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Tableau 1 : Comparaison des méthodes spectrophotométrique etfluorimétrique pour le dosage de la chlorophylle dans l'eau lagonaire extraction au méthanol
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21?/02?/2003 Elle représente le plus important pigment chez les organismes photosynthétiques aérobies (excluant les cyanobactéries). La méthode de dosage par ...
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Les chlorophylles sont les pigments majeurs impliqués dans la capture des photons La chlorophylle est synthétisée et dégradée dans l'enveloppe du chloroplaste
Introduction
La photosynthèse est un mécanisme biochimique permettant aux végétaux supérieursréaction siège dans des organites propres à la cellule chlorophyllienne: les chloroplastes. De
nombreuses protéines et autres molécules contribuent au mécanisme, parmi eux les pigmentsphotosynthétiques : Chlorophylle a et b ainsi que les caroténoïdes. Ce sont les molécules
Le but de cette expérience est de quantifier par une méthode spectrophotométrique les1. Matériels et réactifs
Spectrophotomètre ;
Deux (02) mortiers et pilons ;
Une éprouvette (25, 50, 100mL);
Un papier filtre ;
Trois (03) béchers (25 et 50 mL) ;
Deux (02) erlenmeyers (25 et 50 mL) ;
Deux (02) petits entonnoirs ;
Dix (10) pipettes Pasteur ;
Cinq (05) pipettes (1, 5 et 10ml) ;
Une poire ;
Acétone (250ml) ;
Un agitateur magnétique, une tige et un barreau (aimant)2. Extraction des différents pigments photosynthétiques
(papier aluminium) afin de minimiser les risques de dégradation des pigments. Couper le matériel végétal en petits fragments; pour obtenir un mélange acétone/eau de concentration final )et broyer jusqu'à obtenir un mélange homogène ;80% et broyer de nouveau soigneusement ;
Laisser décanter quelques minutes (10min);
Récupérer le surnageant dans un erlen 10mL (de préférence, filtrer sur papier filtre et recueillir la solution acétonique de chlorophylles) et compléter à 10mL avec de lFermer avec du parafilm et agiter.
3. Dosage des pigments totaux
3.1 Rappel
La lumière blanche est composée de différentes radiations visibles dont la longueur -800 nm (rouge foncé). Une substance colorée absorbepréférentiellement certaines radiations de la lumière blanche. Cette propriété lui donne sa
couleur. Si cette substance est un photorécepteur, les radiations absorbées peuvent être celles
qui agissent sur lui et entraînent une photo-réaction.3.2 Protocole
-Fermer la fiole avec du parafilm et agiter; -régler le chaque lo3.3 Interprétations des résultats
loi de BEER-LAMBERT permettent de calculer les concentrations en pigments :Ca= 12.7 A663 2.63 A645
Cb= 22.9 A645 4.68 A663en mg.L-1
Ccar= 5 A460 (3.19Ca+ 130.3 Cb)/200
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