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Dr. BEKARA A Biochimie Physiologique Humaine et Nutritionnelle M1 Biochimie Appliquée 1

Chapitre 2 : Régulation Métabolique

Partie 01 : Rappel sur le Métabolisme Glucidique

1. Généralités sur les Glucides :

Les glucides sont les molécules les plus abondantes sur la terre

Sont des molécules hydrophiles grâce à la présence de nombreux groupement (OH) qui établissent des liaisons hydrogènes avec lH2O.

1.1. Rôle :

Structural

Energétique (ATP)

Métabolique ( molécules )

Reconnaissance cellulaire (glucides liés aux protéines et aux lipides)

1.2. Classification :

Monosaccharides (oses simples, une seule unité) : Glucose

Disaccharides (deux unités) : saccharose

Polysaccharide (oses complexes, plusieurs unités) : Amidon

2. Glycogène :

Cest un homo polysaccharide ramifié de D-Glucose reliés entre eux par une liaison 1 4 et pour les ramifications la liaison se fait en Alpha 1 6 Dr. BEKARA A Biochimie Physiologique Humaine et Nutritionnelle M1 Biochimie Appliquée 2

Remarque :

Le glycogène représente la forme de stockage de glucose dans les tissus (Foie et muscle)

Ce métabolisme dépend de :

a) Etat nutritionnel : o Post prandiale : glycogénogénèse (Foie) o Début de jeûne : glycogénolyse (Foie) b) Situation énergétique : o Glycogénolyse lors dune activité musculaire intense (Muscle)

2.1. Anabolisme (Glycogénogénèse) :

Métabolisme

Anabolisme

là partir de glucose on obtient du glycogène

Glycogénogénèse

Catabolisme

Glucogène donne

le glucose

Glycogénolyse

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2.2. Catabolisme (Glycogénolyse) :

Dépolymérisation de Glycogène : Phosphorolyse par la glycogène phosphorylase

Débranchement par les enzymes débranchant

Isomérisation de glucose 1p en Glucose 6 P par la phosphoglucomutase.

Hydrolyse de Glucose 6 phosphate par la glucose 6 phosphatase qui se trouve uniment dans le foie ce qui permet de libérer le glucose dans le sang , tandis que dans le muscle le glucose 6 phosphate rejoint la glycolyse ainsi son usage est privée.

2.3. Régulation de métabolisme de glycogène :

La glycogénolyse et la glycogénogénèse ne doivent pas avoir lieu en même temps

Les hormones de régulation :

Insuline : stimule la glycogénogénèse (++++) du glycogène synthase. Glucagon et catécholamines : stimule la glycogénolyse (++++). Le glucagon active la glycogène phosphorylase.

Les Périodes de régulation :

Post prandiale : stockage de glucose sous forme de glycogène dans le foie et le muscle (glycogénogénèse ++++)

Période de jeûne : dégradation de glycogène pour libérer le glucose (Foie) Période dactivité musculaire : dégradation de glycogène (muscle) Dr. BEKARA A Biochimie Physiologique Humaine et Nutritionnelle M1 Biochimie Appliquée 4

3. La Glycolyse :

Dégradation de glucose pour donner le pyruvate

La glycolyse est le précurseur de nombreuses molécules

Exemple : Pyruvate Oxaloacétate acide aminé

Elle déroule dans tous les tissus mais à des degrés variés.

3.1. Sources de glucoses :

Alimentation : il est issu de la dégradation des disaccharides et de polysaccharides

Néoglucogénèse

Dégradation de glycogène tissulaire

3.2. Les étapes de la glycolyse :

Etape dinvestissement (consommation de 02 ATP)

Etape de remboursement (libération de 04 ATP)

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3.3. Métabolisme de Fructose :

Ce sucre est présent dans certains aliments ( fruits) ainsi il est issu de la dégradation intestinale de saccharose .

Contrairement au glucose, le fructose peut pénétrer dans les cellules en absence dinsuline via des transporteurs spécifiques GLUT 5

Son métabolisme est hépatique dont il rejoint la glycolyse au niveau de fructose 6 phosphate comme il peut aussi rejoindre la glycogénogénèse .

3.4. Métabolisme de galactose :

Il est issu de la dégradation intestinale de lactose Le galactose peut aussi pénétrer dans les cellules en absence dinsuline Son métabolisme est surtout hépatiques, ainsi il rejoint la glycolyse au niveau de glucose

6 phosphate.

Dr. BEKARA A Biochimie Physiologique Humaine et Nutritionnelle M1 Biochimie Appliquée 6

4. Régulation de la glycolyse :

Elle la vitesse de la glycolyse aux besoins de la cellule

Elle dépend de la glycémie.

