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1

Sous la coordination du Dr Jean-Jacques CABAUD

Responsable scientifique et pédagogique - INTS

Dr Nicole CATHERINE : Responsable du projet, médecin biologiste, responsable de dépôt

Patricia AURY : Cadre de santé - CTSA Clamart

Laurence COUTO : Cadre de santé formateur - IFSI Tenon Frédérique LE PLEUX : Cadre de santé formateur - IFSI Tenon Marie Christine SANDRIN ͗ ChargĠe d'enseignement - consultant INTS Dr Catherine TROPHILME : Responsable scientifique et pédagogique - INTS

1 GT RDQ : 2016

2 GT RDQ : 2016

¾Connaître les différents systèmes de groupe érythrocytaire et leurs techniques d'identification ¾Connaître les examens pré transfusionnels nécessaires pour ¾Savoir expliquer le rôle des anticorps " naturels réguliers » et leur danger en transfusion ¾Expliquer l'intĠrġt de la recherche d'anticorps irréguliers ¾Connaître les bonnes pratiques de prélèvement d'Ġchantillons sanguins

3 GT RDQ : 2016

¾Rappel des bases immunologiques

¾Le système ABO :

¾Description

¾Implications biologiques : principe du groupage

¾Implications cliniques :

¾Particularité du système ABO : les anticorps naturels réguliers

¾Les règles de compatibilité

¾Conséquences cliniques

¾Le système RH :

¾Description : les 5 antigènes RH, nomenclature ¾Implications biologiques : principe du groupage

¾Les autres systèmes :

¾Système Kell et antigène KEL1

¾Autres systèmes de groupe

¾Les examens sanguins nécessaires pour transfuser :

¾Le groupage sanguin

¾La recherche d'anticorps irrĠguliers

¾Récapitulatif

¾Causes d'erreur

¾Exercices

4 GT RDQ : 2016

ƒDéfinitions

3Un antigène est une substance capable de provoquer une réaction

immunitaire et de réagir spécifiquement avec le produit de cette réaction (anticorps, lymphocytes)

3Un anticorps est une protéine (immunoglobuline) dont la production est

provoquée par l'introduction d'un antigène et capable de se lier spécifiquement avec lui : Allo-anticorps : anticorps dirigé contre un antigène de la même espèce (ex : humain-humain) Auto-anticorps : anticorps dirigé contre un antigène de soi (maladies auto-immunes) 5

GT RDQ : 2016

Ce sont des molécules situées à la surface des cellules Notre système immunitaire est capable de différencier: ƒLes antigènes présents sur les cellules de notre organisme : il ne les attaque pas = tolérance immunitaire ƒLes antigènes étrangers à notre organisme et introduits dans l'organisme (agent déclenche une réaction de défense = réaction immunitaire

6 GT RDQ : 2016

Un anticorps est une protéine appelée immunoglobuline, qui circule dans le plasma ƒLintroduction dun antigène inconnu provoque une réaction immunitaire avec production danticorps spécialisés contre cet antigène. Les anticorps se fixent sur les antigènes et l'organisme dĠtruit les cellules recouǀertes d'anticorps 7

GT RDQ : 2016

8

Antigène sur cellule

Introduction chez un

individu qui ne possède pas cet antigène

Production d'anticorps

dans le plasma

Fixation des anticorps

sur les antigènes

Destruction de la cellule

recouǀerte d'anticorps n o p

Fixation des anticorps sur les antigènes

GT RDQ : 2016

ƒPolymorphisme et système de groupe sanguin

3Un groupe sanguin est un ensemble d'antigğnes génétiquement induits et

déterminés, exprimés à la surface des cellules sanguines : globules rouges (GR), polynucléaires, lymphocytes, monocytes, plaquettes

3Actuellement : 35 systèmes de groupes sanguins liés au globule rouge

ƒPrincipe de la sécurité transfusionnelle

3 Ne pas apporter par les hématies transfusées un antigène absent chez le

receveur (pour éviter par ces transfusions que le receveur ne s'immunise)

3Ne pas apporter par les hématies transfusées un antigène correspondant

à un anticorps présent dans le plasma du receveur (pour éviter une réaction transfusionnelle liée à un conflit Antigène-Anticorps)

