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TP de chimie : LA CHROMATOGRAPHIE

TP de chimie : LA CHROMATOGRAPHIE

I) INTRODUCTION

La chromatographie a été découverte par le botaniste russe TSWEIT en 1903. Elle permet de séparer les

constituants d'un mélange coloré. Un solvant (ou éluant) appelé "phase mobile" qui pénètre dans un milieu poreux

(alumine, gel de silice, papier filtre...) appelé "phase fixe" entraîne par capillarité les substances, mais pas à la

même vitesse. Divers procédés peuvent être utilisés : - chromatographie sur colonne ; - chromatographie en phase gazeuse ; - chromatographie sur couche mince ; - chromatographie sur papier.

Ce sont ces deux derniers procédés, les plus simples à mettre en oeuvre que nous allons utiliser. Ils vont nous

permettre de séparer les colorants ou pigments d'un mélange et de trouver quel est le principal constituant de

l'huile essentielle d'écorce d'orange. II) SÉPARATION DES COLORANTS PAR CHROMATOGRAPHIE SUR PAPIER

Les colorants de synthèse utilisés dans les produits alimentaires sont nombreux ; ils sont répertoriés par un

numéro de la série E 100 suivant leur couleur et leur nature. La chromatographie sur papier des colorants

alimentaires permet d'étudier leur vitesse de migration et de déterminer la composition d'un mélange de

colorants. a) Utilisez l'eau salée comme éluant.

b) Dessinez à la règle un trait au crayon de bois appelé "ligne de dépôt" à 1cm du bord de la feuille de

papier-filtre. c) Tracez sur ce trait 4 croix équidistantes sous lesquelles figurent le s lettres J, B, V, R.

d) Déposez à l'aide d'une pique apéritif sur chaque croix une goutte de colorant à étudier :

colorant jaune (J) : E 102 (tartrazine) ; colorant bleu (B) : E 131 (bleu patenté) ; colorant vert émeraude(V) ; colorant rouge (R) : E 122 (azorubine). e) Versez dans un bécher l'éluant (sur 5 mm de hauteur).

f) Placez la bande dans le bécher de telle sorte que le bas de la bande de papier plonge dans l'éluant sans

que les taches de colorant ne trempent dedans.

g) Laissez monter l'éluant jusqu'à ce que le front de l'éluant arrive à 1 cm de l'extrémité supérieure du

papier filtre. h) Retirez le papier et séchez-le avec un sèche cheveux. i) Ce que l'on obtient est un "chromatogramme". Collez-le ou dessinez-le sur votre compte-rendu.

j) Que remarquez-vous quant à la hauteur de chaque colorant ? Proposez un classement pour la vitesse de

montée des colorants. Comment expliquez-vous ce phénomène ? k) Que pouvez-vous dire du colorant vert ? Expliquez. III) SÉPARATION DES COMPOSANTS DE L'HUILE ESSENTIELLE D'ÉCORCE D'ORANGE PAR CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE OU CCM (PLAQUE DE SILICE) a) Utilisez le cyclohexane comme éluant.

b) Dessinez au crayon de bois la "ligne de dépôt" à 1 cm du bord de votre plaque de silice.

c) Tracez sur ce trait 2 croix équidistantes sous lesquelles figurent le s lettres HE, L. d) Déposez à l'aide d'une pique apéritif sur chaque croix une goutte : d'huile essentielle d'écorce d'orange (HE) ; de limonène (L).

e) Versez dans un bécher haut l'éluant (sur 5 mm de hauteur) et couvrez ce bécher d'un couvercle pour ne

pas que l'éluant s'évapore.

f) Placez la plaque dans le bécher le plus haut de telle sorte que le bas de la plaque touche l'éluant sans que

les taches ne trempent dans l'éluant et remettez le couvercle.

g) Laissez monter l'éluant jusqu'à ce que le front de l'éluant arrive à 1 cm de l'extrémité supérieure de la

plaque de silice. h) Retirez la plaque. i) Révélez votre chromatogramme à la lampe UV.

j) Venez tremper la plaque dans un révélateur : le permanganate de potassium violet et séchez-la avec un

sèche cheveux. k) Collez votre chromatogramme ou dessinez-le sur votre compte-rendu. l) Que pouvez-vous déduire de votre chromatogramme ? Expliquez.quotesdbs_dbs30.pdfusesText_36
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