La qualité de l’ADN obtenu permet d’effectuer des PCRs et la
une PCR après dilution au 1/50 dans de l’eau Extraction au phénol/chloroforme ÆTraitement au CTAB Pour des bactéries contenant d’importantes quantités d’alginates, il est nécessaire de traiter le lysat après l’action de la protéinase K avec du CTAB Diluer le lysat si nécessaire avec du tampon ADN TE pour diminuer la viscosité
Série 1 - AlloSchool
3) De quel type d’extraction s’agit-il ? quel est le rôle du chloroforme ? 4) Quelles sont les opérations à effectuer après la séparation des phases contenues dans l’ampoule pour isoler la vanilline pure ? Données: La vanilline est très soluble dans le chloroforme et peu soluble dans l’eau L’acide vanillique et
Solubilité du diiode(gL-1 Lalcool est miscible à leau L
expérimental de l’extraction est le suivant : l’extrait de vanille est dilué dans l’eau puis versé dans une ampoule à décanter Du chloroforme est ensuite versé dans l’ampoule à décanter Après agitation vigoureuse et dégazage, on procède à la séparation des phases Données : La vanilline est très soluble dans le
TP-cours de Chimie n°1 : EXTRACTION ET IDENTIFICATION DE L
Mise en œuvre expérimentale : L’extraction liquide-liquide est généralement réalisée dans une ampoule à décanter Protocole expérimental Transvaser le distillat dans une ampoule à décanter dont le robinet est fermé Verser 5 mL de dichlorométhane dans l’erlenmeyer Agiter puis transvaser dans l’ampoule à décanter
Remplacement du dichlorométhane comme solvant d’extraction et
4 extraction de la caféine dans des boissons, puis CCM 5 extraction et CCM de l’anéthol 6 extraction du diiode au dichlorométhane 7 CCM du limonène extrait de la peau d’agrume Les résultats La vanilline : l’acétate d’éthyle fonctionne comme solvant d’extraction et comme éluant CCM
Evaluation de l’efficacité de trois méthodes d’extraction d
une étape critique dans le but d’obtenir de l’ADN d’une pureté satisfaisante (Zhou et al ,1996) L’objectif de ce travail est de comparer l’efficacité de trois méthodes d’extraction d’ADN de la biomasse totale du compost pour essayer d’en choisir une qui diminue au maximum les impuretés, ce qui aura pour conséquence une bonne
0802005 f20 (Sang) Extraction de lADN à partir du sang
7 1 3 L’extraction de l’ADN est effectuée par un technicien/assistant de recherche ou du personnel formé et désigné par la biobanque 7 1 4 Resuspendre le culot de cellules blanches dans 2 ml de tampon de lyse en utilisant une pipette de transfert de 3 ml
[PDF] le role du citoyen dans la défense nationale
[PDF] le role du comique
[PDF] le role du complexe argilo-humique dans la fertilité du sol
[PDF] le role du dialogue dans un récit
[PDF] le role du maire et du conseil municipal cycle 3
[PDF] le role du marketing
[PDF] le role du placenta
[PDF] le rôle du réseau dans le recrutement
[PDF] le role du roman dissertation
[PDF] le rôle du système d information
[PDF] le role du système d'information dans l'entreprise
[PDF] Le rôle du système nerveux dans la perception de l'environnement
[PDF] Le rôle du système nerveux dans la perception de l'environnement - La perception de l'environnement
[PDF] le role du titre dans un roman
Remplacement du dichlorométhane
comme solvant d"extraction et éluant en CCMLe problème
De nombreux collègues utilisent le dichlorométhane dans ces deux rôles, mais il est répertorié C3
dans la classification CMR i. Il est donc recommandé, si c"est possible, de le remplacer par d"autres solvants moins toxiques.Les raisons de son utilisation sont :
il n"est pas miscible à l"eau ; c"est un bon solvant de la plupart des substances organiques, ce qui permet de mettre ces substances en solution ou de les extraire des solutions aqueuses ; il est plus dense que l"eau, ce qui permet de montrer que les phases aqueuse et organique n"occupent pas toujours la même position dans l"ampoule à décanter ; il est volatil, ce qui permet d"obtenir la substance extraite par évaporation du solvant, ou de sécher facilement la plaque de CCM.Les essais
Les manipulations signalées utilisant du dichlorométhane sont :1. extraction de la vanilline d"un extrait alimentaire
2. CCM de l"acétate de linalyle et (ou) de l"huile essentielle de lavande
3. repérage de la position des phases aqueuse et organique avec différents solvants
organiques4. extraction de la caféine dans des boissons, puis CCM
5. extraction et CCM de l"anéthol
6. extraction du diiode au dichlorométhane
7. CCM du limonène extrait de la peau d"agrume.
Les résultats
La vanilline : l"acétate d"éthyle fonctionne comme solvant d"extraction et comme éluant CCM.
La caféine est extraite du café salé et d"une boisson gazeuse type coca-cola par l"acétate d"éthyle.
L"éther éthylique a été essayé, mais il extrait de ces liquides une molécule qui n"est pas la
caféine ! Pour la CCM, le seul éluant capable de faire monter la tache est l"éthanol.L"acétate de linalyle est élué de façon correcte par un mélange de cyclohexane et d"acétate
d"éthyle 8/2 en volume.L"anéthol peut être extrait des végétaux (essai sur l"anis vert en poudre) par l"acétate d"éthyle.
L"éluant cyclohexane - acétate d"éthyle 8/2 en volume donne de bons résultats. On peut vérifier la
présence d"anéthol dans le pastis, où il est accompagné de beaucoup d"autres produits.Le limonène pur et un arôme artificiel d"orange ont été testés en CCM avec l"éluant cyclohexane -
acétate d"éthyle 8/2 en volume. Des taches se séparent, mais leur identification est délicate (en UV
on voit 2 taches pour le limonène commercial, 4 pour l"arôme d"orange...) sauf si on révèle
directement et seulement au permanganate basique : alors une seule tache est visible pour chacun des deux dépôts.La bonne surprise
Dans le BUP n° 873 d"avril 2005, l"article d"Alfred MATHIS " produits chimiques et cancers » signale l"utilisation possible du 1,1,1-trichloroéthane en remplacement du dichlorométhane. Ce produit est plus dense que l"eau, ce qui n"était vrai pour aucun des solvants évoqués précédemment. Il est " seulement » toxique par inhalation (mais pas classé CMR) et dangereux pour la couche d"ozone (R 20-59). Les essais effectués montrent qu"il extrait la vanilline et la caféine des solutions aqueuses.Il est également efficace comme éluant, sauf pour la caféine qu"il ne déplace pas. Il donne sur
plaque d"aluminium recouverte de silice les ordres de grandeur suivants pour les Rf :· Vanilline : 0,10
· Eugénol : 0,25
· Anéthol : 0,65
· Acétate de linalyle : 0,85
Cependant, il est moins volatil que le dichlorométhane, les taches et les plaques mettent un peu plus de temps à sécher.i La classification CMR répertorie les substances cancérogènes (C) mutagènes (M) toxiques pour la reproduction (R).
Dans chaque catégorie, le danger diminue de la catégorie 1 à la catégorie 3. Pour plus d"informations : notice ND2168 de l"INRS.