9 GT RDQ : 2016

10 ABO RH

KEL (Kell)

FY (Duffy)

JK (Kidd)

Globule

Rouge

Systèmes de groupes sanguins

GT RDQ : 2016

Il se caractérise par :

ƒLes antigènes présents sur le globule rouge qui définissent 4 groupes sanguins

9Antigène A

9Antigène B

Ces antigènes sont ubiquitaires et sont présents sur de nombreuses cellules de l'organisme ͗ intĠrġt en transplantation ƒLes anticorps présents systématiquement dans le plasma correspondants aux antigènes absents : ce sont les anticorps naturels réguliers :

9Anticorps anti A

9Anticorps anti B

11 GT RDQ : 2016

Groupe

Antigènes (Ag)

présents sur le

Globule Rouge

Anticorps (Ac)

présents dans le plasma

Fréquence %

(chez les Caucasoïdes) A Ag A

Ac Anti-B

45
B Ag B

Ac Anti-A

9 AB

Ag A et Ag B

Aucun 3 O

Ni Ag A ni Ag B

Ac Anti-A et anti-B

43

12 GT RDQ : 2016

Fréquence chez les caucasoïdes

Epreuve Globulaire Epreuve

Plasmatique

Réactif

Anti A

Réactif

Anti B

Réactif

Anti A+B GR A GR B

A ++++ - ++++ - ++++

O - - - ++++ ++++

B - ++++ ++++ ++++ -

AB ++++ ++++ ++++ - -

13

Lors du groupage ABO en laboratoire on recherche les antigènes présents à la surface des Globules

Rouges du patient à l'aide de sérums tests anti A , anti B et anti A+B, et les anticorps présents dans le

plasma à l'aide de GR A et GR B (symbolisée par ++++)

GT RDQ : 2016

ƒDu fait de la présence naturelle et régulière (permanente) de ses anticorps, le systğme ABO est le premier ă prendre en compte lors d'une transfusion La règle est de ne jamais apporter un antigène contre lequel le receveur possède un anticorps ƒLes schémas classiques des compatibilités ABO en ce qui concerne la transfusion sont :

14 GT RDQ : 2016

Particularité du système ABO

Règles de compatibilité

pour la transfusion de concentrés de globules rouges 15 A

O AB

B

GT RDQ : 2016

Règles de compatibilité

pour la transfusion de plasma 16 A

AB O

B

GT RDQ : 2016

Le non respect de ces règles de compatibilité peut entraîner immédiatement une destruction des hématies (Hémolyse) intra-vasculaire, accident le plus grave et le plus redouté en transfusion, pouvant conduire au décès du patient

17 GT RDQ : 2016

18 A

Groupe

B

Hémolyse

A

Ac anti A du patient

Ag A = Conflit Ag + Ac

La destruction immédiate

et brutale des globules rouges peut entrainer des complications cliniques graves

NE JAMAIS TRANSFUSER A UN INDIVIDU UN

ANTIGENE INCONNU (Absent de ses globules)

GT RDQ : 2016

ƒQuelle différence avec le système ABO ?

globules rouges possède pas ƒLes anticorps dirigés contre les autres antigènes de groupes sont appelés " Anticorps irréguliers » transfusion ou grossesse) et cette immunisation ne se produit que chez certains sujets

19 GT RDQ : 2016

ƒSystème complexe : > 54 antigènes décrits à ce jour ƒOn en étudie 5 : RH : 1,2,3,4,5 (D,C,E,c,e), c'est le phénotype RH ƒPar convention tout sujet porteur de l'antigğne RH1 (D) est dit Rhésus positif (85% de la population caucasoïde) et tout sujet qui ne le possède pas est dit Rhésus négatif (15% de la population caucasoïde)

20 GT RDQ : 2016

Nomenclature de

Fischer et Race (lettres) D C E c e

Nomenclature de

Rosenfield (chiffres) 1 2 3 4 5

21

Exemples : O D+ C+ E- c+ e+

O RH : 1, 2 ,-3, 4, 5

A D- C- E- c+ e+

A RH : -1,-2,-3, 4, 5

Chaque antigène peut être désigné par une lettre ou un chiffre : les deux écritures figurent sur les

documents (résultats de groupage sanguin, étiquette de concentré de globules rouges) Un signe " - » signifie que l'antigğne n'est pas présent sur les globules rouges

