Extraction d’ADN, PCR et séquençage de l’ADN
Extraction d’ADN, PCR et séquençage de l’ADN I Extraction d’ADN 1 Introduction Toute étude de génétique moléculaire implique la disposition d'échantillon d'acides nucléiques Les techniques d'extraction d'acides nucléiques sont relativement simples Il convient simplement d'éviter toute destruction enzymatique ou mécanique
OUTILS DE BIOLOGIE MOLECULAIRE : EXTRACTION DE LADN, PCR
B Le séquençage de l’ADN: La méthode de Sanger, de terminaison des chaînes par un didésoxy: Consiste à obtenir des copies de la moléule d’ADN dont on veut o tenir la séquen e en utilisant une ADN polymérase On prépare 4 milieux réactionnels pour le séquençage dont haun ontient : l’ADN matrie sous forme simple rin, de l’ADN
ACTIVITE N°4 : EXTRACTION DADN
2 Le filtrat obtenu à l’issue de l’étape 3 contient des molécules d’ADN Cet ADN forme la « méduse » après addition d’alcool dans le filtrat Réponds, en argumentant, aux questions suivantes : a) L’ADN est-il soluble ou insoluble dans l’eau salée ? b) L’ADN est-il soluble ou insoluble dans l’alcool ? 3
DNA Extraction from Kiwifruit
6 extraction solution (1 tube of 20 mls per student pair) 7 kiwifruit (cut into 12 pieces, each student pair needs 6 pieces) 8 cold 95 ethanol or isopropanol (2-3 mls per student) 9 small test tubes (1 per student) Extraction solution recipe: For one liter of the extraction solution, mix 100 ml of shampoo (eg Suave Daily Clarifying Shampoo,
Notice dutilisation
Kit d'extraction d'ADN oCheck® - Instructions d'utilisation Révision 00 / Février 2011 5 1 COMPOSITION DU KIT Kit d'extraction d'ADN oCheck® Nom Préparation en colonne unitaire (réf 515 040) Préparation en barrettes de 8 colonnes (réf 515 050) Tampon L1 20 ml 20 ml Tampon L2 12 ml 24 ml Réactif L3 3 ml 6 ml Tampon W1 30 ml 75 ml
Evaluation du système d’extraction d’ADN automatisée Tecan
Le rendement d’extraction avec la chimie Reliaprep™ est satisfaisant, inférieur de 10 en moyenne (28 µg d’ADN/mL de sang) par rapport aux extractions sur colonnes (31 µg d’ADN/mL de sang) Rappelons que le protocole d’extraction automatisée utilisé comporte un lavage supplémentaire, pour que la technologie soit compatible avec nos
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