échantillons à tester, ainsi que les échantillons témoins, sont disposés sur une plaque de chromatographie (phase fixe) plongée dans un éluant (phase mobile) 3
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On prépare la cuve en y mettant l'éluant et en couvrant pour que la cuve conserve les vapeurs de cet éluant (schéma n°1) - En dehors de la cuve, les mélanges
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échantillons à tester, ainsi que les échantillons témoins, sont disposés sur une plaque de chromatographie (phase fixe) plongée dans un éluant (phase mobile) 3
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Nom Gaz Chromatographie en phase vapeur (CPV) ou en phase gazeuse (GC) Liquide Chromatographie couche mince (CCM ou TLC) ou éclair Liquide
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La CCM correspond à de la chromatographie liquide (la phase mobile est un liquide) pour de gel de silice (voir les propriétés dans le document de cours)
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Au cours d'une chromatographie, les espèces chimiques d'un échantillon de Chromatographie sur couche mince ( C C M) : la phase fixe est solide ( gel de
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Thème Santé
TP 13 : CCM (Chromatographie sur Couche Mince)
1) Objectif
Savoir réaliser et interpréter une chromatographie sur couche mince (mélanges colorés et incolores).
2) Principe de la CCM
Chromatographie vient du grec " Khrôma » (couleur) et " Graphein » (écrire). Cette technique permet de
séparer les espèces chimiques présentes dans un mélange homogèneéchantillons à tester, ainsi que les échantillons témoins, sont disposés sur une plaque de chromatographie
(phase fixe) plongée dans un éluant (phase mobile).3) CCM de colorants alimentaires
a) Protocole expérimental Méthode de préparation de la CCM : http://itarride.chez-alice.fr/simul_anim/prepa-chromato.swfLa cuve à élution est un bécher
haut contenant un liquide appelé " éluant » sur une hauteur0,5 cm.
Elle doit être fermée de manière
à c
La plaque de chromatographie est
sur . Il faut la prendre sur les côtés pour éviter les traces de doigts quiA 1 cm du bord inférieur, tracer
délicatement au crayon un trait Les dépôts ne devront pas tremperMarquer par des croix ou des
traits les emplacements correspondant aux échantillons à déposer en gardant un espace minimum avec les bords de la plaque. Repérer par un chiffre ou une lettre les emplacements.Déposer les échantillons avec une
pipette pasteur ou un pic en boisEventuellement, sécher les dépôts
avec un sèche-cheveux.Introduire délicatement la
plaque dans la cuve et veiller à ce que la ligne de dépôt ne soitRefermer la cuve, ne plus la
toucher et laisser éluer.Thème Santé
b) Résultats et exploitationsLes échantillons te
B V R J
Interpréter le chromatogramme
hauteurs différentes. ˬoit sa grosseur et sa forme) correspond à une espèce chimique. même espèce chimique.Remarque :
Dans le cas où les dépôts ne sont pas colorés (ceux qui est le cas la plupart du temps), pour faire apparaître
les taches (révélation), on place le chromatogramme sous une lampe UV : les espèces chimiques absorbant
introduire la plaque dans des récipients satur