Ex : " E- » ou " RH : -3 » signifie que les globules rouges du sujet ne portent pas à leur surface

l'antigğne E (= RH : 3)

GT RDQ : 2016

ƒChaque groupe est défini par la présence ou non de l'antigğne à la surface des globules rouges ƒGrâce à des réactifs contenant des anticorps connus anti non sur les globules rouges du sujet

ƒRéaction positive = antigène présent

ƒRéaction négative = antigène absent

ƒExemple : un sujet dont les hématies sont positives avec les anticorps anti D, anti C, anti c, anti e et négatives avec l'anticorps anti E aura pour phénotype

RH: D+C+E-c+e+ ou RH:1,2,-3,4,5

22 GT RDQ : 2016

ƒContrairement au système ABO où les anticorps anti A et anti B sont naturels et réguliers, les

anticorps dirigés contre les antigènes des autres systèmes de groupe ne sont pas présents en

permanence. Ils napparaissent que chez certaines personnes et le plus souvent après contact avec un antigène inconnu (transfusion, grossesse, fausse couche ou IVG) On les appelle anticorps irréguliers ou anticorps anti-érythrocytaires pas

ƒCertains antigènes sont plus immunogènes que d'autres: l'antigğne RH1 est le plus immunogène.

un sujet RH - (RH:-1, D-) ƒCertaines personnes s'immunisent et d'autres non, c'est imprévisible Il faut toujours ǀĠrifier, par une recherche d'anticorps irrĠguliers (RAI) avant transfusion, si la personne possède ou non des anticorps irréguliers dans son plasma

23 GT RDQ : 2016

ƒPrĠǀention de l'allo-immunisation

Déterminer le phénotype RH du sujet à transfuser inconnus du patient ƒPrĠǀention d'une hĠmolyse transfusionnelle chez un patient allo-immunisé

RAI avant toute transfusion

Quand la RAI est positive, on doit sélectionner les CGR à transfuser par une épreuve de compatibilité directe au laboratoire Sang compatibilisé : Au laboratoire, le sang du CGR sélectionné et le plasma du receǀeur sont mis en contact afin de ǀĠrifier l'absence de rĠaction (agglutination)

24 GT RDQ : 2016

25

RAI +:

anti RH3 (anti E) Hémolyse

Ac anti RH3

Ag RH3

= Conflit Ag + Ac

La destruction immédiate des

globules rouges peut entraîner des complications cliniques graves

SI RAI+, NE JAMAIS TRANSFUSER AU PATIENT

L'ANTIGENE CORRESPONDANT A L'ANTICORPS

DETECTE PAR LA RAI

GR

Patient immunisé CGR phénotype RH:3 (E+)

GT RDQ : 2016

ƒLe système KEL (Kell) :

3Un antigène principal : KEL1

3L'antigğne KEL 1 prĠsent chez 9й de la population caucasoŢde est trğs immunogğne donc à tester systématiquement lors du phénotypage érythrocytaire (= phénotype RH KEL1)

3Le principe de groupage est le même que pour le système Rhésus

3Les anticorps du système KEL sont des anticorps immuns qui peuvent donner lieu à des accidents hémolytiques

ƒLes autres systèmes :

3Kidd : JK1, JK2

3Duffy : FY1, FY2

3MNS Les antigènes de ces systèmes sont moins immunogènes que les antigènes RH et KEL1

26 GT RDQ : 2016

Circulaire n°031582 du 15 décembre 2003, GBEA 5 avril 2002,

COFRAC 2012

ƒLa prescription des examens immuno-hématologiques comporte de manière lisible :

3L'identification de l'Ġtablissement et du serǀice

3L'identification du patient ͗ nom de naissance, prĠnom(s), nom d'usage, le sedže et la date de naissance

3Les examens prescrits qui sont au minimum le groupage ABO et phénotypage RH KEL1, la recherche d'anticorps irrĠguliers (RAI)

