TECHNIQUES: Principes de la chromatographie
Utilité de la chromatographie Selon la quantité de produit appliqué en ch romatographie, on s’en sert pour: • Analyser < 1 mg de produit par CCM, HPLC ou CPV • Séparer ou purifier les produits d’une réaction par chromatographie éclair ou HPLC (50 mg à 15 g) • Doser des produits L’analyse quantitative se fait avec un étalon
Les méthodes séparatives: la chromatographie
1906 : débuts de la chromatographie 1952 : prix Nobel de chimie aux biochimistes A J P Martin et R L M Synge pour leur contribution au développement de la chromatographie moderne Chromatographie = procédé physico-chimique de séparation d’un mélange homogène liquide ou gazeux
1 Principe de la chromatographie
1 Principe de la chromatographie La chromatographie sur papier est bas ee sur la di erence de solubilit e des esp eces a s eparer entre la phase stationnaire (l’eau li ee aux mol ecules de cellulose du papier) et la phase mobile (l’ eluant) La chromatographie sur une plaque plasti ee recouverte d’un gel de silice est une chromatographie
NOTIONS FONDAMENTALES DE CHROMATOGRAPHIE
2 2 Thermodynamique de la chromatographie 2 3 Temps de rétention du soluté 2 4 Facteur de rétention 2 5 Facteur de sélectivité ou de séparation 2 6 Courbe de Gauss 2 7 Résolution des pics 2 8 La théorie des plateaux 2 9 La théorie cinétique 2 10 Exemple d'application Bibliographie
Chromatographie sur couche mince
Introduction La chromatographie d'adsorption est une technique de séparation de composés basée sur la différence d'affinité existant entre ces composés, la phase mobile, qui entraîne les composés, et la phase stationnaire
Chromatographie analytique sur couche mince et purification d
2 Principe de la méthode La chromatographie est une méthode de séparation de produits La séparation à lieu en fonction des affinités qu’ont les différents produit avec les deux phases : mobile et stationnaire La chromatographie sur couche mince (ccm) sert aussi bien à séparer les produits qu’à les identifier Le procédé de la
Chromatographie par filtration sur gel
que du principe de la chromatographie 5- Déduire de la mesure de son V , la masse molaire apparente de la phosphatase alcaline et évaluer lae précision de votre résultat 6- Calculer le Kd pour chacun des composants du mélange chromatogra-phié Exercice d'a pplication Soit une colonne de gel G 75 5 009— poids moléculaire 70 000 V
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Analyse d'un produit par C.C.M
Chromatographie sur Couche Mince
nécessaire à C.C.M La chromatographie est une technique de séparation sur leurs affinités respectives pour une phase stationnaire et une phase mobile. Il existe de nombreux types de chromatographies, selon la nature des phases en présence : chromatographie de partage liquide/liquide (par exemple sur papier Whatman ayant chromatographie sur couche mince (CCM) ; chromatographie en phase vapeur (CPV) ; chromatographie sur colonne ;La chromatographie peut avoir :
un but préparatif, notamment pour purifier un produit de ses impuretés ; un but analytique : la séparation d étape pour déterminer la composition de ce mélange.La Chromatographie sur Couche Mince (CCM
faciles à mettre en oeuvre. Elle est utilisée en général dans un but analytique qualitatif.