[PDF] Cellules normales du sang et de la moelle rouge des os

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Hématologie

Cellules normales du sang

et de la moelle rouge des os

Livret 1 d'activités technologiques

Chantal Muller (Professeur - Lycée La Martinière Duchère - LYON )

Remerciements

Mes remerciements vont à tous ceux qui ont permis la réalisation de cet ouvrage, en particulier mes

collègues, professeurs au lycée La Martinière Duchère de Lyon avec qui j'ai travaillé avec beaucoup

de plaisir en hématologie : Marie Claude Peyrot, qui m'a énormément aidé à débuter cet enseignement,

Caroline Platroz et Stéphanie Darmochod, qui

m'ont aidé efficacement à améliorer ces fiches techniques et qui ont relu l'ensemble des livrets. Un remerciement particulier à Christiane Robin, technicienne de laboratoire au lycée La Martinière Duchère de Lyon, qui a contribué avec compétence et gentillesse à la mise au point de techniques. Un remerciement aussi aux biologistes du laboratoire d'hématologie du Centre de Biologie Nord de Lyon, ainsi qu'à Madame Bizeul, technicienne cytologiste.

Des remerciements également pour Gilles et Sangeetha Muller qui m'ont aidé pour la mise en page.

La majorité des photographies des cellules sanguines et médullaires présentes dans les livrets 1 et 2

ont été reproduites avec l'aimable autorisation des responsables du site http://med2.univ-angers.fr .

2CM © B1ABM

Module 1 - Cytologie sanguine et médullaireActivités technologiques

Avant-propos

Ce livret 1 d'activités technologiques s'adresse aux étudiants de première année de section de

technicien supérieur d'analyses de biologie médicale (B1ABM).

Il correspond au module 1 des activités technologiques d'hématologie du référentiel 2008 du brevet de

technicien supérieur d'analyses de biologie médicale.

Ce livret 1 fait partie de quatre livrets relatifs aux enseignements technologiques d'hématologie de la

section technicien supérieur d'analyses de biologie médicale. Livret 1 - Cellules normales du sang et de la moelle rouge des os

Livret 2 - Hémopathies

Livret 3 - Hémostase

Livret 4 - Immuno-hématologie

AOÛTAOÛT 2015 2015

B1ABM CM ©3

SommaireSommaire

PréambulesPréambules

Risques biologiques et prévention au laboratoire d'hématologie et immunologie ..................................

Utilisation du microscope..............................................................................................................................5

12 Chapitre 1 - HémogrammeChapitre 1 - Hémogramme

Hémogramme méthodes manuelles

Fiche technique 1 - Hématocrite...........................................................................................

Fiche technique 2 - Matériel pour numération manuelle des cellules..................................

Fiche technique 3 - Numération des hématies.....................................................................

Fiche technique 4 - Dosage de l'hémoglobine.....................................................................

Fiche technique 5 - Indices érythrocytaires.........................................................................

Fiche technique 6 - Numération des leucocytes..................................................................

Fiche technique 7 - Frottis sanguin et coloration.................................................................

Fiche technique 8 - Étude du frottis sanguin coloré............................................................

Fiche technique 9 - Morphologie des leucocytes.................................................................

Fiche technique 10 - Interprétation de la formule leucocytaire...........................................

Fiche technique 11 - Numération des plaquettes.................................................................

Fiche technique 12 - Anomalies érythrocytaires..................................................................

Fiche technique 13 - Interprétation d'hémogrammes...........................................................

Examens complémentaires à l'hémogramme

Fiche technique 1 - Vitesse de sédimentation......................................................................

Fiche technique 2 - Numération des réticulocytes...............................................................

Hémogramme automatisé

Fiche technique 1 - Principes et résultats.............................................................................

Fiche technique 2 - Pièges d'interprétation..........................................................................

Fiche technique 3 - Analyses de résultats d'automates cellulaires.......................................19

23
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Chapitre 2 - MyélogrammeChapitre 2 - Myélogramme

Introduction - Généralités.......................................................................................................................

