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29 mar 2018 · I E Le test d'agglutination à billes de latex (ou LAT pour Latex Agglutination Test) Protocole d'adsorption des anticorps monoclonaux
203: Agglutination Assays - Biology LibreTexts
Agglutination is defined as specific clumping of particulates such as cells or cell-sized objects Antibodies and lectins are two types of reagents which because they bind to specific targets can cause agglutination of particulates Agglutination occurs when the reagent either antibody or
HEMAGGLUTINATION ASSAY - KSU
Agglutination is demonstrated either using red blood cells or latex beads as the carrier which increases agglutination visibility hence sensitivity The direct haemagglutination (HA) If the antigen interacts directly with the carrier red blood cells causing hemagglutination
What is agglutination test?
Agglutination can be used as an indicator of the presence of antibodies against bacteria or red blood cells. Agglutination assays are usually quick and easy to perform on a glass slide or microtiter plate (Figure 20.3. 1 ).
Which dilution produces Visible agglutination?
The highest dilution producing visible agglutination is the titer. The assay is carried out in a microtiter plate with V- or round-bottomed wells. In the presence of agglutinating viruses, the red blood cells and virus clump together and produce a diffuse mat over the bottom of the well.
What is an indirect agglutination assay?
This technique is called an indirect agglutination assay(or latex fixation assay), because the agglutination of the beads is a marker for antibody binding to some other antigen (Figure 20.16). Indirect assays can be used to detect the presence of either antibodies or specific antigens.
What is the difference between agglutination and hemagglutination?
INTRODUCTION Agglutination is demonstrated either using red blood cells or latex beads as the carrier which increases agglutination visibility, hence sensitivity. The direct haemagglutination (HA) If the antigen interacts directly with the carrier, red blood cells causing hemagglutination.
![[PDF] Pastorex Meningitis - Bio-Rad](https://pdfprof.com/Listes/17/35448-1761607_881193_FR.pdf.pdf.jpg "[PDF] Pastorex Meningitis - Bio-Rad")
[FR] 1 Pastorex Meningitis
2561607 61611 61616
61608 61613 61618
61610 61614
qualitative des antigènes solubles de Neisseria meningitidis des groupes A, C, Y/W135 et B/E. coli K1 ; dHaemophilus influenzae type b, Streptococcus pneumoniae et des streptocoques du groupe B dans le liquide céphalo-rachidien et les hémocultures ; et Neisseria meningitidis des groupes A, C, et B/E. coli K1, Haemophilus influenzae type b, Streptococcus pneumoniae ainsi que des streptocoques du groupe B à partir de colonies isolées sur milieu de culture gélosé.881193 2017/02
TABLE DES MATIÈRES
1. APPLICATION ................................................................................................................................2
2. RÉSUMÉ ET EXPLICATION DU TEST .....................................................................................2
3. PRINCIPE DU TEST .....................................................................................................................2
4. RÉACTIFS ......................................................................................................................................3
5. TILISATION ................................................................................................5
6. ÉCHANTILLONS ............................................................................................................................6
7. PROCÉDURE .................................................................................................................................6
8. LIMITES DU TEST ........................................................................................................................8
9. CARACTÉRISTIQUES DE PERFORMANCE ...........................................................................9
10. RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES ................................................................................... 13
[FR] 21. APPLICATION
Pastorex pour le diagnostic rapide de la méningite bactérienne par :- la détection qualitative des antigènes solubles de Neisseria meningitidis des groupes A, B/E. coli K1, C,
Y/W135, dHaemophilus influenzae type b, du Streptococcus pneumoniae et des streptocoques du groupe B,
dans le liquide céphalo-rachidien et les hémocultures ; - lde Neisseria meningitidis des groupes A, B/E. coli K1 et C, Haemophilus influenzae type b, duStreptococcus pneumoniae et des streptocoques de groupe B, à partir de colonies isolées suspectes, sur
milieu de culture gélosé.2. RÉSUMÉ ET EXPLICATION DU TEST
Malgré les progrès réalisés en diagnostic et pour le traitement des infections, les méningites bactériennes
demeurent une cause importante de morbidité etétiologique reste capitale pour la prise en charge médicale et mettre en place le traitement approprié [1, 2, 3].
Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis et Haemophilus influenzae b ont été identifiés comme les
principaux organismes pathogènes responsables de la méningite bactérienne [4]. Le streptocoque du groupe B
[5] et Escherichia coli K1 [6,7] sont les principaux agents pathogènes bactériens responsables de la méningite
chez les nouveau-nés et les prématurés. La mise en évidence de lsaccharidique spécifique de
N. meningitidis du groupe B, qui identique à celui de E. coli K1, permet de diagnostiquer les méningites à E. coli
chez les nouveau-nés, parmi lesquelles environ 80% sont de souche K1 [6].Streptococcus pneumoniae [8] et Neisseria meningitidis sont les principaux agents pathogènes chez les enfants
et les adultes. Les infections dues à Haemophilus influenzae b ont tendance à disparaître en Europe depuis la
mise en place de la vaccination systématique [2].Le diagnostic précoce permet de mettre en place rapidement la prise en charge thérapeutique et les mesures
préventives [9, 10reste l'analyse du LCR [10]. La coloration de Gram met en évidence , et la culture bactérienne est positive dans environ 80% deséchantillons de LCR. Cependant, en cas de mise sous antibiothérapie probabiliste, la sensibilité de ces deux tests
est inférieure à 50% [2, 3]. confirmer le diagnostic, mais elle nécessite 18 à 24 du tout De plus, de faux résultats négatifs peuvent être obtenus conditions non satisfaisantes, ou si une antibiothérapie a été mise en place on [9, 10, 11].fournir un diagnostic plus rapidement, en particulier dans le LCR, pendant la phase d12,13]. Pastorex
Meningitis est un test simple. Il nécessite un matériel de laboratoire de base, est facile à effectuer et permet de
détecter les sérogroupes de bactéries responsables de la méningite en seulement quelques minutes [14, 15, 16].
