. 06715 ▪ produits chimiques : alcool à 90°, Réf. 800980 ▪ Sécurité :

particularité : odeur d"alcool  aération à mettre en oeuvre + fermer le flacon aussitôt après le prélèvement de façon

hermétique THEME : Diversité et complémentarité des métabolismes

Dans la partie " Du carbone minéral aux composants du vivant : la photoautotrophie pour le carbone » Niveau : Spécialité TS

TP SPECTRE D"ABSORPTION

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© PIERRON LSVT12Spectre d"absorption

LSVT12

Activités

On se propose de découvrir les propriétés des pigments végétaux vis-à-vis de la lumière.

Hypothèse : les pigments absorbent la totalité des longueurs d"onde de la lumière.

1- Proposer une conséquence vérifiable pour valider l"hypothèse.

2- Réaliser la manipulation décrite dans le protocole d"extraction de la chlorophylle brute.

3- Réaliser des mesures d"absorbance de la solution de chlorophylle brute pour éprouver l"hypothèse.

4- Construire un tableau de résultats.

5- Tracer le graphe illustrant l"absorbance d"une solution de chlorophylle brute d"épinards en fonction

des longueurs d"onde du spectre de la lumière blanche, on obtient le spectre d"absorption.

6- Exploiter le graphe obtenu pour tester l"hypothèse.

7- Conclure en reliant au problème initial.

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© PIERRON LSVT12Spectre d"absorption

LSVT12

⮚ PROTOCOLE EXPÉRIMENTAL:

1- Laver une feuille d"épinard et enlever la nervure centrale. Découper en fins lambeaux à l"aide de ciseaux.

2- Broyer dans un mortier avec un peu de sable (rôle d"abrasif) dans un peu d"alcool à 90°.

3- Filtrer le jus obtenu, on recueille une solution alcoolique de chlorophylle brute.

4- Placer 3 ml de cette solution dans une cuve à faces parallèles et fermer à l"aide du bouchon noir fourni.

5- Sélectionner la mesure de l"absorbance.

6- Etalonner avec une cuve remplie d"eau en appuyant simultanément sur les 2 boutons de la face avant de l"appareil, la

valeur de l"absorbance s"affiche au bout de quelques secondes soit 0,00.

7- Placer alors la cuve de chlorophylle brute dans son emplacement puis réaliser des mesures nécessaires sachant que l"on

a à disposition 6 longueurs d"onde différentes : 470 nm, 567nm, 585 nm, 635 nm, 655 nm, 700 nm ainsi que la lumière

blanche.

Exemple de résultats avec Mesura Color

Tableau de

mesures : longueur d"ondes en nm Absorbance A d"une solution de chlorophylle brute d"épinards

470 0,099

567 0,039

585 0,058

635 0,093

655 0,162

700 0,076

Graphe correspondant tracé avec un tableur

(Excel) % d"Absorbance en fonction de la longueur d"onde

00,050,10,150,2

0 500 1000

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