Fiche technique 1 - Étude cytologique d'un frottis médullaire.............................................

Fiche technique 2 - Lignée érythoblastique - les précurseurs..............................................

Fiche technique 3 - Lignée granuleuse neutrophile - les précurseurs..................................

Fiche technique 4 - Lignée granuleuse éosinophiles et basophiles - les précurseurs...........

Fiche technique 5 - Lignée mégacaryocytaire - les précurseurs..........................................

Fiche technique 6 - Myélogramme et compte rendu............................................................

Annexe : Schéma de l'hématopoïèse...............................................................................................121

125
127
131
135
139
143
146

4CM © B1ABM

Module 1 - Cytologie sanguine et médullaireActivités technologiques - Préambules -- Préambules - isques biologiques et prévention au laboratoireisques biologiques et prévention au laboratoire d'hématologie et d'immunologied'hématologie et d'immunologieRR Le risque zéro n'existe pas, par conséquent tout le personnel de laboratoire doit savoir:

Hrepérer un risque

Hl'évaluer

Hle prévenir

Hintervenir et réparer en cas d'accident.

1 - 1 - Identification du risque infectieux Identification du risque infectieux

1.1 - 1.1 - Agents infectieux transmissibles à l'homme par le sang ou les dérivésAgents infectieux transmissibles à l'homme par le sang ou les dérivés

sanguins provenant de personnes contaminées.sanguins provenant de personnes contaminées.  Les agents infectieux majeurs sont des virus: virus des hépatites, principalement B (VHB) et C (VHC) virus de l'immunodéficience humaine (VIH)

VIHVHBVHC

Prévention vaccinalenonouinon

Prévalence de l'infection en France

(2005)= nombre de personnes contaminées 110 000300 000700 à 800 000

Concentration virale (virions /mL) de

sang chez une personne contaminée101 à103106 à1010?

Taux de transmission

- par voie transcutanée - par projection cutanéomuqueuse0,3 %

0,04 % 6 à 40 %2 à 4%

Sources : INRS / GERES

B1ABM CM ©5RISQUES BIOLOGIQUES

Risques biologiques et prévention

 D'autres agents biologiques peuvent aussi être dangereux : -bactéries, -parasites sanguins, -champignons, -Agents à Transmission Non Conventionnelle (ATNC) ou prions. Ce sont des protéines

infectieuses très résistantes aux procédés d'inactivation habituels (chaleur sèche, formol...). En

l'état actuel de nos connaissances, ils ne semblent pas se transmettre par le sang mais peuvent se transmettre par contact de

tissus contaminés (cf. sécurité au laboratoire de cytologie et d'histologie).

1.2 - 1.2 - Modes de transmission de ces agents infectieux Modes de transmission de ces agents infectieux

Il existe 4 modes de transmission des agents infectieux à l'homme: par voie transcutanée et cutanéomuqueuse La plupart des agents infectieux ne traversent pas une peau saine, mais toute coupure ou micro-coupure est une porte d'entrée pour ces agents. Exemple de risque infectieux : piqûre par du matériel souillé (aiguille, pipette Pasteur en verre, bris de verre...) N.B. C'est le risque le plus grave de contamination. par inhalation d'aérosols C'est le mode de transmission le plus fréquent. Le risque est insidieux, car les aérosols ne sont pas visibles. Exemple de risques infectieux : inhalation d'aérosols lors de l'ouverture de tube de sang ou de plasma contaminé. par voie orale Étant donné l'interdiction absolue de pipeter à la bouche, la contamination est souvent due au fait de porter à la bouche des objets souillés (stylo ...) ou des mains souillées. par projection vers la peau , les yeux ... Exemples de risques infectieux : projection de sang contaminé lors de la casse d'un tube, ou frottement de l'oeil avec la main souillée.

