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? La Chromatographie sur Couche Mince (C C M) peut être utilisée pour analyser de tels mélanges ? On se propose de découvrir cette technique en réalisant 

  • Quel est le principe de chromatographie sur couche mince ?

    La chromatographie sur couche mince est la plus simple des méthodes chromatographiques. Elle consiste à placer sur une feuille (papier, silice ou autre, voir plus loin) une tache et de la laisser éluer en la trempant dans un solvant ou un mélange de solvant (appelé éluant), l'éluant diffuse le long du support.
  • Quel est le but de la CCM ?

    La chromatographie sur couche mince (abréviation fran?ise: CCM / anglaise: TLC «Thin Layer Chromatography») est une technique chromatographique dite planaire, couramment utilisée pour séparer des composants dans un but analytique ou de purification.
  • Comment se fait la chromatographie sur papier ?

    Le principe de la chromatographie sur papier est simple: la substance qu'on veut analyser est déposée sur la ligne de départ tracée sur un papier buvard. Celui-ci est tenu verticalement. L'eau monte par capillarité le long du papier et entraîne avec elle les substances.
  • On détermine le ratio frontal Rf = L1/L2 étant le rapport entre la distance parcourue par le soluté divisé par la distance parcourue par le front du solvant.
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Méthodes d'analyse instrumentales

3ème Année Licence BGV / BPV

TP 1 : Chromatographie des sucres sur couche mince (CCM)

Principe

Dans la CCM

mince à des vitesses différentes, permettant ainsi leur séparation. Ce phénomène utilise la

les substances qui constituent le mélange, vis à vis de deux qui entraîne les substances le long de la phase fixe.

Protocole

Matériels et produits

Matériels Produits

-Plaques CCM. - Becher. - pipette pasteur. -Eprouvettes graduées de 100ml et 25mL -Sèche-cheveux. -une cuillère spatule -4 tubes à assai vides en verre avec un bouchon -Une balance de précision au 100 ème près -Cuve -Sucres témoins (glucose, lactose, Maltose, saccharos) de concentration de 20g/l . -Révélateur (KMnO4 ). -Eluant (chloroforme /Méthanol / eau) = (6/4/1). -Lait et jus dorange.

Mode opératoire

-Verser l'éluant dans une cuve à élution sur une hauteur de 0,5 cm. - presser légèrement le fruit au-dessus du bécher de 25mL afin de le recueillir pour la chromatographie : -préparer la plaque CCM : ¾ Tracer un trait au crayon à 1 cm du bord inférieur sur chaque plaque de gel de silice et on place 3 repères équidistants ¾ Déposer les témoins et les échantillons n capillaire pour chaque solution, 3 gouttes pour chaque solution.,

¾ Sécher -cheveux.

-Introduire la plaque dans la cuve . -Lorsque le solvant atteint 0,5cm du bord supérieur, sortir la plaque de la cuve et marquer immédiatement le front du solvant, ensuite sécher vo - cheveux.

-Introduire la plaque dans un bac qui contient le révélateur pendant 2 secondes et sécher à

-cheveux.

Méthodes d'analyse instrumentales

3ème Année Licence BGV / BPV

-Cercler les tâches et pointer leurs centres.

Questions

a) Calculer le rapport frontal moyen de chaque tache de migration. b) Interpréter vos résultats et noter toutes vos observations et conclure.quotesdbs_dbs29.pdfusesText_35
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