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? La Chromatographie sur Couche Mince (C C M) peut être utilisée pour analyser de tels mélanges ? On se propose de découvrir cette technique en réalisant
Quel est le principe de chromatographie sur couche mince ?
La chromatographie sur couche mince est la plus simple des méthodes chromatographiques. Elle consiste à placer sur une feuille (papier, silice ou autre, voir plus loin) une tache et de la laisser éluer en la trempant dans un solvant ou un mélange de solvant (appelé éluant), l'éluant diffuse le long du support.Quel est le but de la CCM ?
La chromatographie sur couche mince (abréviation fran?ise: CCM / anglaise: TLC «Thin Layer Chromatography») est une technique chromatographique dite planaire, couramment utilisée pour séparer des composants dans un but analytique ou de purification.Comment se fait la chromatographie sur papier ?
Le principe de la chromatographie sur papier est simple: la substance qu'on veut analyser est déposée sur la ligne de départ tracée sur un papier buvard. Celui-ci est tenu verticalement. L'eau monte par capillarité le long du papier et entraîne avec elle les substances.- On détermine le ratio frontal Rf = L1/L2 étant le rapport entre la distance parcourue par le soluté divisé par la distance parcourue par le front du solvant.
Thème Santé
TP 13 : CCM (Chromatographie sur Couche Mince)
1) Objectif
Savoir réaliser et interpréter une chromatographie sur couche mince (mélanges colorés et incolores).
2) Principe de la CCM
Chromatographie vient du grec " Khrôma » (couleur) et " Graphein » (écrire). Cette technique permet de
séparer les espèces chimiques présentes dans un mélange homogèneéchantillons à tester, ainsi que les échantillons témoins, sont disposés sur une plaque de chromatographie
(phase fixe) plongée dans un éluant (phase mobile).3) CCM de colorants alimentaires
a) Protocole expérimental Méthode de préparation de la CCM : http://itarride.chez-alice.fr/simul_anim/prepa-chromato.swfLa cuve à élution est un bécher
haut contenant un liquide appelé " éluant » sur une hauteur0,5 cm.
Elle doit être fermée de manière
à c
La plaque de chromatographie est
sur . Il faut la prendre sur les côtés pour éviter les traces de doigts quiA 1 cm du bord inférieur, tracer
délicatement au crayon un trait Les dépôts ne devront pas tremperMarquer par des croix ou des
traits les emplacements correspondant aux échantillons à déposer en gardant un espace minimum avec les bords de la plaque. Repérer par un chiffre ou une lettre les emplacements.Déposer les échantillons avec une
pipette pasteur ou un pic en boisEventuellement, sécher les dépôts
avec un sèche-cheveux.Introduire délicatement la
plaque dans la cuve et veiller à ce que la ligne de dépôt ne soitRefermer la cuve, ne plus la
toucher et laisser éluer.Thème Santé
b) Résultats et exploitationsLes échantillons te
B V R J
Interpréter le chromatogramme
hauteurs différentes. ˬoit sa grosseur et sa forme) correspond à une espèce chimique. même espèce chimique.Remarque :
Dans le cas où les dépôts ne sont pas colorés (ceux qui est le cas la plupart du temps), pour faire apparaître
les taches (révélation), on place le chromatogramme sous une lampe UV : les espèces chimiques absorbant
introduire la plaque dans des récipients satur4) CCM de médicaments
Visionner la vidéo " faux médicaments ».
P chimiques présentes dans le médicament " Aspégic ».Compléter le chromatogramme ci-.
Thème Santé
Sur la paillasse professeur :
Éluant colorants alimentaires :
600 40 g.L1 + 120 mL
Éluant médicaments :
ormique (ou méthanoïque HCO2H) + 280 mL de cyclohexane C6H6 + 420 mL3COOCH2CH2CH2CH3)
Ethanol
5 béchers de 250 mL
UPSA, Aspirine du Rhône, Aspirine pH 8, Actron, DolipranePapier Whatman
Plaques CCM
Ciseaux
5 Pipettes Pasteur
Agitateur
Lampe UV
Récipient contenant du sable et du diiode I2
Sur les paillasses élève :
3 colorants alimentaires
piques à apéritifBocal à chromato + couvercle
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