6CM © B1ABM. l'eau de Javel à 12 ° Cl diluée au 1/10

. l'alcool à 70° . le glutaraldéhyde à 2 % . le formol . la chaleur (30 min à 56 °C pour VIH)Retenir que ces virus sont détruits par :

Mais ils ne sont pas détruits par:

Exception :. les rayons U.V. , les rayons gamma

. la congélation Virus de l'hépatite B qui resiste à de nombreux traitements, d'où la nécessité d'être vaccinéTemps de contact

5 à 10 min

Module 1 - Cytologie sanguine et médullaireActivités technologiques

1.3 - 1.3 - Procédures à risquesProcédures à risques

2 - 2 - Démarche de prévention Démarche de prévention

Cette démarche doit être collective pour une protection de tous.

2.1 - 2.1 - Vaccinations obligatoires pour les professionnels de la santéVaccinations obligatoires pour les professionnels de la santé

Loi 91-73 du 18 janvier 1991

Toute personne qui dans un établissement ou organisme public ou privé de prévention ou de soins,

exerce une activité professionnelle l'exposant à des risques de contamination, doit être immunisée

contre: - BGC - l'hépatite B (rappel en fonction du taux d'Anticorps)

- la diphtérie, le tétanos, la poliomyélite (vaccin à 2-4 mois, 11 mois, 6 ans, 11-13 ans puis

rappel à 25 ans, 45 ans, 65 ans puis tous les 10 ans) - la fièvre typhoïde (rappel tous les 3 ans pour les personnels de laboratoire).

De même pour tout étudiant d'un établissement préparant à l'exercice des professions de santé.

Décret du 5 septembre 1996:

Obligation vaccinale avec le BCG des élèves, personnels de laboratoire d'analyses médicales.

B1ABM CM ©7Qui est concerné ?L'acheminement du prélèvementQuels risques majeurs ?

Patient

Prélèvement

Transport

Réception au laboratoire

Analyse

Élimination des déchetsInfirmières

Médecins

Techniciens

Agents

Secrétaires

Techniciens

Agents d'entretien

Services extérieursPiqûre avec une aiguille souillée

Coupure, contact

Coupure, piqûre, contamination

orale, par projection

Ramassage

Piqûres, coupures, contamination

orofécale..

Le risque existe à chaque étape

Il n'existe pas de vaccin contre le VIH et le VHC

Risques biologiques et prévention

2.2 - 2.2 - Origine des produits sanguins utilisés au lycéeOrigine des produits sanguins utilisés au lycée

Une convention cadre sur le sang a été élaborée entre le ministère de l'éducation nationale et l'agence

française du sang (14-4-1994). Les échantillons de sang sont fournis par le centre de transfusions. -Ils proviennent de donneurs prélevés dans des conditions conformes aux bonnes pratiques de prélèvement. -Ils ont été soumis aux tests de dépistages suivants : •recherche des anticorps anti-VIH •recherche des anticorps anti-VHC •recherche des antigènes HBs et des anticorps anti-HBc correspondant au VHB •recherche des anticorps anti-HTLV I et II (virus des leucémies humaines à lymphocytes T) •recherche des anticorps anti-syphilitiques •dosage des transaminases (enzymes indiquant une lésion des cellules hépatiques)

-Les recherches d'anticorps et d'antigènes doivent être négatives, et l'activité des transaminases dans

le sang doit être normale.

2.3 - 2.3 - Respect des bonnes pratiques du laboratoire Respect des bonnes pratiques du laboratoire

 Tenue de travail

-Les vêtements de ville et les sacs sont déposés dans un vestiaire extérieur au laboratoire.

-Le port d'une blouse propre, en coton (mélange polyester-coton 65%-25% - non inflammable) est

impératif. La blouse doit recouvrir les vêtements personnels. Elle est à retirer à chaque sortie du

laboratoire. •Transport dans le cartable : repliée endroit contre endroit dans un sac plastique

•Lavage à 60°C, avec des produits lessiviels adaptés (types produits du CHU) puis repassage.

