[PDF] L’hépatite C vue par le laboratoire

HEPATITE C - Eurofins Biomnis

transplantés rénaux, du fait du risque de transmission nosocomiale du VHC, une surveillance annuelle de la sérologie de VHC doit être réalisée - Chez une femme enceinte anti-VHC positive, une recherche de l’ARN du VHC doit être effectuée pour évaluer le risque de transmission du VHC de la mère à son enfant

L’hépatite C vue par le laboratoire

Non détecté (Cp absent) ARN du VHC non détecté

Par courrier électronique - INSPQ

Dès l’introduction du nouveau test, si l’ARN du VIH-1 n’est pas détecté un résultat de «Non détecté» sera émis tandis que si l’ARN du VIH-1 est détecté, mais est en dessous du seuil de quantification, un résultat «

VHC HSH spécificités - GILAR

Recueil du fluide rectal par écouvillonnage du canal anal 33) ARN VHC détecté dans 47 des prélèvements anaux ARN rectal médian 2,92 loglO UI/ml ARN VHC détecté dans le fluide rectal quand ARN sérique > 5 loglO UI/ml Corrélation entre ARN VHC dans le sang et le fluide rectal (r = 0,689, p < 0,001) 5 2 ARN VHC rectal (log10/ml)

Faut-il adapter à la co-infection les recommandations de l

S12 : ARN du VHC>1000 UI/ml stop télaprévir et PR S24-40 : ARN du VHC détectable stop PR S12 : ARN du VHC>100 UI/ml stop bocéprévir et PR S24 : ARN du VHC détectable stop bocéprévir et PR Patient naïf S4 : ARN du VHC>1000 UI/ml stop télaprévir et PR S12 : ARN du VHC>1000 UI/ml stop télaprévir et PR

Best of Hépatites B & C

• Recueil du fluide rectal par écouvillonnage du canal anal Corrélation entre ARN VHC dans le sang et le fluide rectal (r = 0,689, p < 0,001) AASLD 2015 - D’après Foster AL et al , abstr OP89, actualisé ARN VHC détecté dans 47 des prélèvements anaux ARN rectal médian 2,92 log10 UI/ml

Hépatites virales aigues - facmed-univ-orandz

grande sensibilité et spécificité, les anticorps dirigés contre le VHC L’ARN du VHC est détecté dans le sérum par PCR IV Histoire naturelle Hépatite A L’incubation est courte, de l’ode de 2 à 4 semaines L’hépatite est le plus souvent asymptomatique et bénigne Il existe des formes cholestatiques

HEPATITE C Diagnostic et suivi virologique des patients

18/10/2017 3 C Scholtès oct2017 Dépistage ⇒Ac anti‐VHC (et/ou ARN par PCR) ¾En cas d’Acanti‐VHC négatifs, le résultat du dépistage est l’absence de contact avec le VHC sauf infection

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Donald Murphy

Laboratoire de santé publique du Québec

D 2

Déclaration de la personne ressource

affiliation ou des intérêts financiers ou intérêts de tout ordre avec une société commerciale ou je reçois une rémunération ou des redevances ou

Fonds de recherche

Fonds de recherche

Tests virologiques pour la prise en charge

3

ƒMesure de la charge virale

ƒGénotypage

ƒDétermination génotypique de la résistance aux 4 ƒLa limite de détection est définie comme la concentration supérieure ou égale à 95%.

ƒLa limite de détection du dosage Abbott me

est de 12 UI/ml (procédure de préparation de 0,5 ml).

ƒLa limite inférieure

RealTime

de 12 UI/ml.

