[PDF] FICHE TECHNIQUE : PRINCIPE DE LA CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE



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Chromatographie sur couche mince

chromatographie sur couche mince sont le gel de silice, l’alumine et la cellulose en poudre La plupart des plaques commerciales contiennent un indicateur de fluorescence qui permet la visualisation des taches à la lumière ultraviolette ƒ Technique expérimentale Les principales étapes d’une chromatographie sur couche mince sont :





Analyse des colorants par chromatographie sur couche mince

La Chromatographie sur Couche Mince (C C M) peut être utilisée pour analyser de tels mélanges On se propose de découvrir cette technique en réalisant tout d’abord une CCM de colorants alimentaires Puis, on appliquera cette méthode pour identifier découvrir le (les) colorant(s) présent(s) dans des sirops I Colorants alimentaires



CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE (CCM) INTRODUCTION

La plaque à chromatographie est une plaque d’aluminium sur laquelle a été déposée une mince couche de gel de silice (de couleur blanche) La couche de gel de silice constitue ce que l’on appelle la phase fixe L’éluant (la phase mobile) entraîne, par capillarité, les espèces chimiques contenues dans chaque goutte



Chromatographie analytique sur couche mince et purification d

chromatographie sur couche mince Puis purifier un mélange, en séparant l’alcool et l’ester et en éliminant le colorant alimentaire, à l’aide de la chromatographie sur colonne 2 Principe de la méthode La chromatographie est une méthode de séparation de produits La séparation à lieu en



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2 Chromatographie sur couche mince (CCM) 2 1 Définition et appareillage: La chromatographie sur couche mince (CCM) repose principalement sur des phénomènes d'adsorption : la phase mobile est un solvant ou un mélange de solvants, qui progresse le long d'une phase stationnaire fixée sur une plaque de verre ou sur une feuille semi-rigide



La chromatographie sur couche mince (CCM) Principe et mise en

La chromatographie sur couche mince (CCM) Principe et mise en œuvre C'est une technique qui permet de séparer les constituants d'un mélange pour divers objectifs : 1/ Préparation d’une chromatographie - On prépare la cuve en y mettant l'éluant et en couvrant pour que la cuve conserve les vapeurs de cet éluant (schéma n°1)



FICHE TECHNIQUE : PRINCIPE DE LA CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE

PRINCIPE DE LA CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE (CCM) I Principe Le mélange est fixé sur un support appelé phase stationnaire (un gel de silice déposé en couche mince sur une plaque d'aluminium) Il est entraîné par un solvant approprié ( phase mobile ou éluant ) qui migre par capillarité sur la plaque

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Classe de 2nd Fiche technique :

Chimie chromatographie

FICHE TECHNIQUE :

PRINCIPE DE LA CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE (CCM)

I Principe

Le mélange est fixé sur un support appelé phase stationnaire (un gel de silice déposé en

couche mince sur une plaque d"aluminium). Il est entraîné par un solvant approprié ( phase mobile ou

éluant) qui migre par capillarité sur la plaque. Les constituants du mélange se séparent par migration

différentielle : chacun d"eux est d"autant plus entraîné par l"éluant qu"il est plus soluble dans celui-ci et

moins adsorbé sur la phase stationnaire.

Après migration les taches doivent être révélées ; c"est la détection qui peut se faire soit :

Pulvérisation d"un réactif caractéristique Par immersion dans un bain de permanganate de potassium Par pulvérisation de vapeur de diiode Par observation à la lumière UV si la plaque de silice comporte un indicateur de fluorescence

II Mode opératoire

Les opérations décrites dans ce paragraphe sont valables pour toutes les CCM

1) Préparation de la cuve :

a. L"atmosphère de la cuve doit être saturée en vapeur d"éluant. Ceci impose d"avoir une cuve bien

fermée et préparée un certain temps à l"avance. b. Le niveau de l"éluant au fond de la cuve doit être de 5 à 8 mm.

2) Les Plaques de CCM :

a. La couche d"adsorbant est fragile, éviter de mettre les doigts sur les plaques.

b. Repérer à l"avance l"emplacement où seront effectués les dépôts. Pour cela, tracer un léger trait de

crayon parallèle au bord inférieur de la plaque à une distance de 2 cm.

Les dépôts seront effectués sur cette ligne, à 1cm du bord de la plaque et espacés de 1cm. (voir

schéma).

3) Dépôt du mélange et de l"authentique ( ou des authentiques) :

a. Les solutions avec lesquelles on va réaliser les dépôts doivent être des solutions diluées.

b. Pour effectuer les dépôts, on utilise généralement des tubes capillaires en verre ou des " piques à

apéritif » dont le bout a été écrasé.

c. Il faut déposer la solution pendant une durée très brève afin d"éviter l"étalement du dépôt.

d. Ne pas trop appuyer, pour ne pas détériorer la couche d"adsorbant.

Classe de 2nd Fiche technique :

Chimie chromatographie

4) Elution :

a. Disposer la plaque dans la cuve, le dépôt doit être au-dessus du niveau de l"éluant. (voir schéma)

b. Éviter de déplacer la cuve ou de la faire vibrer pendant l"élution.

c. Quand le front de l"éluant arrive à 1 cm du bord supérieur, retirer doucement la plaque, marquer

au crayon le niveau atteint par le front de l"éluant ( hauteur H ).

d. Sécher la plaque à l"air ou éventuellement au sèche-cheveux pour évaporer entièrement l"éluant.

5) Révélation :

Si les constituants sont colorés, ils sont directement visibles sur la plaque. La révélation aux UV permet de mettre en évidence sous forme de taches sombres des

substances qui absorbent les UV, elle nécessite l"emploi de plaques particulières comportant un

révélateur UV.

Les autres méthodes de révélation sont des méthodes chimiques : on met la plaque en contact

avec un réactif plus ou moins spécifique de certaines fonctions, qui donne un produit coloré par

réaction chimique avec les substances à révéler.( MnO

4- , I2 , etc... )

Mesurer les hauteurs h de migration des différentes tâches et calculer les rapports frontaux Rf = H h. Identifier la (les) substance(s) par rapport au(x) authentique(s).

Schémas :

2 cm

Comment placer les

dépôts

Une méthode simple

pour maintenir la plaque

Bécher

Agitateur

ou stylo

Eluant

Plaque

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