TD : clonage/ADN recombinant - Institut national de la
Les stratégies de clonage: 1 Sélectionner les clones recombinants Insertion dans la partie LacZa de l’opéron lactose Le 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-b-D galactoside (X-Gal) est clivé par la β-galactosidase pour donner une substance bleue insoluble et en présence d’IPTG (colonies bleues) Si on introduit un ADN étranger dans le
L’isolement et la manipulation de gènes
2- Les vecteurs viraux: Offrent de nombreux avantages pour le clonage et les applications des gènes clonés qui en découlent Comme l’efficacité d’infection des virus est élevé, le gène cloné peut être introduit dans une cellule à une fréquence élevée Servent à cloner des fragments de tailles définies 3- Les cosmides
LE CLONAGE DE SAINTPAULIA PAR CULTURE IN VITRO
Les racines d’oignon ont été mises en germination 4 à 5 jours avant la séance de travaux pratiques Lorsque les racines ont 1,5 cm de long, nous les coupons à 1 cm de la pointe, puis nous les séchons et nous les mettons dans le fixateur (15 ml d’éthanol absolu + 5 ml d’acide éthanoïque glacial)
Clonage dans un plasmide (pUC) Réplication indépendante de
Clonage dans un plasmide (pUC) • Site multiple de clonage au niveau d'une portion du gène de la β-galacto-sidase E coli (LacZ') • Sélection des bactéries transformées (plasmide avec ou sans insert): ampR • Sélection des bactéries transformées (plasmide avec insert): crible blanc/bleu en présence d'IPTG et de X-gal
Partie I : Restitution des connaissances (5points)
document 1 représente les étapes de ce clonage Document 1 1- Analyser les étapes du clonage de la brebis Dolly (1pt) - Déduire le rôle du noyau (1pt) Donnée 2 : la mesure de la quantité d'ADN présente dans le noyau d'une cellule au cours du temps, durant deux cycles cellulaires a permet d’obtenir le graphique de document 2
CULTURE CELLULAIRE - Ressources Pédagogiques de l
c : les diffÉrents systÈmes de culture d : notions sur les cultures primaires, secondaires, de lignÉes et de clones e : methode de clonage cellulaire 1 : les besoins nutritifs 2 : les besoins en sÉrum 3 : les besoins cellulaires physiologiques 4 : le matÉriel nÉcessaire 1 : les cultures primaires 2 : les cultures secondaires
Produire une protéine recombinante Principes et Méthodes de
Clonage d’un gène Vecteurs de clonage T4 DNA Ligase : lie de façon covalente les extrémités 5’ et 3’ de deux brins d’ADN lorsqu’elles sont complémentaires Capable de réplication autonome dans une cellule hôte donnée (origine de réplication de type procaryotique et / ou eucaryotique)
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