Calcul de la limite de

5

UI/ml* Nombre

Détecté

Nombre

25

LD = 12 UI/ml

Quantification des acides nucléiques

6 Cp

Courbe de calibration construite avec

crossing auquel un niveau réactif de 7

Résultat Interprétation

ƒNon détecté (Cp absent)

ƒ<12 UI/ml, détecté

ƒ12 à 100 millions UI/ml

ƒ>100 millions UI/ml

Génotypage effectué par séquençage populationnel 8

UTR 3 C E1 E2 NS2 NS3 NS5A NS5B NS4B UTR 5 NS

4A P

7 3 C E1 E2 NS2 NS3 NS5A NS5B NS4B 5 NS

4A P 7

340 pb 424 pb 196 pb

1er e e

¾Premier choix :

¾Deuxième choix :

¾Troisième virale

Murphy

9

3a BM116062 BM116158

BM116165 3k 3b 4a 4c 4d

4k 4r BM109484 109484C+4r 5a 2c

2k 2a 2b BM115929 1c 1b BM115644

BM116002 BM116059

BM116068 1a BM116144 BM116155

BM115860 BM116100 6a 6b 6e BM116151

6e 6d 6g 6h

0.05 6 1 2 5 4 3 a Caractéristiques des différentes régions utilisées 10

NS5B/CE1

ƒMéthode de référence; permet

le

ƒles génomes

recombinants

ƒModérément

ƒPlus complexe pour le

ƒle

ƒNe

(sauf 6a/6b) du génotype

ƒNe permet pas

génomes

ƒTrès

Répartition des génotypes du VHC au LSPQ

11 59,7%
8,6% 25,6%
3,7%

0,6% 1,6% 0,02%

Génotype 1

Génotype 2

Génotype 3

Génotype 4

Génotype 5

Génotype 6

Génotype 7

Exclus

par deux génotypes et un

Répartition

12 46,4
25,5
12,4 4,2

2,7 1,3

0,9 0,7 0,6

5,3 1a 3a 1b 2b 2a 4a 2c 6e 5a

Répartition des

13

Montréal

50,4
31,2
8,9 4,2

1,2 0,9

3,1 1a 3a 1b 2b 2a 4d 40
22,9
16,2 4,2

2,8 1,9

1,8 1,2 1

8 Antiviraux à action directe (AAD) approuvés et 14

UTR 3 C E1 E2 NS2 NS3 NS5A NS5B NS4B UTR 5 NS

4A P

7 3 C E1 E2 NS2 NS3 NS5A NS5B NS4B 5 NS

4A P 7

Inhibiteurs de la protéase

NS3/NS4A

Inhibiteurs de

NS5A

Inhibiteurs de la

polymérase NS5B

Adapté

Échec thérapeutique et substitutions associées à la 15 ƒLes AAD présentement utilisés pour le traitement de réponse virologique soutenue > 85%. ƒChez certains individus en échec thérapeutique des substitutions ou variantes associées à la résistance

RAVs) ont été observées.

échec

Outils de séquençage pour la recherche de

16 ƒSéquençage de la population (SP) virale (méthode

Sanger)

ƒMéthode de référence utilisée en pratique clinique ƒSensibilité analytique restreinte pour la détection de différentes du même virus)

Outils de séquençage pour la recherche de

17

ƒSéquençage

ƒMéthode essentiellement utilisée en recherche clinique

ƒSéquençage massif de la quasi

ƒSensibilité

de la quasi ƒErreurs de substitutions liées à la technique (PCR +

Exemple de VAR dans la région NS5A du VHC ±

18 1"$G" 2"$G" 3"$G" "$G" 5"$G" "$G" "$G" "$G" "$G"

10"$G"

11"$G"

12"$G"

13"$G"

14"$G"

15"$G"

Y93

Séquençage

19

ƒNos

divers régimes thérapeutiques. abritant au départ des VAR NS5A identifiées par SNG et non traitement ƒLe développement de méthodes standardisées avec des

VAR sur la réponse au traitement.

Positions des mutations les plus communes associées à 20

Antiviraux

Siméprévir *,

Lédipasvir,

L31, Y93

S282

Grazoprévir,

Polymorphisme Q80K de NS3 ±

21
0 20 40
60
80
100
120
140
160
180
200

KQLQ/LQ/R

Nombre

Acide aminé en position 80 de NS3

Détecté

Persistance des substitutions associées à la résistance 22

ƒNS3

une capacité réplicative faible chez une minorité

ƒNS5A

(substitutions détectables chez la majorité des personnes

ƒNS5B

mutations de résistance aux antiviraux (LSPQ) 23

ARN Hépatite C/génotype:

l'interprétation des profils de résistance

Merci de votre attention.

Questions?

24
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