[PDF] Travaux pratiques de Biologie moléculaires (Extraction de lADN)





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Extraction de lADN dune banane & observation de noyaux de

Il est possible d'extraire de l'ADN à partir d'aliments divers tels que par exemple les petits pois les bananes ou bien encore les œufs de poisson.



Partie I-Chapitre I : Nature et transmissions de linformation génétique

Extraction de l'ADN de la banane /10. 1 compte-rendu pour 2 (40min). 1°) Désorganisation des tissus et des cellules. • Placez ¼ de banane dans un mortier 



Extraction ADN de la banane

Extraction ADN de la banane. Matériel nécessaire (à vérifier si tout est disponible 1/ Une moitié de banane est suffisante pour réussir l'expérience.



CONGRÈS

Extraction et visualisation de l'ADN de pomme Compte rendu : 2-Décrire l'aspect final de l'ADN extrait. ... Protocole extraction de l'ADN d'un kiwi.



Franciaoktatas.eu

Extraire l'ADN contenu dans des cellules Résumé : Cette expérience permet aux jeunes de pouvoir observer à l'œil nu un ... a) Obtenir la pulpe de banane.



Travaux pratiques de Biologie moléculaires (Extraction de lADN)

Réalisation du compte rendu en cas d'observation microscopique de l'ADN objectif est d'utiliser une technique simple pour isoler l'ADN d'une banane.



Diapositive 1

Document 3 : Protocole d'extraction de l'ADN de banane Musa paradisiaca. Extraire de documents des informations utiles. ... Réaliser un compte-rendu.



EXTRACTION DE LADN

Un protocole permettant d'extraire l'ADN à partir d'oignons de bananes



Extraction & observation dADN

Il est donc possible d'extraire de l'ADN à partir d'aliments divers faciles à trouver



Extraction de la fraction dADN libre de nucléosomes

https://hal.archives-ouvertes.fr/hal-01601509/document



Extraction de l’ADN d’une banane & observation de noyaux de

1 Procédure d’extraction • Éplucher la banane et la couper en petit morceaux Hacher et mélanger la banane permet de briser et déchiqueter les tissus de l’oignon afin de faciliter les étapes ultérieures • Mettre les morceaux de banane dans un bécher • Ajouter de l’eau distillée dans le bécher jusqu’au trait de 100 mL



Physique amusante - Extraction de l'ADN d'une banane - Astrosurf

Extraction ADN de la banane Matériel nécessaire (à vérifier si tout est disponible avant de commencer les manipulations) - De la banane - De l'alcool denaturé dans un tube à essai - Du liquide vaisselle - Du sel - De l'eau - Des filtres à café et n entonnoir - Un mortier - Un pilon



Extraction de l ADN d une banane & observation de noyaux de

Procédure d’extraction de l’ADN de banane • Éplucher la banane et la couper en petit morceaux • Mettre les morceaux de banane dans un bécher • Ajouteu de l’eau ditillée dan le béche juvtu’au tait de 100 ml • Ajouter le sel (une pointe de cuillère ~3g)

Comment extraire l'ADN d'une banane ?

Extraction de l'ADN d'une banane. Doc Funsci. 1/2 éprouvette de purée de banane, 1 cueillère à café de jus d'ananas Quelques gouttes de savon liquide de vaisselle, 10 cc d'alcool à brûler (ou de l'alcool à 90°) 1 mixer, 2 éprouvettes, une passoire. Vous pouvez éventuellement doubler les quantités de réactifs pour accélérer la réaction.

Comment extrait-on l'ADN d'une banane ?

Vous allez extraire de L’ADN de cellules de banane, il est comparable à celui présent dans les cellules humaines. Alcool à brûler (dans une tube de préférence). Dans une assiette, broyer la moitié d’une banane avec une fourchette afin de casser les fibre.

Comment préparer l'ADN d'une bactérie?

méthode permet de préparer sélectivement l'ADN des plasmides contenus dans les bactéries, tout en éliminant l'ADN du chromosome bactérien. Le principe de cette méthode consiste à effectuer la lyse des cellules au moyen d'un détergent SDS (dodécyl sulfate de sodium) en présence de soude à pH 13.

Comment purifier l'ADN de la banane ?

Ajouter 2-3 gouttes de savon liquide de vaisselle. Il va servir à dissoudre la matière grasse contenue dans la membrane cellulaire et diluer son contenu 4°. Versez une cuillère à café de jus d'ananas sur la préparation. Le contact des enzymes va détruire les protéines de la banane et purifier l'ADN.

Travaux pratiques de Biologie moléculaires (Extraction de lADN)

Royaume du Maroc

Université Sultan Moulay Slimane

Faculté Polydisciplinaire

Khouribga

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Important:

¾ Respecter son groupe de TP pour ne pas perturber le déroulement des séances ;

¾ Porter obligatoirement une blouse blanche ;

¾ Nettoyer sa paillasse à la fin de chaque séance.

