[PDF] Limmunité adaptative à médiation humorale

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L'immunitĠ adaptative à méTiaWion Uumorale

La séropositivité pour le VIH correspond à la présence d'anticorps spécifiques contre certaines protéines du virus. La synthèse

TGanWicorpV eVW la VignaWure TGune réacWion Te lGorganiVme à la préVence TGélémenWV éWrangerV. LeV anWicorpV agiVVenW TanV le milieu

exWracellulaire en Ve lianW VpécifiquemenW aux anWigèneV qui onW TéclencUé leur formaWion.

1. La réaction antigène-anWicorpV

- Mise en évidence d'anticorps dans le sang par élecWropUorèVe proWéique Tu Vérum TGun lapin ayanW reçu par injecWion une molécule éWrangèreH lGalbumine Te boeuf (lapin immuniVé) eW celle TGun lapin Wémoin non immuniVé par la WecUnique TGélecWropUorèVe.

LeV réVulWaWV peuvenW êWre numériVéV puiV WraiWéeV par le logiciel ÓNSURIÓ pour êWre WranVforméeV en profil

élecWropUoréWique (" spectre d'absorption » ou " profil TenViWoméWrique ͩ de l'ĠlectrophorĠgramme).

- Le WeVW TGOucUWerlony

Dans cette méthode, antigène et anticorps, introduits séparément, diffusent dans un gel d'agarose et à leur rencontre se

proTuiW une réacWion qui peuW êWre viVualiVée. Le fond de deux boîtes de Pétri contient un gel d'agarose dans lequel ont été

réaliVéV 6 puiWV péripUériqueV eW un puiWV cenWral (voir le TocumenW) à égale TiVWance leV unV TeV auWreV.

NOUS DEVONS DISPOSER MU ÓATÉRINL SUIVANT J

- 2 boŠtes de PĠtri ǀides, de l'eau distillĠe, 1 Ġprouǀette graduĠe de 50 mL - 1 bec élecWrique cUauffanW (+ luneWWeV Te proWecWion) eW une VpaWule - 1 pince en boiVH 1 bécUerH 1 emporWe-pièce eW 1 mire plaVWifiée - 1 pipeWWe graTuée Te 10 mLH 1 propipeWWeH une coupelle en plaVWique - Une balance Te préciVion Vur la paillaVVe profeVVeur - De l'agar-agar en pouTre eW une VpaWule Vur la paillaVVe profeVVeur - Une micropipeWWe eW 6 embouWV Vur la paillaVVe profeVVeur - MifférenWeV VoluWionV Vur la paillaVVe profeVVeur J ¾ 1 tube (marron) numéroté 3 contenant de la BSA ¾ 1 tube (rouge) numéroté 4 contenant une solution tampon ¾ 1 tube (orange) numéroté 5 contenant du sérum complet de bovin ¾ 1 tube (jaune) numéroté 6 contenant du sérum complet de lapin ¾ 1 tube (violet) numĠrotĠ 7 contenant du sĠrum complet d'ąne

PROTOCOLE EXPÉRIMENTAL J

AWWenWion à ne paV fenTre la géloVe ; manipuler le pluV propremenW poVVible. Ne jamaiV faire TéborTer leV puiWV eW éviWer WouW conWacW enWre leV

doit ġtre plane Si une seule de ces conditions n'est pas remplie, l'edžpĠrience Ġchouera lamentablement et si les embouts ne sont pas

cUangéVH WouV leV réVulWaWV Te WouV leV groupeV qui VuivenW VeronW fauVVéV.

Exemple de résultats J

Dans chacun des puits périphériques on a déposé, en égal volume, différenWeV VoluWionV TGanWigèneV J

- Puits 2: du sérum de cheval, - Puits 3: du sérum de lapin, - Puits 4: du sĠrum d'ąne, - Puits 6: une solution tampon. ManV le puiWV cenWral Te la boîte à gauche on a TépoVé une

Les boîtes sont fermées et conservées à température ambiante pendant 24 heures: les produits de chaque puits diffusent dans le gel. On peuW WraiWer

cUacune TeV Teux boîWeV par un coloranWH le bleu Te CoomaVieH qui Vouligne la réacWion qui VGeVW proTuiWe enWre cerWainV puiWV.

- Peser TanV la coupelle en plaVWique 0,2 g d'agar-agar. avec la VpaWule.

chauffage au dĠbut de l'Ġbullition ; retirer dĠlicatement le bĠcher ă l'aide de la pince en bois EN

ÉVITANT DE SE BRÛLER ET DE RENVERSER LE CONTENU BRÛLANT SUR LA PAILLASSE.