Le glucagon :

Freine la glycolyse, elle réserve le glucose aux tissus glucodépendants

Linsuline :

Accélère la glycolyse en période post prandiale pour produire lénergie nécessaire à la synthèse

des acides gras.

Adrénaline :

En période elle accélère la glycolyse pour nécessaire aux contractions musculaires.

5. La néoglucogénèse

synthèse de nouvelles molécules glucidiques à partir des substrats non glucidique.

On a des tissus

non glucodépendants qui utilisent dautres sources dénergie que le glucose , et on a des tissu glucodépendant qui utilise le glucose comme seule source dénergie (Hématies , strictement glucodépendant ) et le cerveau (qui utilise en plus les corps cétoniques)

5.1. Lieu : 90% Foie, 10% reins et intestin.

5.2. Précurseurs :

Pyruvate

Lactate

Glycérol

Acides aminés glucoformateurs

5.3. Quand :

La néoglucogénèse se déroule

dune manière ordinaire à distance des repas , et devient

accrue au début de jeûne , ainsi elle est plus intense avec des périodes de jeûne prolongées

(Voir schéma supplémentaire )

Globules rouges et Muscle

Lipolyse, Aliments

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5.4. Régulation de la néoglucogénèse : 5.4.1. Glucagon : Entre repas :

Elle sous la dépendance de glucagon à distance des repas. Lorsque la glycémie diminue , le

glucagon active la dégradation des lipides (TG et AG) ce qui donne lAcétyl CoA déclenchant

ainsi la néoglucogénèse en favorisant la réaction du pyruvate .

Jeûne :

Le glucagon accélère la néoglucogénèse et freine la glycolyse , elle induit la synthèse des

enzymes de cette voie : Phosphoénolpyruvate carboxylase et Fructose 1,6-Bisphosphate.

5.4.2. Insuline :

En période post prandiale ralentit la néoglucogénèse.

5.4.3. Les glucocorticoïdes (Cortisol) :

Stimule la néoglucogénèse à partir des acides aminés et de glycérol libérés par la protéolyse

musculaire et la lipolyse adipocytaire. 1 Université de Hassiba Benbouali de Chlef ; Faculté SNV, Département de Biologie M1 : Biochimie Appliquée (2019/2020), Dr. BEKARA A Module : Biochimie Physiologique et Nutritionnelle Humaine

Chapitre 2 : Régulation Métabolique

TD 02 : Métabolisme des glucides.

Exercice 01 : Répondiez brièvement aux questions suivantes

1. Ecrire l'équation globale de la glycolyse

2. Décrire les conditions physiologiques de mise en jeu de la glycogénolyse.

3. Indiquer les destinées de glucose 6-phosphate dans le tissu hépatique et dans le tissu musculaire

4. Au niveau hépatique, la glycogénolyse est contrôlée par certaines hormones . Préciser leur nature, leur origine et

leur mécanisme d'action simplifié Exercice 02 : Métabolisme des glucides dans l'hépatocyte

1. Complétez le schéma ci-dessous :

Après un repas riche en glucides ; le foie capte le glucose et lemet en réserve sous forme de glycogène ;

2. Donner la structure chimique de glucose

3. L'enzyme E1 est soumiseà un contrôle hormonal. Citez les principales hormones impliquées et décrireleur

mécanisme d'action brièvement.

4. Les hépatocytes effectuent également la synthèse de glycogène à partir degalactose, donnez la structure de cette

molécule.

5. La galactosémie congénitale est une maladie due à unedéficience héréditaire en enzyme E2. Indiquer les

conséquences métaboliques de ce déficit

6. Citer les métabolites susceptibles d'être convertis en glucose par leshépatocytes. D'où ils viennent ?

7. Qu'appelle ton cette réaction

8. L'enzyme E3 est très importante dans le métabolisme glucidique, précisezsi la réaction catalysée par cet enzyme

se produit dans d'autres tissus ? 2 Exercice 03 :Insuline et métabolisme énergétique

La figure ci-dessous représente un schéma simplifié du métabolisme énergétique qui indique les principaux lieux d'action

d'insuline

1. Nommez les enzymes : E1, E2, E3 et E4

2. A partir de cette figure quels sont les tissus impliqués ?

3. L'entrée du glucose dans les tissus se fait grâce à des structures spécialisées, Nommez les ?

4. L'insuline stimule l'expression de ces structures par exocytose :Schématisez ce phénomène

5. Expliquez l'effet d'insuline sur l'entréedu glucose dans la cellule.

6. Après son entrée dans la cellule ; le glucose est phosphorylé en glucose 6-phosphate, écrivez cette réaction

7. Nommez les métabolites M1 et M2 et indiquer à l'aide des données de documents les perturbations des

métabolismes glucidique et lipidiques en cas d'absence d'insuline.