9 Se munir de matériel de dessin : feuilles de dessin blanches non quadrillées format A4,

crayon graphite HB, compat, gomme, taille-crayon, règle... 9 ¾ Les comptes rendus doivent être réalisés entièrement au crayon ;

¾ Sur chaque feuille doit être figurée ce qui figure sur la feuille modèle ; (Voir le modèle)

¾ Ne jamais dessiner recto-verso ;

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But de la séance de TP

P L'extraction de l'ADN est une technique permettant d'isoler l'ADN de cellules ou de tissus. L'ADN

ainsi extrait peut ensuite être utilisé pour des recherches de biologie moléculaire, telles que le

séquençage, la PCR ou le clonage. Il existe différents protocoles pour extraire l'ADN, qui suivent

approximativement le même schéma de principe :

¾ Lyse des cellules

¾ Elimination des protéines

¾ Elimination des autres acides nucléiques (ARN, etc.) ¾ Concentration de l'ADN par précipitation à l'alcool

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Importance du tampon d'extraction:

¾ Tris-HCl 100 mM (pH 8.0)

L'un des moyens pour détacher (solubiliser) les histones (protéines à pI (Point isoélectrique) très

basique, chargées (+) dans un milieu relativement acide par rapport à leur pI) de l'ADN (chargé

négativement) est l'augmentation du pH du tampon d'extraction pour faire acquérir une charge

similaire à celle de l'ADN. Ceci crée une répulsion entre les deux types de molécules. Aussi, le

pH basique limite l'action des DNases qui peuvent endommager l'ADN.

¾ NaCl 1,4 M

L'utilisation de concentrations élevées en sel dans l'extraction de l'ADN a pour rôle d'affaiblir la

liaison entre l'ADN et les molécules chargées positivement (compétition vis à vis de l'eau)

¾ EDTA 20 mM

complexation des ions divalents comme Mg++, nécessaires pour l'activité des Dnases.

¾ Les détergents

Les détergents fragilisent le lien entre l'ADN et les protéines:

9 SDS (Sodium dodecyl sulfate): détergent anionique charge les protéines négativement et

crée une répulsion avec l'ADN chargé négativement.

9 CTAB (Cetyl trimethylammonium bromide): détergent cationique utilisé dans l'extraction de

l'ADN des plantes, détruit les structures lipidiques membranaires et fixes les polysaccharides et polyphénols.

¾ Mélange chloroforme-alcool isoamylique

Sépare les acides nucléiques des autres composants solubles dans les solvants organiques

¾ L'isopropanol

Mobilise toutes les molécules d'eau laissant l'ADN précipiter. Remarque: L'ADN peut être aussi précipité par l'éthanol

Notre expérience

Notre expérience ne nécessite

aucun appareillage particulier et peut être effectuée à l'aide de produits achetés en grandes surfaces.

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Remarque:

nucléases.

Matériels :

¾ bananes (ou autre)

¾ récipient (Assiette, gobelet, tubes...)

¾ filtre à café

¾ sel de cuisine

¾ liquide vaisselle

¾ H2O

¾ alcool à bruler

1) Purée de banane

Écraser la moitié de la banane avec une fourchette dans un récipient Cette étape permet de décomposer les tissus et de fragiliser les parois cellulaires.

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2) Lyse des cellules

¾ Ajouter:

9 1 cuillère à café de sel de cuisine,

9 1 cuillère à soupe de liquide vaisselle,

9 20.

ƒ L'utilisation de concentrations élevées en sel a pour rôle d'affaiblir la liaison entre l'ADN et

ompétition des ions vis à vis de l'eau. ainsi libéré. leur conférant une charge (-)

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3) Elimination des débris

¾ Passer le mélange à travers un filtre à café.

¾ Récupérer le filtrat.

¾ Refiltrer une deuxième fois à travers un nouveau filtre à café.

¾ Récupérer le filtrat.

La filtration permet de retenir les débris cellulaires et les morceaux de tissus non décomposés.

¾ Prélever 3 mL de filtrat et les transférer dans un tube 12 ou 15 mL. ¾ En inclinant le tube, ajouter délicatement 8 mL

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¾ -dessus du filtrat. Ne pas secouer le tube.

¾ une "pelote", qui remonte lentement à la

surface. ¾ -dent il est possible de prélever la pelote et de se rendre compte de

L'alcool permet aux molécules d'ADN de se rassembler en pelotes car l'ADN ne peut pas se

dissoudre dans l'alcool.

Extraction de son propre ADN

Protocole:

1) Obtention de cellules de l'épithélium buccal

9 Se frotter les joues contre les dents, mordiller ses joues pendant 1 minute. Ne pas avaler.

9 Prendre environ 10 mL d'H2O salée (1 cuillère à soupe de sel de cuisine dans 1 demi-litre

9 Recracher le liquide dans un récipient

2) Lyse des cellules

9 Ajouter 5 à 10 gouttes de liquide vaisselle et remuer délicatement.

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3) Précipitation et visualisation de l'ADN

9 Ajouter délicatement 12 mL

9 Votre ADN précipite.

9 Vous pouvez récupérer l'ADN avec un cure-dent ou une micropipette et les transférer dans

un tube contenant de l'alcool pour le conserver.quotesdbs_dbs30.pdfusesText_36
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