M SMP-M SMAC-M SMC - Sordalab
A Préparation de la « suspension mère » de levure : Verser à la pipette 10 mL d’eau stérile dans un tube stérile de 10 mL Prélever, avec un cure-dent stérile, quelques colonies de levures Ade2- isolées sur boîte de pétri Mettre en suspension dans les 10 mL d’eau stérile Agiter
TP5 – Les effets des UV sur les mutations
Les levures ade2 peuvent subir une mutation qui rétablit l’allèle sauvage Elles peuvent aussi provoquer d’autres mutations dont certaines sont mortelles Vous disposez des séquences de nucléotides des deux allèles (allèle1 et allèle2) du gène ade2 (Partage – SVT – TP 5 Mutations : fichier « ade2 edi ») Activités à réaliser 1
TP METABOLISME DES LEVURES - WordPresscom
La Levure est un organisme HETEROTROPHE: Elle doit utiliser des molécules organiques pour produire de l’énergieet fabriquer de la matière Les molécules utilisées sont transformées par les réactions du métabolisme Les produits de ces transformations sont rejetés par la levure Levure (organisme unicellulaire) au microscope optique
Quels sont les effets des UV sur les levures ? Pour répondre
Travail à faire : les levures ade2-forment des colonies de couleur rouge Ce pigment rouge est synthétisé par le métabolisme de la levure En effet, ces levures possèdent un allèle ade2-qui empêche la synthèse d’adénine (chaîne de biosynthèse
MUTAGENÈSE - Sordalab
SOUCHE : Saccharomyces cerevisae Ade2 sur boîte de Petri MILIEU : Équivalent à 2 litres spécifiques à la croissance de notre levure Ade2, conditionnement en fonction de l'option choisie MATÉRIEL : 70 compte-gouttes stériles 10 pipettes stériles de 5 ml 1 lame de dénombrement KOVA Tubes stériles : 45 de 5 ml, 2 de 50 ml et 4 de 10 ml
Improving synthetic lethal screens by regulating the yeast
levure sous le contrôle de promoteurs inductibles ou constitutifs, la stabilité des plasmides peut être diminuée de façon carrying an ade2 mutation are deficient in the purine bio
B/ Des agents mutagènes de l’environnement augmentent les
- une souche de levure rose ADE2- (1 clone de 1mm en suspension dans 1ml d’eau stérile, à agiter avant usage) - des boîtes de Pétri jetables contenant du milieu gélosé nutritif - des râteaux à ensemencer jetables sous emballage stérile - des pipettes compte-goutte de 1ml jetables sous emballage stérile
Pichia Fermentation Process Guidelines Overview
2 Overview, continued Recommended Equipment Below is a checklist for equipment recommendations Ł A jacketed vessel is needed for cooling the yeast during fermentation, especially
[PDF] Levures dans 4 milieux différents
[PDF] LEWIS ET CLARK LEUR EXPEDITIONT ,AIDE MOI SVP SES POUR DEMAIN !
[PDF] lex de physique "la réfraction"
[PDF] lexercices physique chimie
[PDF] lexercices physique chimie 2
[PDF] lexique
[PDF] Lexique
[PDF] lexique anglais français pdf
[PDF] lexique art plastique
[PDF] lexique artistique
[PDF] lexique chanson
[PDF] lexique chimie pdf
[PDF] lexique chinois pdf
[PDF] lexique chinois voyage
Objectif : on cherche à montrer que des facteurs environnementaux, comme les UV, peuvent favoriser l'apparition
de mutations.Des levures Saccharomyces cerevisiae de souche ade2 formant des colonies rouges sont cultivées sur un milieu nutritif
gélosé dans des boîtes de Pétri. Une colonie regroupe plusieurs centaines de cellules qui sont invisibles individuellement.
Lors de la mise en culture, on veille à ce que les cellules sont isolées les unes des autres pour que chaque colonie formée
ne soit issue que du développement d'une seule cellule.Les levures sont exposées pendant des durées différentes à un rayonnement ultra-violet (O, 15, 30 ou 60 secondes).