-Les cheveux longs doivent être attachés et les ongles doivent être courts. -Le port de bagues et de bracelets est à éviter.  Comportement : avoir une attitude réfléchie

-Le poste de travail doit être organisé de façon rationnelle, un soin extrême doit être apporté aux

manipulations afin de réduire au maximum les risques d'éclaboussures et de contamination par des

aérosols. -Il faut veiller à ne pas déranger la personne qui manipule. -Rien ne doit être porté à la bouche • Ne pas manger, ne pas boire, ne pas fumer, ne pas se maquiller dans le laboratoire • Éviter les gestes machinaux:

Ne pas se ronger les ongles

Ne pas sucer ses doigts ou un crayonNe pas se frotter les yeux, porter la main au visage, passer la main dans les cheveux...

-Le matériel utilisé doit être adapté et conforme : de préférence du matériel plastique à usage unique

-Le port de gants (aux deux mains) en latex à usage unique est obligatoire mais limité aux gestes à

risque. Ils doivent être utilisés avec discernement. cf. fiche n°2 -Il faut se laver les mains après la manipulation ou en cas d'incident. cf. fiche n°1

8CM © B1ABM

Module 1 - Cytologie sanguine et médullaireActivités technologiques -La prise de note pendant la manipulation

Utiliser un cahier de laboratoire recouvert d'un protège-cahier en plastique et un stylo bille qui

resteront au laboratoire Protéger le protocole de la manipulation par une pochette plastique transparente

Rédiger le compte rendu de la manipulation à partir du cahier de laboratoire, après décontamination de

la paillasse. -Décontamination, élimination des déchets -En cas de renversement de sang au cours de la manipulation, verser immédiatement de

l'eau de Javel à 1,2° chlorométrique (ou surfanios), poser une feuille de papier filtre; laisser

agir 10 min.- -Après utilisation Trier et traiter le matériel selon le tableau suivant : *DASRI : Déchets d'Activités de Soins à Risques Infectieux ATTENTION : Les déchets coupants et tranchants doivent être éliminer à part dans des récipients non perforables et inviolable. -Après la manipulation :

. Désinfecter le plan de travail avec de l'eau de Javel à 3° chlorométrique ou surfanios.

. Se laver soigneusement les mains . Laver les sols tous les jours : balayage humide à l'eau de Javel à 3° chlorométrique.

B1ABM CM ©9Sac

plastiqueDASRI mouEn bac avec désinfectant

Destruction

obligatoire par un organisme spécialisé et sur site autoriséDécontamination par immersion dans un désinfectant (eau de Javel à 1.2°Cl ou par immersion dans l'alcool 70 % pendant

10 min minimum

Déchets NettoyageMatériel à usage unique

Non contaminéPotentiellement

contaminé= DASRI*Matériel réutilisable

Non contaminéPotentiellement

contaminé DASRI piquant- coupant

Poubelle

imperforable inviolable

Risques biologiques et prévention

3 - 3 - Règles à appliquer en cas d'Accident d'Exposition au Sang Règles à appliquer en cas d'Accident d'Exposition au Sang

Définition : Un accident d'exposition au sang (AES) est une exposition accidentelle avec du sang

(ou un liquide biologique) lors :

-d'une effraction cutanée due à une piqûre avec une aiguille ou une coupure avec un objet tranchant

-d'un contact avec du sang ou du liquide contaminé sur une plaie, une peau non intacte ou une muqueuse, permettant la pénétration de l'agent infectieux. Les consignes à appliquer d'urgence en cas d'accident doivent être affichées.  Immédiatement : réaliser les soins locaux :  Dans la première heure : Cette évaluation du risque dépend de nombreux facteurs :

Exemples

piqûre ou coupure profonde : risque maximum aiguille creuse : risque maximum sang : risque maximum, plasma ou sérum: risque moindre absence ou présence de moyens de protection : gants ou lunettes état clinique et sérologique du patient source

10CM © B1ABM

Si piqûre ou blessure ou contact sur peau lésée : - Nettoyer : eau + savon antiseptique (betadineR scrub) - Rincerquotesdbs_dbs1.pdfusesText_1

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