[PDF] Mesure de l’activité enzymatique



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influence of protocol parameters on

100 gm et la fraction inférieure récupérée La méthode de purification consiste en un échange sodique suivi d'une centrifugation, ce qui permet d'éliminer les a impuretés » et de substituer les cations échangeables par l'ion sodium (Van Olphen, 1977 ; Laribi et al 2006) Pour procéder à cette purification, 1 g d'argile est



SYNTHESE ORGANIQUE - AlloSchool

Le choix de la méthode de purification dépend de la nature physique du produit obtenu Pour les produits solides on effectue la purification par la recristallisation et pour les produits liquides on réalise la purification par la distillation fractionnée



Les méthodes disolement et de purification des Cyanophycées

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Choix d’une méthode d’extraction et de purification pour le

Le Cahier des Techniques de l’Inra 2020 (100) Choix d’une méthode d’extraction et de purification pour le dosage des sucres solubles et de l’amidon dans les tissus ligneux de la vigne



TECHNIQUE: Extraction liquide-liquide

L’extraction liquide-liquide est une méthode de purification basée sur la différence de solubilité d’un soluté dans deux phases non miscibles En chimie organique, on utilise habituellement une phase aqueuse et une phase organique Matériel utilisé: • Ampoule à décanter • Bouchon • Support à ampoule • Entonnoir



Purification et désinfection par UV-C - Sylvania

La technologie UV-C est utilisée depuis près de 80 ans pour la purification et la désinfection de l'air, de l'eau et des surfaces Il s'agit d'une méthode éprouvée qui permet de détruire l'ADN ou l'ARN des micro-organismes, d'empêcher leur réplication et de les inactiver efficacement Une meilleure qualité de vie



Mesure de l’activité enzymatique

Le taux de purification = •Cette méthode présente en outre l’avantage de pouvoir vérifier que la vitesse est constante durant la mesure 21



Recristallisation et température de fusion

La recristallisation est une méthode de purification très pratique, qui demande peu d’e fforts, mais parfois de la patience Le rendement n’est jamais parfait, car il reste toujours du produit dissous dans les eaux-mères Une cristallisation de ces eaux-mères peut être tentée après évaporation du solvant



Purification et recréation, Le « Miserere » (Ps 51)

Purification et recréation, Le « Miserere » (Ps 51) Bernard Renaud Résumé L'analyse de la forme et de la structure littéraires n'a pas seulement une valeur formelle Elle permet aussi d'ouvrir des perspectives théologiques La méthode est ici appliquée au Ps 5 1 Il ressort que ce psaume se compose de deux sections



Fiche méthode synthèse organique

Synthétiser des molécules, fabriquer de nouveaux matériaux Fiche méthode 1 Lors d’une synthèse organique, de nombreux paramètres sont à prendre en compte, que ce soit du point de vue chimique (réalisabilité du protocole) ou du point de vue financier (coût de la synthèse)

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enzymatique

DR AKSAS

1

ƒIl

2

Cette mesure consiste à évaluer la

3

L'actiǀitĠ d'une enzyme se mesure

1.d'un

d'apparition d'un

3.d'utilisation d'un

4

Méthodes de mesure

2 Méthode en point final ou " à deux points »

Méthodes cinétiques:

1. 5 Si expérimentales[S]0 et[S]0 la d'enzyme C'est doser d'enzyme 6

Conditions opératoires

et maximale a)0et déterminer contient. b) optimale c) [S]( activateurs 7

Le substrat

Le Pour Pour Il doitMais Un de on exige que S > 10 Km. 8

Température

En , C

SFBC(société

C 9

La durée de la mesure

AE = Vi en [ ] saturante de substrat

10 10

Le Témoin

Dans les méthodes " 2 points »

On Ce que .

Dans les méthodes cinétiques

On 11

Les unités enzymatiques

katalquantité seconde trop-

Launité

internationalequi catalyse minute 60
12

Les unités enzymatiques

Nombre

AEM

Nombre

AS

Elle enzymatique

13

Les unités enzymatiques

ƒLe=

/ Activité enzymatique totale de départ (x

ƒ Le=

spécifique de départ 14 1 manuelle 1. durée, 2.son 3.

Į .15

Méthode en point final ou à " 2 points »

Ladoit

Le lorsque nécessaire

¾soit

¾soit

zone0en

¾soit.

16

Méthode en point final ou à " 2 points »

Faire Ce (Exemple transformer 17

Méthode en point final ou à " 2 points »

Exemple:

LetĮ-;

-30. -Dinitro 18 ALAT

Méthode en point final ou à " 2 points »

C solution 19 2

Consiste de

La spécifiqueUV visible

tempsplus 20

Cinétique enzymatique en Ultra

LeNAD/NADH NADP/NADPH

employé La

UV NAD+/NADHqui

sont Ces Cette 21

Méthodes cinétiques

Dans continu, fixée La réactif) stabilise Elle

Ppermet

22

Cinétique enzymatique en Ultra

NAD considérés(réaction

AH2 + NAD+ A + NADH,H

AH2 + NADP+ A + NADPH,H

[NAD+ ] > 10 NAD 23

Cinétique enzymatique en

NADH NAD+, Si réduction NAD+,la; oxydation deDO. Le

NADPHİ -cm- 24

Cinétique enzymatique en

NADH-cm-

NAD+ 25

AEMesure

de 340nm

AE diminution

de A340nm LDH NADн et NADH2 prĠsentent un pic d'absorbtion ( surtout NAD+) a 260 nm alors on mesure électivement Le NADH2 a 26

A 340 nm ( UV) Si on mesure :

27

Cinétique enzymatique en Ultra Violet

Condition cte

permet Dans tampon à

NADH,H .

Puispyruvate

On La droite 28

Lactate déshydrogénase

(EC 1.1.1.27)

Lactate = substrat

Pyruvate = produit

NAD+/NADH = cofacteur

29

Cinétique enzymatique en

OnDO/min

déclenchée, Les On

T E 3 UI.l-

VTet VE en3

30

Cinétique enzymatique en

DO = İ

DO1 İ 1 1=1 İ

DO2 İ 2 2=2 İ

2-1=DO2 İ DO1 İ

0 31

Cinétique enzymatique en

= x x 6

A 340 nm İNADH,H + = -. cm-.l.

AE en 32
VE VT

Réactions enzymatiques couplées

déshydrogénase à NAD+ ou NADP+ et que ni S et ni P ne possèdent de propriétés spectrales, alors on couple la première R à une deuxième, catalysée par une déshydrogénase dont P est le substrat. S P PH2 33
E1

NADH,H NAD+

Réactions enzymatiques couplées

La 1ere R principale

La 2eme R indicatrice

34

Réactions enzymatiques couplées

Exemple

Acɲ-

AOANADH,H Malate NAD+

35
ASAT

Réactions enzymatiques couplées

A correspond NADH,H . Dans 36

Réactions enzymatiques couplées

AE1 = AE2

Pour 1. pendant en 2. Dans pourV 37

Etude de trois R couplées

on couple la 1ere même couplée à une R indicatrice. S P X XH2 38

NADH,H

NAD+ E1 V2 V1 E2 V3 E3

R principale

R auxiliaire R indicatrice

Etude de trois R couplées

quotesdbs_dbs15.pdfusesText_21