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RÉALISATION DU TEST ELISA. L'utilisation d'anticorps pour le diagnostic des maladies bactériennes et virales représente une méthode spécifique et rapide.
SVT - 1 SP
Activité C19_1
Vaccination et dosage des anticorps circulants
CORRIGÉ
Mise en situation et objectifs
Code barèmeLors d'un second contact avec un antigène donné, la réponse immunitaire est plus rapide et plus
importante. Elle fait intervenir la mémoire immunitaire. Ce phénomène est à la base du principe
de vaccination. Après une vaccination, l'organisme réagit par la production d'anticorps dirigés
contre l'antigène injecté. Monsieur X a été vacciné dernièrement contre le tétanos mais il ne sait
plus quand. Il se prépare à partir en voyage dans un payse où les infrastructures sanitaires sont
insuffisantes et il s'inquiète de savoir s'il est toujours protégé contre cette maladie. Son médecin
lui propose de faire un dosage d' anticorps anti-tétaniques. Les anticorps peuvent être dosés
dans le sérum à l'aide d'un test ELISA. Il s'agissait de déterminer à l'aide du test ELISA si Mr X
doit être de nouveau vacciné ou non .Démarche expérimentale
• La démarche consiste à déterminer la concentration d'anticorps de M. X à l'aide d'un test.
• Il faut donc étalonner le test à l'aide de différentes solutions d'anticorps de concentration
connues, puis réaliser le test sur le sérum de M. X et comparer le résultat de M. X à la gamme de référence pour déterminer la concentration des anticorps anti-tétaniques de M. X.• Si la consentration des anticorps anti-tétaniques de M. X est supérieure à la concentration
de réf érence (concentration permettant une réponse ada ptative efficace contre letétanos), al ors M. X n'a pas besoi n d'être de nouveau vacciné ; si non, il devra être
vacciné.Présentation des résultats
Exemple de présentation des résultats du test ELISAPuits 1 : témoin sans anticorps Ac1
Puits 2 à 4 : gamme de référence avec les solutions d'anticorps Ac1 de concentrations connues :
puits 2 : concentration C6 = 0,53 mg.ml -1 puits 3 : concentration C5 = 1,06 mg.ml -1 (concentration minimale efficace contre le tétanos) puits 4 : concentration C4 = 2,12 mg.ml -1Puits 5 : sérum de Monsieur X
Exploitation des résultats
• Nous voyons que dans le puits correspondant au sérum de M.X la coloration du substrat est très nette mais inférieure à celle du puits 2. • Nous en déduisons que la concentration des anticorps anti-tétaniques dans le sang de Monsieur X est inférieure à la concentration C6 = 0,53 mg.ml -1 . Elle est donc égalementSVT - 1 SP
Activité C19_1
Vaccination et dosage des anticorps circulants
CORRIGÉ
inférieure à la concentration de référence C5, concentration minimale efficace contre le tétanos. • Monsieur X devra donc être de nouveau vacciné. • La vaccinat ion de Monsieur X provoquera une réponse secondaire contre l'agent du tétanos ; cette réponse plus rapide et plus intense que la réponse primaire lui permettra d'augmenter la concentration de ses anticorps anti tétaniques et d'être protégé contr e cette maladie (immunité protectrice) durant son voyage. Au bout de 2 à 3 semaines enl'absence de l'antigène, la concentration de ces anticorps finira par décroître jusqu'à un
éventuel nouveau contact avec l'antigène.
réponse primaire : pre mière réponse adaptative développée contre un a gent pathogène
donné.réponse secondaire : réponse adaptative développée contre un agent pathogène donné qui a
déjà donné lieu à une réponse primaire. Complément : schéma expliquant le fonctionnement du test ELISA• Dans le test ELISA, la production du substrat coloré (ici, bleu) n'a lieu que si l'enzyme E a
été retenue au fond du puits malgré les étapes de lavage. Cela implique que l'anticorpsAc2 sur le quel l'enzy me est fixée ait lui-même été r etenu par la partie Fc d'un autr e
anticorps Ac1. Or, l e test est conçu de t elle manière que seuls l es anticorps A c1spécifiques de l'antigène étudié (ici, tétanique) sont retenus au fond du puits malgré les
étapes de lavage.
• Donc la coloration n'apparaît que dans les puits correspondant à des " solutions Ac1 »
contenant des anticorps anti-tétaniques.• Plus la concentration de ces anticorps est élevée, plus la quantité d'enzymes retenus sera
grande et plus la coloration sera intense, c'est ce qui permet le dosage des anticorps Ac1.quotesdbs_dbs50.pdfusesText_50[PDF] dosage d'oxydoréduction compte rendu
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