Analyse des colorants par chromatographie sur couche mince
• Réaliser une chromatographie des différents colorants que vous avez à votre disposition sur votre paillasse en suivant les instructions du protocole expérimental • Observer attentivement ce qui se passe dès que l’on plonge le papier dans la cuve • Faire une nouvelle chromatographie si besoin • Rédaction d’un compte-rendu
TP : Chromatographie sur couche mince
TP : Chromatographie sur couche mince On dispose de trois médicaments : le doliprane, l’actron et le claradol classés tous trois dans la catégorie des antalgiques et antipyrétiques On se propose de mettre en évidence certaines espèces chimiques présentes dans ces médicaments DOCUMENTS :
COMPTE-RENDU DE TP DE SPECTROPHOTOMETRIE
COMPTE-RENDU DE TP DE SPECTROPHOTOMETRIE: HPLC chromatographie mais celle qui nous intéresse est la chromatographie liquide haute performance (HPLC)
TP 13 : CCM (Chromatographie sur Couche Mince) 1) Objectif 2
TP 13 : CCM (Chromatographie sur Couche Mince) 1) Objectif Savoir réaliser et interpréter une chromatographie sur couche mince (mélanges colorés et incolores) 2) Principe de la CCM Chromatographie vient du grec « Khrôma » (couleur) et « Graphein » (écrire) Cette technique permet de
Nom : Prénom: n°groupe: TP : Séparation des constituants dun
Compte rendu: Bilan: 1)Rappels sur la chromatographie 1 1)La plaque pour chromatographie est constituée d'une feuille d'aluminium sur laquelle est déposée une couche mince de silice poreuse Cette mince couche constitue la phase stationnaire
COMPTE RENDU DE TP DE BIOCHIMIE EXPERIMENTALE
Tp 6,2 ( en ml) 1,8 - - - 1,6 1,6 1 Pour lire l'absorbance on a eut besoin de faire un blanc ou zéro pour le spectrophotomètre Pour faire le zéro, nous avons préparé un blanc avec: 2,9 ml de Micrococcus + 0,1 ml d'eau distillée Pour préparer la fraction F0 à la lecture d'absorbance, nous avons mis : 2,9 ml de Micrococcus
TP de Techniques Biochimiques - University of Msila
Polycopié de Travaux Pratiques (Chromatographie sur papier / Chromatographie sur colonne / Exposés, Posters, Interrogations, Compte rendu de TP, examen de
Extraction et séparation de la chlorophylle
chromatographie de partage sur colonne On obtient de la chlorophylle pure collée au fond de l'Erlenmeyer • Resolubiliser la chlorophylle dans quelques millilitres de solvant apolaire/solvant polaire 9:1 2 2 Chromatographie sur couche mince (CCM) 1) Principe La chromatographie sur couche mince permet une séparation des pigments dans un but
TP 14 Étude pratique de la photosynthèse
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Nom : Prénom:n°groupe:TP : Séparation des constituants d'un mélange par chromatographieConsignes de sécurité de base:Porter une blouse en coton, pas de nu-piedsPorter des lunettes, des gants (en fonction des espèces chimiques manipulées)Pas de lentilles de contactS'attacher les cheveuxEn cas de doute sur la manière de procéder en manipulant une espèce chimique, demander
au professuer ou se reporter au ''Classeur du laboratoire''.Commentaires :Compétenceexpérimentale:Compte rendu:Bilan:1)Rappels sur la chromatographie1.1)La plaque pour chromatographie est constituée d'une feuille d'aluminium sur laquelle est
déposée une couche mince de silice poreuse. Cette mince couche constitue la phase stationnaire.