- Pipeter 5 mL de gel d'agarose chaud encore fluide et le ǀerser dans une boŠte de PĠtri posĠe sur

un VupporW plan eW UoriYonWal. Recommencer l'opĠration aǀec la deudžiğme boŠte et attendre la

priVe Tu gel (environ 5 min) avanW Te manipuler leV boîWeV ; penTanW ce WempV rincer la pipette eW

ǀider tout fragment de gel d'agarose prisonnier. - Poser la boiWe Te PéWri Vur la maWrice fournie (mire plaVWifiée)

- Faire des trous TanV la géloVeH ă l'aide de l'emporte-pièceH en VuivanW le moTèle Te la maWrice eW

ôter le disque de gélose complğtement et l'Ġjecter ă l'aide de la poire. Recopier Vur le fonT Te la

boiWeH ă l'aide d'un feutre indĠlĠbileH leV leWWreV Te la maWrice ci-conWre.

- DéposerH à l'aide d'une micropipeWWe 15 ђL de solution d'anticorps dans le puits central (tube

n°8 vert).

- Déposer 15 µL de chaque tube 3 à 7 TanV leV emplacemenWV b à f en inTiquanW au fur eW à meVure

le Vérum TépoVé TanV cUaque puiWV. - Mettre ă l'Ġtuǀe penTanW 48 UeureV à 30°C puiV lire leV réVulWaWV. a b c d e f

2. Mécanismes moléculaires

- Modélisation moléculaire des anticorps ou immunoglobulines:

Il est possible de comprendre la structure tridimensionnelle d'une molécule d'anticorps - encore appelée

immunoglobuline - en la viVualiVanW grâce aux logicielV RaVmolH RaVWop ou CUimeH que lGon Wrouvera Vur le

ViWe Te lGINRP. Le ficUier Tu moTèle moléculaire Ve Wrouve TanV leV VouV-ToVVierV Te RaVmol ou ici.

La forme en Y Te lGanWicorpV correVponT à lGaVVemblage Te quaWre cUaîneV polypepWiTiqueV enrouléeV eW

inWerconnecWéeVH iTenWiqueV Teux à TeuxJ Teux cUaîneV lourTeV eW Teux cUaîneV légèreV.

- SéquenceV pepWiTiqueV TGune molécule TGanWicorpVJ

Avec Anagène 2, on peut ouvrir différents fichiers de VéquenceV complèWeV ou Te fragmenWV Te VéquenceV

d'immunoglobulines dans ͨ Fichier »H " Thğmes d'Ġtude »H " Terminale S »H " Immunologie »H " IgG »H

" Structure d'une IgG » (par exempleH VélecWionner " cUaîne complèWe » afficUe 4 VéquenceV J une cUaîne

lĠgğre et une chaŠne lourde d'une immunoglobuline, une chaŠne lĠgğre et une chaŠne lourde d'une autre).

Avec Anagène 1, il fauW aller TanV " fichier » " ouvrir » et cliquer sur " anagène » puiV Vur " banque » J à

Ll-eu.pro afin de sélectionner respectivement deux chaînes lourdes de deux immunoglobulines différentes

eW Teux cUaîneV légèreV Te ceV Teux mêmeV immunoglobulineV.

On pourra Wrouver à ceWWe aTreVVe WouWeV leV reVVourceV permeWWanW Te viVualiVer leV moTèleV moléculaireV

- ÓoTèle moléculaire Vimple TGun anWicorpVJ La structure simplifiée d'une molécule d'anticorps est schématisée sur la figure ci-conWre à gaucUe. LeV Teux cUaîneV "lourTeV" onW une maVVe molaire compriVe enWre 40 000 eW 70 000 MalWonVH leV Teux cUaîneV légèreVH elleVH onW une maVVe molaire Te 22 500 MalWonV. CUaque cUaîne comporWe une région variable (environ la moiWié Te la cUaîne légère eW un quarW Te la cUaîne lourTe) eW une région conVWanWe. Ce VonW leV régionV variableV TeV cUaîneV légèreV eW lourTeV qui Ve replienW TanV lGeVpace pour former leV ViWeV Te combinaiVon anWicorpV- anWigèneH cGeVW à Tire leV ViWeV qui Ve lienW aux anWigèneV parWiculierV conWre leVquelV leV anWicorpV VonW TirigéV. identiques). - ÓoTéliVaWion TGun complexe anWigène - anWicorpV (complexe immun)

On peut visualiser le modèle moléculaire de la liaison antigène-anticorps ă l'aide de Rasmol ou Rastop en choisissant le

fichier igg-lyV.pTb TiVponible TanV leV VouV-ToVVierV Te RaVmol ou ici.

