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La chromatographie d'adsorption est basée sur le partage des solutés Papier, cellulose, amidon, carbonate de sodium, gel de silice, alumine, charbon activé



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soit un liquide (ex: chromatographie sur papier, couche mince ou colonne): la d'adsorption : la phase mobile est un solvant ou un mélange de solvants, qui la phase stationnaire : une couche d'environ 0,25 mm de gel de silice ou d'un 



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la silice perd ses propriétés adsorbantes par saturation des sites d'adsorption ( colonne En d'autres termes, le solvant et la phase stationnaire doivent être en 



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Adsorption ⇒ chromatographie d'adsorption ⇒ la phase stationnaire est un solide ➢ Partage La phase solide (alumine , gel de silice, polyamide etc ) 



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gélatine, de la silice, un polymère, de la silice greffée etc Chaque À partir de 1903, Tswett utilisa des colonnes d'adsorption pour séparer des pigments de



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Principe du phénomène de migration dans une colonne de chromatographie en phase À partir de 1903, Tswett utilisa des colonnes d'adsorption pour séparer des La phase stationnaire : Une couche d'environ 0,25 mm de gel de silice ou  



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être solide ou liquide Les solides, silice ou alumine traitées, permettent la employés comme remplissage d'une colonne (chromatographie par gravité et chromatographie à haute performance la chromatographie d'adsorption/d' affinité ;



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1931 (KUHN et LEDERER) : chromatographie sur colonne (chromatographie liquide- la phase stationnaire est un adsorbant solide polaire (silice ou alumine ) : chromatographie apolaire : chromatographie d'adsorption en phase inverse

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Licence Physiotoxicologie Module/ Techniques de laboratoire.

TP 6: CHROMATOGRAPHIE SUR COLONNE.

Extraire et identifier des espèces chimiques.

Objectifs : 6pSMUHU HP LGHQPLILHU OHV ŃRORUMQPV G·XQ VLURS GH PHQPOHB La chromatographie sur colonne est une chromatographie d'adsorption. L'adsorption consiste en la formation de liaisons entre les molécules d'un composé et celles de la substance adsorbante. La phase stationnaire est un solide, le plus souvent silice ou alumine remplissant une colonne.

L'échantillon est déposé en haut de la colonne. La séparation des espèces chimiques est

obtenue par l'écoulement continu d'une phase mobile, ou éluant, à travers la colonne.

La séparation est basée sur les différences de vitesses d'entraînement, vers le bas de la colonne,

des substances contenant l'échantillon. Ces vitesses dépendent de la capacité d'adsorption de

l'espèce par la phase stationnaire, et de la solubilité de cette espèce dans l'éluant.

Matériel :

-colonne Produits : - pipette pasteur - sirop de menthe - tige métallique - gel de silice - coton - SLVVHPPH G·HMX GLVPLOOpH - 2 béchers de 50 mL - spectrophotomètre + cuves - éthanol à 95 % - un flacon contenant le colorant E 102 (tartrazine) - un flacon contenant le colorant E 131 (bleu patenté)

I) Principe.

I·pŃOMQPLOORQ HVP Géposé en haut de la colonne.

IM SOMVH IL[H HVP GH OM VLOLŃH RX GH O·MOXPLQH O·pOXMQP V·pŃRXOH GX OMXP YHUV OH NMV GH

la colonne. IM VpSMUMPLRQ HVP NMVpH VXU OM GLIIpUHQŃH GHV YLPHVVHV G·HQPUMvQHPHQP GHV VXNVPMQŃHV

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