La partie inférieure de cette plaque est plongée dans un solvant liquide ou un mélange de solvants
appelé éluant. Le solvant s'élève par capillarité le long de la couche mince : il constitue la phase
mobile. La chromatographie est basée sur la différence d'adsorption des constituants du mélange
sur la phase fixe balayée par l'éluant. Une substance, soluble dans l'éluant, est entraînée le long
de la couche mince, ce phénomène est appelé élution. Plus la solubilité de la substance dans
l'éluant est grande, plus la distance parcourue par elle le long de la couche mince est grande. On
définit pour une espèce chimique donnée, le rapport frontal (Rf) par le rapport de la distance
parcourue par l'espèce chimique (milieu de la tache) sur celle parcourue par l'éluant (front).La chromatographie sur papier est une
chromatographie de partage basée sur ladifférence de solubilité des espèces à séparer.La phase stationnaire et formée par l'eau liée au
molécules de cellulose du papier.La chromatographie sur couche mince et la chromatographie sur colonne sont des chromatographies d'adsorption ; elles sont basées sur la différence d'adsorption sur la phase stationnaire, des espèces à séparer entraînées par l'éluant.1.2)La vitesse de déplacement d'une substance éluée :Une liaison entre deux atomes est polarisée si ces deux atomes sont
différents.Une molécule est polaire si les barycentres de charges positives et négatives ne sont pas confondus. Ainsi la molécule d'eau est polaire etla molécule de tétrachlorométhane ne l'est pas.La vitesse de déplacement d'une substance dépend de ses affinités
électrostatiques avec les molécules qui constituent l'éluant. Ainsi une molécule ayant une forte affinité avec l'éluant se déplacera plus vitequ'une molécule ayant peu d'affinités.1.3)Le rapport frontalLe rapport frontal Rf est une caractéristique d'une espèce
chimique, dans un éluant donné et sur un support donné. Il est défini par : Rf = distanceparcourueparl'espècechimique
distanceparcourueparlefrontdel'éluant= x/y2)Application :3)Manipulation3.1)Préparation du matérielA partir de la lecture du protocole proposé ci-dessous, cocher sur la liste suivante le matériel
nécessaire.becher de 25 mL, 50 mL, 100 mL,ampoule à décanter,verre à pied,pipette et poire à pipeter,pince métallique,burettes de 25 mL, 50 mL,cuve à chromatographie,éprouvettes graduées de 50 mL, 250 mL,erlenmeyer de 100 mL,plaque de silice prédécoupée,pique apéritif,papier filtre,sèche cheveux.sirop de menthe,solution de chlorure de sodiumcolorants alimentaires jaune, vert et bleu patenté,acide éthanoïque pur,fioles jaugées de 50 mL, 100 mL, 500 mL,solution d'ammoniac concentrée,éthanol,solution de chlorure de sodium 30 gL-1.Quelles sont les grandes étapes d'un protocole que vous proposeriez afin de vérifier que les colorants présents dans un sirop de menthe sont bien ceux indiqués sur l'étiquette ci-contre ?
3.2) Extraction du ou des colorants :
Il faut séparer les colorants des autres espèces chimiques qui composent le sirop. Dans unpremier temps on utilise une propriété des molécules qui constituent la laine ; celles-ci fixent les
molécules de certains colorants.Ensuite il faudra séparer les colorants de la laine avant de concentrer la solution en
évaporant l'eau.1)Fixation des colorants.Dans un becher verser 25 mL de sirop et ajouter sous la hotte, 3 gouttes d'acide éthanoïque
pur. (voir fichier "utilisation d'une pipette"). Ajouter les brins de laine et faire bouillir 10 minutes.