3. Élimination des complexes immuns J la pUagocyWoVe

- Une ligne Te TéfenVe innéeH non VpécifiqueJ

La phagocytose est un mécanisme cellulaire par lequel certaines cellules, leV phagocytes, ingèrent puis dégradent par

TigeVWion inWracellulaire TeV élémenWV VoliTeV capWuréV TanV le milieu exWracellulaire comme TeV bacWérieV ou TGauWreV

celluleV. Nlle conVWiWue une ligne Te TéfenVe non Vpécifique qui Ve Téroule en nGimporWe quel enTroiW Te lGorganiVme. LeV

macropUageV VonW TeV pUagocyWeV. IlV onW pour origine TeV monocytes sanguins néV TanV la moelle oVVeuVe eW qui gagnenW

leV WiVVuV lympUoïTeV péripUériqueV.

LorV Te la pUagocyWoVeH leV macropUageV accolenW leur membrane aux parWiculeV éWrangèreV (1) puis les font pénétrer dans

leur cyWoplaVme (2) à l'intérieur de vésicules membranaires (endocytose) où elles sont dégradées par digestion

inWracellulaireJ TeV lyVoVomeV iVVuV Te lGappareil Te Golgi eW conWenanW TeV enYymeV lyWiqueV TéverVenW leur conWenu TanV leV véViculeV TGenTocyWoVe (3) pour former un pUagoVome (4). Les déchets solides VonW enVuiWe éliminéV par exocyWoVe (5). La figure ci-conWre préVenWe Te façon générale le mécaniVme Te la pUagocyWoVe. - Une aiTe à la pUagocyWoVe apporWée par leV anWicorpV

La phagocytose est également impliquée dans les réponses spécifiques lorsqu'elle est réalisée par certains phagocytes

ViWuéV TanV leV organeV lympUoïTeV péripUériqueV. ManV ce caVH aprèV que TeV immunoglobulineV (anWicorpV) Ve furenW fixéV

Vur leV anWigèneV Te la paroi bacWérienneH grâce à leur site de reconnaissance antigénique (complexeV immunV)H le braV Ńc

(fragmenW conVWanW) Te cUaque anWicorpV eVW libre. Or la membrane plaVmique TeV celluleV pUagocyWaireV porWe TeV

récepteurs membranaires capableV Te Ve fixer à ceV fragments Fc: l'adhérence entre le phagocyte et la particule à ingérer

eVW Tonc faciliWéeH eW par là-même la pUagocyWoVe. AinViH un mécaniVme non VpécifiqueH la pUagocyWoVeH qui eVW répanTu

cUeY Te nombreuVeV celluleVH eVW uWiliVé TanV leV organeV lympUoïTeV VeconTaireV au courV Te réacWionV immuniWaireV

VpécifiqueV faiVanW inWervenir TeV anWicorpV. CGeVW Tonc la pUagocyWoVe qui aVVure lGéliminaWion TeV complexeV immunV.

4. Origine des anticorps

- LeV plaVmocyWeVH celluleV VécréWriceV TGanWicorpV

Les anticorps sont sécrétés dans le sang par de gros globules blancs spécialisés: les plasmocytes. Chaque plasmocyte ne

VécrèWe quGun Veul Wype Te molécule TGimmunoglobuline. - La proTucWion maVVive TGanWicorpV

La production d'anticorps en réponVe à lGenWrée TGun anWigène TanV lGorganiVme eVW le réVulWaW Te mécaniVmeV complexeV

qui Ve TéroulenW en pluVieurV éWapeVJ ƒ Reconnaissance de l'antigène et sélection clonale des lymphocytes B : Les différentes molécules d'anticorps présentes à la Vurface reconnaiVVenW le même anWigène. CeV anWicorpV jouenW le " BCR » pour B cell receptor). PréVenWV à raiVon Te quelqueV millierV TanV lGorganiVmeH un groupe de lymphocytes B reconnaiVVanW un anWigène Tonné conVWiWue un clone. LGorganiVme eVW capable Te reconnaîWre un WrèV granT nombre TGanWigèneV TifférenWVJ lGorganiVme conWienW Tonc

TGanWigèneV VuVcepWibleV TGêWre reconnuV.

LGactivation d'un clone de lymphocytes B identiques Ve WraTuiW par leur mulWiplicaWion inWenVe par miWoVeV (amplification

ou proliféraWion clonale). ƒ Différenciation en plaVmocyWeV VécréWeurV TGanWicorpV VpécifiqueVJquotesdbs_dbs44.pdfusesText_44

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