[PDF] 1-A – EXPRESSION STABILITE ET VARIATION DU PATRIMOINE

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1-A EXPRESSION, STABILITE ET VARIATION DU PATRIMOINE GENETIQUE

TP 3 & 4 : EXEMPLE DES UV

Mise en situation et recherche à mener

Les processus de réplication et de mitose permettent en principe de conserver une les cancers sont des maladies dues à une accumulation de mutations (appelés agents mutagènesosition aux UV.

Ressources

Document 1a : Principe de la mise en culture en conditions stériles On peut mettre en culture des micro-organismes dans un laboratoire et étudier leurs conditions de multiplication. Pour cela, on peut utiliser des boîtes de souhaite observer. Cette mise en culture permet la multiplication de ces micro- organismes. Elle est réalisée en zone stérile afin de ne pas contaminer la de la manipulation.

Document 1b : Le cas des levures

Les levures sont des champignons

unicellulaires, susceptibles de former des colonies. Chaque colonie est issue des divisions cellulaires levure et de ses descendants.

Document 2 : Particularités des levures ade2-

Le gène ade2 intervient normalement dans le processus de L'adénine est une molécule incolore, laissant à la levure sa couleur naturelle, blanche.

Les levures ade2- ade2- du gène ade2. Cet

Plusieurs types de mutations peuvent entraîner la perte de la couleur rouge des levures ade2- et leur redonner une couleur blanche : - Une nouvelle mutation du gène ade2 peut rétablir sa fonction initiale ; du pigment rouge. Etape 1 : Concevoir une stratégie pour résoudre une situation problème (en AP) Proposer une stratégie de résolution réaliste, permettant de

, (1) en réalisant une culture de levures en milieu solide (boîte de Pétri) et (2) en traitant des séquences nucléotidiques.

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TP 3 & 4 : EXEMPLE DES UV

Etape 2 : (Séance 1 & 2)

ci-dessous pour (1) Mise en culture de levures en milieu solide (2) Traitement des séquences nucléotidiques Consigne : En suivant la fiche protocole sous plastique, réalisez une mise en culture de levures en conditions stériles de sécurité), puis, une semaine plus tard, un comptage des colonies rouges et des colonies blanches.

Matériel :

- Suspension de levures rouges ade2- - 5 boîtes de Pétri avec milieu nutritif (1 par binôme) - étaleur, pipette, bec électrique, eau de Javel - Fiche protocole Consigne : A l'aide du logiciel Anagène et sa fiche technique, ouvrir le fichier " ade2.edi » pour comparer les séquences nucléotidiques du gène Ade2 pour les colonies rouges (allèle 1) et blanches (allèle 2).

Matériel :

- Fichier contenant les séquences nucléotidiques du gène ade2 chez colonie blanche (allèle 2) - Logiciel de traitement de séquences et sa fiche technique Etape 3 : Présenter les résultats pour les communiquer (Séance 2)

1) Renseignez le tableau " Effets des UV sur les levures.ods » avec les résultats obtenus lors du comptage des colonies. Sous la forme de votre

choix, présentez et traitez ires à la résolution du problème.

2) Sous la forme de votre choix, présentez et traitez les données issues de la comparaison des séquences nucléotidiques sur Anagène pour qu'elles

apportent les informations nécessaires à la résolution du problème. Etape 4 : Exploiter les résultats obtenus pour répondre au problème (Séance 2)

Exploiter les résultats pour

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TP 3 & 4 : EXEMPLE DES UV

FICHE PROTOCOLE SEANCE 1

Avant de commencer, respectez les conditions suivantes : - Vous portez une blouse et des chaussures fermées. - Si vous avez les cheveux longs, vous les avez attachés. - Lavez-vous très soigneusement laissez-les sécher - Nettoyez le plan de travail

- Allumez le bec électrique et laissez-le chauffer plusieurs minutes (Attention à ne pas se brûler !).

Si vous oubliez une étape,

voici ce que vous risquez : A Ensemencement des levures dans une boîte de Pétri contenant un milieu nutritif solide Dans la zone de stérilité créée autour du bec électrique :

1) Secouez le tube contenant les levures (elles ont tendance à se déposer au fond).

2) Avec une pipette stérile, déposez 2 gouttes de suspension de levures à mettre en culture au centre de la boîte.

3) étaleur stérile, les répartir délicatement sur toute la surface de la gélose (sans la labourer !).

4) Marquez le nom des membres du binôme au feutre indélébile et le sous votre boîte (et pas sur le couvercle, qui se retire !)

B Irradiation des levures

Attention : provoquer la mutation des levures, sont aussi dangereux pour vous : ne pas regarder la lampe,

ni mettre ses mains à proximité lorsque la lampe est allumée.

1) Placez les boîtes de Pétri sans leur couvercle (0, 15, 30, 60 ou 120 secondes).

2) à température ambiante pendant 1 semaine puis 3 jours au réfrigérateur.

Sécurité (logo et signification)

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