8. Déduire le trouble de l'équilibre acido - basique qui apparait en cas d'absence d'insuline.

1 Université de Hassiba Benbouali de Chlef ; Faculté SNV, Département de Biologie M1 : Biochimie Appliquée (2019/2020), Dr. BEKARA A Module : Biochimie Physiologique et Nutritionnelle Humaine

Chapitre 2 : Régulation Métabolique

TD 03 : Analyse des Glucides.

Exercice 01 : Chromatographie des glucides urinaires

Pour identifier les glucides contenus dans une urine, on réalise une chromatographie de l'urine avec différents témoins sur

couche mince de gel de silice. Phase stationnaire : gel de silice sur support aluminium Phase mobile : Butanol 4 vol, acétone 5 vol, eau 1 vol

Durée de développement : 45 minutes

Révélation : Réactif de Molisch (alpha naphtol, éthanol, acide sulfurique) 5 minutes à 105 °C.

1. Expliquez brièvement sur quelles propriétés est basée la séparation chromatographique d'un mélange de glucide

sur couche mince.

2. Préciser le rôle et le mode d'action de révélateurs

3. Exploiter le chromatogramme obtenu :

• Définir le Rf et le calculer pour chacun des spots • Donner la composition éventuelle en glucide de l'urine analysée Exercice 02 : Dosage de Glucose par la méthode de glucose oxydase

Extrait d'une fiche technique

Tampon phosphate 150 mmol/l Phénol10mmol/l 4-aminoantipyrine 0,4mmol/l Peroxydase≥ 300U/L Glucose peroxydase ≥ 15 000 U /L

Mode opératoire

Echantillon ou étalon 10µl Solution réactionnelle 1 ml

Mélanger. Lire l'absorbance à 505 nm au bout de 10 minutes d'incubation à 37°C ou de 20 minutes à 20°C-25°C.

• L : Lactose • X :Xylose • U : Urine • G: Glucose • F : Fructose • S : saccharose 2

Questions :

1. Indiquer le rôle de chaque constituant de la solution réactionnelle.

2. Donner les conditions opératoires à respecter.

3. La fiche technique indique que l'absorbance peut être lue au bout de 10 minutes à 37°C ou de 20 minutes à

20°C-25°C . Expliquer

4. Justifier le choix de la longueur d'onde utilisé.

5. Exploiter les résultats ci-dessous et conclure :

Exercice 03 : Epreuve d'hyperglycémie provoquée par voie orale

Une épreuve d'hyperglycémie provoquée par voie orale est réalisée chez deux individus A et B à jeûne depuis 12 heures.

Ils ingèrent pour cela 50 g de glucose dissous dans 200 ml d'eau ce qui représente le temps Zéro de l'expérience.

Les glycémies sont déterminées sur des prélèvements de sang réalisés au bout de 15 , 30 ,45 , 60 , 90, 120 , 150 ,

180 , 210 et 240 min .

Fiche technique

Composition de solution réactionnelle

Tampon phosphate pH= 7,5 150 mmol/l Hydroxybenzoate 10 mmol/l 4-aminoantipyrine 0,4 mmol/l Peroxydase ≥ 300 U/L Glucose oxydase d'Aspergillus Niger ≥ 15 000 U/L

Mode opératoire :

Echantillon ou étalon 20 µl Solution réactionnelle 2,5 ml

Mélanger et lire l'absorbance à 505 nm au bout de 10 minutes d'incubation à 37°C ou 20 minutes à 20-25°C.

Donnée :

Concentration d'étalon = 5,55 mmol/l Glycémie : C (glucose, plasma) = C (glucose, étalon) Х (A dosage / A étalon) Temps Absorbance 0 15 30 45 60 90 120 150 180 210 240 A 0.254 0.305 0.350 0.399 0.359 0.305 0.254 0.233 0.211 0.254 0.260 B 0.457 0.492 0.508 0.545 0.571 0.634 0.711 0.634 0.596 0.545 0.457

Etalon 0.254

Questions :

1. Déterminer les glycémies des individus A et B à différents temps de l'épreuve

2. Tracer sur le même graphe les courbes d'évolution de glycémie pour les individus A et B

3. Quel est le but de cette technique

4. Comparer entre les deux courbes d'individu A et B, Conclure ? Cuve 0 1 2 3 4 5 Plasma Contrôle

C glucose

(mmol/l 0 4 8 12 16 20 A à 505 nm 0 0.247 0.491 0.746 0.986 1.250 0.708 0.334quotesdbs_dbs44.pdfusesText_44

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