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DOSSIER DECOUVERTE La Boite de Petri

L'histoire dit qu'une amie de la femme de Robert Koch, Saly Hess, avait l'habitude de solidifier ses confitures avec une gélose appelée agar, un polymère de sucre (polysaccharide du galactose) extrait d'une algue rouge L'agar ne fond qu'à partir de 60°C Richard Petri invente sa boite et développe des milieux nutritifs mêlant agar,

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Si masque lavable : le mettre dans une boite hermétique et le laver à 60° en machine avec de la lessive (mais sans adoucissant) et le sécher au séchoir ou au sèche-cheveux dans les 2 heures après la fin du cycle de la machine Attention les masques lavables ont une durée de vie limitée et ne supportent que 10 à 20 lavages

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DOSSIER DECOUVERTE

La Boite de Petri

Mettre en culture

Dossier découverte: la boite de Petri

SOMMAIRE

Au fil de l'histoire.......................................................................3 La boite de Petri, du principe à l'utilisation....................................4 La boite de Petri au service de la science.....................................6

Coulisses de laboratoires - septembre 2015 2

Dossier découverte: la boite de Petri

Au fil de l'histoire

Etape par étape

XIX e siècle : l'avènement de la bactériologie Louis Pasteur est le fondateur de la bactériologie. Il cultive entre autres les microorganismes sur des milieux liquides et est le premier à établir formellement le lien entre les micro-organismes et les maladies. Il devra combattre plusieurs années pour vaincre les partisans de la " génération spontanée* ». Ses bouteilles à col de cygne, qui laissent passer l'air mais pas les microbes, préfigurent ce qu'on attend d'une boite de Petri. Fin du XIXe siècle : les essais du laboratoire de Koch En Allemagne, Robert Koch et son assistant Richard Julius Petri perfectionnent les techniques de culture de germes. Une des premières méthodes utilisées par Koch est d'isoler les bactéries à la surface de pommes de terre cuites et coupées. Les cultures ne se développaient pas toujours. Ils essayent également des techniques consistant à solidifier un milieu nutritif à l'origine liquide, en y ajoutant de la gélatine ou du sérum sanguin qui coagule. Le seul défaut de ces préparations est que la gélatine se liq uéfie à des températures supérieures à 28

°C.

On ne peut donc l'utiliser pour cultiver des bactéries qui se développent

à la température du corps humain.

1887 : l'invention de Petri

L'histoire dit qu'une amie de la

femme de Robert Koch, Saly Hess, avait l'habitude de solidifier ses confitures avec une gélose appelée agar, un polymère de sucre (polysaccharide du galactose) extrait d'une algue rouge. L'agar ne fond qu'à partir de 60

°C. Richard Petri

invente sa boite e t développe des milieux nutritifs mêlant agar, extraits de viande ou protéines digérées.

Louis Pasteur.

Crédit Google

Robert Koch. Crédit Google

Richard Julius Petri

Crédit Google

Coulisses de laboratoires - septembre 2015 3

Dossier découverte: la boite de Petri

La boite de Petri, du principe à

l'utilisation

Le principe

Les boites de Petri sont de petites boites à fond plat, fabriquées en verre transparent ou plastique,

rondes ou carrées, d'un diamètre de quelques centimètres (en général entre 5 et 20). Elles sont

composées de deux moitiés, un couvercle et un fond, qui s'encastrent l'un dans l'autre, ce qui les rend

étanches a

ux éléments en suspension, même de petite taille. Le contenu est ainsi protégé d'une

éventuelle contamination par les bactéries présentes dans l'air, tout en laissant s'échapper les gaz

produits par les bactéries dans la boite. Elles ont l'avantage d'être facilement manipulables,

empilables et peu coûteuses. Alors que les boites de Petri en verre sont réutilisables après

stérilisation (dans un autoclave*), les boites de Petri en plastique sont souvent à usage unique.

Lorsque l'objectif de l'utilisation de la boite

de Petri est la culture de bactéries, la boite de Petri est alors partiellement remplie d'un liquide nutritionnel (composé de minéraux) permettant le développement du micro -organisme

étudié. Le milieu de culture est composé

d'une base qui peut être de l'agar-agar*, sous forme gélifié, ou un bouillon de culture totalement liquide.

Mode d'emploi et fonctionnalités

Un objet pour cultiver des bactéries :

couplée à un milieu de culture tel que l'agar-agar*, la boite de Petri est utilisé pour la culture de bactéries. Un objet pour observer : la boite de Petri est si pratique qu'elle a été détournée de son usage initial pour diverses applications. En effet, de par ses caractéristiques - transparente, plate, stérilisable, peu couteuse et empêchant l'évaporation - elle se prête particulièrement bien à l'observation de petits éléments organiques ou non. Introduction de bactéries dans une boite de Petri

Crédit : Google

Boite de Petri

Crédit Google

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Dossier découverte: la boite de Petri

A propos des limites et sources d'erreur

L'hygiène et la stérilisation sont indispensables, afin d'éviter toute contamination de la culture mais aussi du laborantin et/ou de son environnement : - Avant de les manipuler, les boites de Petri doivent être complètement stérilisées avant d'être utilisées pour faire croître des bactéries. Dans le cas contraire, les résultats de l'expérience pourraient en

être affectés.

- Il est évident qu'une culture bactérienne ne doit en aucun cas être jetée sans avoir subi auparavant une décontamination. Il suffit de nettoyer avec de l'

Informations complémentaires :

Des conseils sur la manipulation des boites de Petri

La boite de Petri dans nos vies

Bien que l'on rencontre assez peu la

boite de Pétri dans notre quotidien, cet objet scientifique est très présent dans les laboratoires de recherche ou dans les classes, où son rôle initial a été largement détourné pour de multiples usages.