(puissance de la plaque aux 2/3 max) Sortir la laine du becher à l'aide de pinces métalliques et
rincer à l'eau chaude.2)Extraction des colorants.Il faut faire dégorger les colorants qui se sont fixés sur la laine. Mettre la laine dans un
becher contenant une solution d'ammoniac (20 mL d'eau et deux gouttes de solution concentréed'ammoniac).Faire bouillir très doucement jusqu'à ce que la solution se colore (ajouter si nécessaire
quelques gouttes de solution d'ammoniac). Retirer la laine à l'aide de pinces et concentrer lasolution par évaporation d'eau sans amener à sec.3.3)Caractérisation des colorants1)Préparation de la cuve à chromatographie.L'éluant à utiliser sera constitué d'un mélange de 5 volumes d'éthanol et de
1 volume d'une solution de chlorure de sodium à 30 g.L-1. Placer l'éluant
dans la cuve (1/2 cm en hauteur) et fermer celle-ci à l'aide de soncouvercle afin de saturer la cuve en vapeurs d'éluant.2)Préparation de la plaque à chromatographie.Attention, en manipulant la plaque, ne pas mettre les doigts sur la silice,
tenir la plaque par la tranche. Tracer un trait au crayon à 1 cm du bas et repérer par des lettres les points de dépôt. (Ne pas appuyer trop fort avec le crayon, pour ne pas enlever la silice). Le trait doit également être suffisement haut pour ne pas que les composés chimiques que l'on veuttester soient immergés dans l'éluant.Déposer sur la plaque, à l'aide d'un pique apéritif, les colorants à tester.
Déposer les colorants du sirop à trois reprises ; pour les autres, un seuldépôt suffit, ils sont plus concentrés.Placer délicatement la plaque, presque verticale, dans l'éluant et remettre
le couvercle.3)Etude du chromatogramme.Quand l'éluant est à environ 1 cm du haut, retirer la plaque et refermer la cuve. Repérer
immédiatement avec un trait de crayon la position atteinte par le front de l'éluant. Sécher la plaque
en l'agitant à l'air ou avec un sèche cheveux .4)Analyse des résultats expérimentaux4.1)Vérification des informations de l'étiquette.Calculerez les rapports frontaux des différentes expèces que vous venez de tester.Les informations de l'étiquette collée sur la bouteille de sirop sont-elles exactes ? Justifiez vos
réponses.4.2)Informations complémentaires sur les colorants utilisés dans l'alimentation.Liste des colorants à usage alimentaire déterminée par une circulaire européenne du 13 décembre 1973.1. matières colorantes pour la coloration dans la masse et en surface.couleurnuméroDénomination usuellecouleurnuméroDénomination usuelleJauneE 100curcuminebleuE 130Bleu antraquinoniqueJauneE 101LactoflavinebleuE 131Bleu patenté VJauneE 102TartrazinebleuE 132IndigotineJauneE 103Chrysoïne SvertE 140ChlorophyllesJauneE 104Jaune de quinoléinevertE 141Complexes cuivriques des
chlorophyllesJauneE 105Jaune solidevertE 142Vert acide brillant BSOrangeE 110Jaune orange SBrun noirE 150CaramelOrangeE 111Orange GGNBrun noirE 151Noir brillant BNRougeE 120Cochenille, acide carminiqueBrun noirE 152Noir 7984RougeE 121Orseille orcéineBrun noirE 153Carbo medicinalis vegetalisRougeE 122AzorubineRougeE 123AmarantediversE 160CaroténoïdesRougeE 124Rouge cochenille AdiversE 161XantophyllesRougeE 125Écarlate GNdiversE 162Rouge de betteraveRougeE 126Rouge ponceau GRdiversE 163anthocyanesRougeE 127érythrosine2. matières colorantes pour la coloration de surface uniquement.numéroDénomination usuellenuméroDénomination usuelleE 170Carbonate de calciumE 173aluminiumE 171Dioxyde de titaneE 174argentE 172Oxydes et hydroxydes de ferE 175or3. matières colorantes pour usage limité.numéroDénomination usuelleE 180Pigment rubis (litho-rubine BK) pour la coloration des croûtes de fromagesE 181Terre d'ombre brûlée pour la coloration des croûtes de fromages4.3)Lien intéressant à visiterHistorique et informations sur les colorants :http://www.ac-nantes.fr:8080/peda/disc/scphy/dochtml/seconde/pigments/html/intro.html
quotesdbs_dbs2.pdfusesText_2