Chaque boîte de Pétri est ensuite placée dans un incubateur pendant 5 jours afin que les cellules se multiplient et que les
colonies soient visibles.Vous disposez des photographies de boîtes de Pétri ayant subi les différentes conditions d'exposition aux UV (Partage -
SVT - TP 5 Mutations).
Schématisation du protocole de culture des levuresLe gène ade2 code une enzyme qui intervient dans la voie de biosynthèse de l'adénine. L'allèle muté (noté allèle2) présent
chez les levures de la souche ade2 entraîne la production d'une enzyme inactive. La voie de synthèse de l'adénine est alors
bloquée, conduisant à l'accumulation d'une substance intermédiaire de couleur rouge.Les levures sauvages possèdent l'allèle sauvage (noté allèle1) et non muté du gène ade2. Ces levures produisent donc
l'enzyme active permettant la synthèse normale d'adénine. La substance intermédiaire rouge n'est donc pas produite et les
levures sauvages sont donc de couleur blanche.Les levures ade2 peuvent subir une mutation qui rétablit l'allèle sauvage. Elles peuvent aussi provoquer d'autres
mutations dont certaines sont mortelles.Vous disposez des séquences de nucléotides des deux allèles (allèle1 et allèle2) du gène ade2 (Partage - SVT - TP 5
Mutations : fichier " ade2.edi »).
Activités à réaliser
1. Réaliser le comptage des différentes colonies dans les différentes boîtes de Pétri.
Le comptage se réalise avec le logiciel Mesurim et les différentes images "Levures 0sec.jpg » ...
Pour faciliter le comptage, travailler sur un quart de la boîte et redimensionner l'image. Pour cela, cliquer sur " Image »
puis " Redimensionner ». Choisir 150 %, puis OK.Compter les colonies situées sur la limite.
Les résultats seront notés au tableau et une moyenne sera effectuée avec les résultats des différents groupes.
Voir fiche technique : Comptage avec Mesurim
2. Comparer les séquences de nucléotides des deux allèles du gène ade2.
La comparaison se réalise avec le logiciel GENIEGEN et le fichier " ade2.edi » Voir fiche technique : Utilisation du logiciel Geniegen3. Exploiter l'ensemble de vos résultats pour montrer que des facteurs environnementaux peuvent favoriser
l'apparition de mutations. Chapitre 1 : Transmission, variation et expression de l'information génétiqueTP5 - Les effets des UV sur les mutations.
pas d'exposition aux UVlevures 0 sec UV UVUVculture
5 jours
culture5 jours
culture5 jours
culture5 jourslevures 15 sec
levures 30 sec levures 60 sec1. Comptage des colonies de levures (avec Mesurim)
2. Comparaison des séquences (avec GenieGen)
3. Exploitation
Le comptage nous montre que sous l'effet d'une exposition croissante aux UV, la proportion de colonies
blanches par rapport à l'ensemble des colonies augmente : elles sont absentes pour les les colonies n'ayant
pas reçu d'UV et elles sont largement majoritaires pour les colonies ayant reçu 30 secondes d'UV.
Or, on sait que l'apparition des colonies blanches à partir des colonies rouges résulte d'une mutation ayant
affecté le gène ade2.Donc, sous l'effet des expositions croissantes aux UV, on observe de plus en plus de colonies mutées, ce
qui nous montre bien que les mutations sont favorisées par des facteurs de l'environnement, comme les
rayonnements.La comparaison des séquences nucléotidiques des deux allèles confirme qu'il existe bien une mutation.
Elle concerne le 103ème nucléotide qui a subi une substitution : le nucléotide G sur l'allèle 2 (muté) est
remplacé par un nucléotide T sur l'allèle 1 (version sauvage non mutée).De plus, le comptage nous montre qu'une exposition aux UV de 60 secondes a entraîné une mortalité très
importante chez les levures, puisque seules 5 colonies ont pu se développer. Or, on nous apprendégalement que certaines mutations peuvent être mortelles. On peut donc supposer que la mortalité très
élevée des levures soumises à une exposition de 60 secondes est liée à des mutations. Cela confirme donc
que les mutations sont effectivement favorisées par des facteurs de l'environnement, comme les rayonnements.durée d'exposition aux UV0153060