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RÉALISATION DU TEST ELISA. L'utilisation d'anticorps pour le diagnostic des maladies bactériennes et virales représente une méthode spécifique et rapide.

Correction TP Elisa 23

LE TEST ELISA

détecter et de doser la anti-VIH dans le sérum (sang sans les cellules sanguines) anticorps spécifiques de ces molécules. Il s'agit d'une réaction immuno-enzymatique qui fait apparaître une coloration si le sérum testé contient des anticorps anti-VIH (voir document 2) : on dit alors que le sujet est séropositif. Dans la pratique, on utilise des plaques à concavités au fond desquelles sont fixés des antigènes viraux qui sont : - soit des protéines virales obtenues par lyse des deux types de virus VIH-1 et VIH-2 - soit des protéines recombinantes ou des peptides de synthèse.

Un sérum de patient contaminé contient des anticorps spécifiques dirigés contre une protéine du VIH (anticorps anti-

VIH = Ac1).

éalablement

fixé au fond du puits.

Pour révéler les Ac1, on utilise des anti-anticorps = Ac2 spécifiques des anticorps Ac1 ; dans le protocole du test

ELISA, ils sont fixés à une enzyme E : la peroxydase. Cette enzyme catalyse une réaction colorée en prése

plus la solution sera colorée.

1/Ce que je fais :

Comment je fais :Je fais le test Elisa. Je détermine ainsi la concentration en anticorps présent

dans le sérum testé que je compare avec la valeur seuil en dessous de laquelle lindividu ne serait

plus immunisé. :au dessus de la valeur seuil indiquée par la gamme étalon, alors lindividu est encore immunisé forte concentration en Ac a de rappel. ndividu testé. les anticorps Remarque : Ce schéma est un exemple pour le VIH , Lors du Tp vous aviez le choix de représenter ou non des anticorps pour lindividu immunisé mais en quantité très faible.

6/Ce que je vois :

C6

Ce que je sais : Puisque le seuil au-delà duquel un individu est considéré comme immunisé est

celui de la concentration C5, conclue que immunisé et ne doit pas se faire revacciner. et doit se refaire vacciner.quotesdbs_dbs11.pdfusesText_17
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