Boite de Petri. Crédit Google

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Dossier découverte: la boite de Petri

La boite de Petri au service de la

Science

La boite de Petri est largement utilisée en microbiologie pour la mise en culture de micro -organismes, de bactéries, de virus ou de cellules eucaryotes.

La boite de Petri et

TARA

La pollution plastique en Méditerranée

450 millions d'habitants vivent sur les zones côtières de la Méditerranée répartis dans 22 pays

riverains. Par ses caractéristiques géographiques et climatiques, la Méditerranée abrite aussi près de

8 % de la diversité biologique marine,

même si elle ne représente que 0,8 % de la surface de l'Océan.

Aujourd'hui ses mégapoles sont saturées, la Méditerranée concentre 30% du trafic maritime mondial,

les difficultés liées aux pollutions venant de la terre se multiplient, mettant sous pression l'écosystème

marin essentiel pour les populations et pour la vie en général. Parmi ces pollutions, la présence

croissante de micro -plastiques dans la mer et sa probable incorporation dans la chaine alimentaire, et donc dans nos assiettes, pose question. Il est urgent de comprendre les processus en jeu afin de

proposer des solutions. C'est le rôle de la mission Tara Méditerranée, qui a eu lieu de mai à novembre

2014.

Pollution plastique dans un port maltais

Crédit : Google

Ne pas confondre : bactéries et moisissures

Les bactéries et les moisissures sont tous deux des micro -organismes vivants. Le terme de "moisissures" désigne tous les champignons microscopiques présents dans la nature et dans les maisons et appartements. Le s moisissures sont des eucaryotes (présence d'un noyau) avec des noyaux typiques entourés d'une membrane et contenant des chromosomes*. Ce caractère les

différencie des bactéries qui sont des procaryotes, c'est à dire qu'ils sont dépourvus de noyau, le

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Dossier découverte: la boite de Petri

Le rôle des boites de Petri dans l'expédition Tara Med

Dans le cadre de l'expédition Tara Méditerranée, les boites de Petri ne sont pas exactement utilisées

pour la mise en culture de bactéries ou de micro -organismes... Leur transparence et leur profil plat

font d'elles des récipients temporaires particulièrement commodes pour le tri d'échantillons de petites

tailles tels que les microplastiques lors d'une station de prélèvement. Une fois les microplastiques

triés, la boite de Pétri est ensuite transportée à l'intérieur de la goélette, afin d'être prise en photo et

éventuellement observée au microscope. Les échantillons sont ensuite placés dans des tubes afin

d'être conservés avant expédition vers les laboratoires.

Collecte de déchets plastiques sur les plages.

Crédit : N.Pansiot

Le pont de la goélette pendant l'expédition Tara Med . Crédit : P.Bourgain La boite de Petri est placée sur une plaque luminescente pour faire l"inventaire des microplastiques.

Crédit : N.Pansiot

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Dossier découverte: la boite de Petri

Premiers constats

Sur les quelques 300 traits de filets réalisés aussi bien au large que près des côtes, tous sans

exception ont ramené des micro -plastiques. Ces particules minuscules issues de la dégradation des

composés plastiques (emballages, fibres textiles synthétiques, etc.) sont absolument partout. Issues à

90% des terres et rejetés en mer via les fleuves et les rivières, leurs concentrations sont maximales à

proximité des villes : autour de 500000 particules par km2 près de Marseille, Naples, Nice... soit la

même den sité que dans l'une des zones les plus polluées de la planète, "le continent de plastique",

Au coeur de l'action

Octobre 2014 : la goélette est en pleine

mission Tara Méditerranée, quelque part entre Barcelone et Tanger. Noan le Bescot prépare le matériel nécessaire au tri du microplastique récolté par le filet Manta lors de la dernière station de prélèvement. C'est dans la boite de Petri que seront disposés les

échantillons de microplastiques.

Crédit : P.Bourgain

Jeff Ghiglione, chercheur au CNRS, procède

au tri d'un échantillon. Il étudie les bactéries et les archées présentes sur les plastiques.

Crédit : N.Pansiot

Le plastique se retrouve le plus souvent sous

la forme de minuscules débris, à peine visibles à l"œil nu.

Crédit : Y.Chavance

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Dossier découverte: la boite de Petri

dans le Pacifique. Les courants marins transportent ensuite ces micro -plastiques partout en Méditerranée... d'où leur présence loin de toute zone habitée.

Informations complémentaires :

Article sur le plastique dans les océans

Communiqué sur l'expédition Tara Méditerranée

Le site de Surfrider foundation

criants.html

En haut à droite : Le prélèvement est disposé dans une boite de pétri pour effectuer un tri.Crédit :

J.Ghiglione

En bas à droite

: Microplastiques collectés à la surface. Certains fragments sont colonisés par des algues en forme d"étoile . Crédit: C.Sardet

A gauche

: Microplastiques. Crédit: C.Sardet

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Dossier découverte: la boite de Petri

Glossaire

Agar-agar : substance gélatineuse utilisée pour cultiver des bactéries. Elle est fabriquée à partir d'une

sorte d'algue rouge qui fournit une surface de croissance idéale pour de nombreuses variétés de

bactéries. Certains agars-agars contiennent des nutriments supplémentaires (comme du sang de mouton) qui favorisent la croissance de bactéries plus vigoureuses.

Archées : microorganismes unicellulaires procaryotes, c'est-à-dire des êtres vivants constitués d'une

cellule unique qui ne comprend ni noyau ni organites, à l'instar des bactéries.

Autoclave : récipient à parois épaisses et à fermeture hermétique conçu pour réaliser sous pression

la stérilisation à la vapeur. Il est aussi utilisé pour certaines réactions industrielles ou la cuisson à la vapeur.

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