3Le nom et la signature du prescripteur

3La notion d'urgence si besoin

27

GT RDQ : 2016

28

DUPONT Jean

16/04/24 M

n p Je prélève puis je colle les étiquettes oJe compare

1." Pouvez-vous épeler votre nom

de naissance, ǀotre nom d'usage, votre prénom, votre date de naissance ? » + contrôle du sexe

2.Je vérifie que les étiquettes sont

justes

3.Je colle les étiquettes sur les

tubes pleins et sur les feuilles

GT RDQ : 2016

ƒLe prélèvement :

" Pouǀez ǀous m'EPELER ǀotre nom de naissance, nom d'usage, prĠnom, date de naissance ? » + contrôle du sexe

29 GT RDQ : 2016

ƒValidité du groupage sanguin

groupage ABO RH KEL1 effectuées sur 2 prélèvements différents, si possible par deux personnes différentes Elle est éditée par un système informatique et comporte : les coordonnées du laboratoire, le nom et la signature du biologiste, l'identitĠ complète du patient, la date de réalisation de l'edžamen, le résultat de la détermination du groupage

ABO RH KEL1

ƒPhénotype étendu

Il consiste en la recherche d'antigğnes érythrocytaires autres que ABO RH KEL1

30 GT RDQ : 2016

ƒLa recherche d'anticorps anti Ġrythrocytaires irrĠguliers ( RAI )

consiste ă rechercher la prĠsence Ġǀentuelle dans le plasma d'anticorps dirigĠs contre des

antigènes de globules rouges. Si le dépistage est positif il faut déterminer la spécificité de

ƒLa validité de cette recherche est habituellement de 3 jours (72 heures) pour la transfusion de concentrés de globules rouges (CGR)

-Le délai peut être porté à 21 jours si la RAI est négative dans le cadre de protocoles

particuliers sur indication formelle du prescripteur -Le délai peut être réduit en cas de transfusions répétées rapprochées

31 GT RDQ : 2016

ƒLe médecin prescrit une transfusion ; je vérifie la présence dans le dossier du patient de :

2 déterminations de groupage ABO RH1 et phénotype RH KEL1

1 résultat de RAI datant de moins de 3 jours (72h) avant la date prévue de

transfusion ƒSi ce n'est pas le cas, il faudra prĠleǀer les edžamens manquants, sur prescription

32 GT RDQ : 2016

9Homonymies

Absence de ǀĠrification d'identitĠ

Pré et post-étiquetage des tubes

incapable de décliner son identité

9Usurpations d'identitĠ

33 GT RDQ : 2016

9Résultat non édité informatiquement

9Absence de signature du biologiste

9Absence d'identification du laboratoire

9Absence de phénotype RH KEL1

9Carte de donneur de sang

9Etiquette de groupe collée

9Identification du patient incorrecte ͗ absence d'un des ĠlĠments

34 GT RDQ : 2016

ƒMaternité, 2 patientes hospitalisées

Mme Y, grossesse en cours hospitalisée pour bilan

ƒAppel du laboratoire : Madame Y a une hémoglobine (Hb) à 6 g/dL, discordante avec le chiffre de la veille (Hb = 12 g/dL)

ƒRĠception d'une carte de groupe pour Mme Y ͗

A RH : 1, 2, -3, 4, 5 KEL:-1

Le médecin fait immédiatement annuler tous les résultats de ces prélèvements

35 GT RDQ : 2016

ƒL'IDE a bien prĠleǀĠ Mme y mais ͗

3Elle a effectué les 2 déterminations sur le même prélèvement.

Mme Y était en réalité O RH : -1, -2, -3, 4, 5 KEL:-1 Que se serait-il passĠ si on l'aǀait transfusĠe aǀec la carte rendue ă son nom ?

Pour rappel : carte de groupe prélevée précédemment pour Mme Y : A RH : 1, 2, -3, 4, 5 KEL:-1

36 GT RDQ : 2014

A A+

GT RDQ : 2016

ƒConduite à tenir :

9Arrêt du protocole transfusionnel

9Prise en charge de la parturiente - appel du médecin

prélèvements biologiques)

9Signalement de l'ĠǀĠnement au correspondant d'hĠmoǀigilance

dans les 8 heures

37 GT RDQ : 2016

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