pour définir le vaccin à prescrire [10, 13, 14, 15, 16, 17].3. PRINCIPE DU TEST
Le test Pastorex Meningitis est basé avec une interprétation visuelle. Les antigènes polysaccharidiques spécifiques des de particules de latex colorées recouvertes de la souche. En présence de ces antigènesspécifiques, la réaction se traduit par une agglutination visible des particules de latex colorées
[FR] 34. RÉACTIFS
1.1. Description
A) Kit Pastorex Meningitis, code 61607 (25 tests):Identification Description Présentation
R1 N. meningitidis B/E. coli K1
Latex Suspension de latex rouge sensibilisé avec un anticorps monoclonal de souris spécifique deN. meningitidis du groupe B/E. coli K1
Conservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine0,40 ml
1 flacon compte-gouttes
à bouchon blanc,
prêt R2N. meningitidis B/E. coli K1
Negative control
Latex Suspension de latex rouge sensibilisé avec un anticorps monoclonal de souris spécifique de tétanique Conservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine0,40 ml
1 flacon compte-gouttes
à bouchon
transparent,R3 H. influenzae b
Latex Suspension de latex blanc sensibilisé avec des anticorps de lapin spécifiques H. influenzae b Conservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine0,40 ml
1 flacon compte-gouttes
à bouchon orange,
pR4 S. pneumoniae
Latex Suspension de latex vert sensibilisé avec des anticorps de lapin spécifiques de S. pneumoniae Conservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine0,40 ml
1 flacon compte-gouttes
à bouchon vert,
pR5 Streptococcus B
Latex Suspension de latex jaune sensibilisé avec des anticorps de lapin spécifiques des streptocoques du groupe B Conservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine0,40 ml
1 flacon compte-gouttes
à bouchon jaune,
pR6 N. meningitidis A
Latex Suspension de latex bleue sensibilisé avec des anticorps de lapin spécifiques de N. meningitidis du groupe A Conservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine0,40 ml
1 flacon compte-gouttes
à bouchon bleu,
pR7 N. meningitidis C
Latex Suspension de latex rouge sensibilisé avec des anticorps de lapin spécifiques de N. meningitidis du groupe C Conservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine0,40 ml
1 flacon compte-gouttes
à bouchon rouge,
pR8 N. meningitidis Y/W135
Latex Suspension de latex rose sensibilisé avec des anticorps de lapin spécifiques de N. meningitidis Y/W135 Conservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine0,40 ml
1 flacon compte-gouttes
à bouchon prune,
R9 Negative polyvalent control
Latex Suspension de latex prune sensibilisé avec des immunoglobulines IgG provenant de lapins non immunisés Conservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 % de sulfate de gentamicine0,40 ml
1 flacon compte-gouttes
à bouchon
transparent,R10 Positive polyvalent control
Antigenic extract
Extrait antigénique contenant les antigènes polysaccharidiques de N. meningitidis A, C, B, Y/W135,H. influenzae b, streptocoque du groupe B et
S. pneumoniae.
Conservateur : 0,01 % de Bronidox
1 flacon
antigénique lyophiliséà reconstituer
avec 1,0 (volume suffisant pour18 réactions)
- Cards cercles, chacun identifié pour son réactif au latex) 30 unités - Sticks Bâtonnets mélangeurs jetables 3 x 100 unités [FR] 4 B) Latex individuels Pastorex Meningitis (25 tests chacun):C) Pastorex Meningitis Control Kit, code 61618, pour tester les réactifs latex (pour 2 x 25 tests) :
Identification Description Présentation
R2N. meningitidis B/E. coli K1
Negative Control
LatexSuspension de latex rouge sensibilisé avec un
anticorps monoclonal de souris spécifique deConservateur : 0,3 % de ProClin 300 et
0,005 % de sulfate de gentamicine
2 x 0,40 ml
2 flacons compte-gouttes à
bouchon transparent,R9 Negative polyvalent control
LatexSuspension de latex prune sensibilisé avec des
immunoglobulines IgG provenant de lapins non immunisésConservateur : 0,3 % de ProClin 300 et
0,005 % de sulfate de gentamicine
2 x 0,40 ml
2 flacons compte-gouttes à
bouchon transparent, pR10 Positive polyvalent control
Antigenic extract
Extrait antigénique contenant les antigènes polysaccharidiques de N. meningitidis A, C, B,Y/W135, H. influenzae b, de streptocoques du
groupe B et S. pneumoniae.Conservateur : 0,01 % de Bronidox
2 flacons
lyophilisé à reconstituer avec 1, (volume suffisant pour 18 réactions) - Cards cercles, chacun identifié pour son réactif au latex) 2 x 20 cartes - Sticks Bâtonnets mélangeurs jetables 2 x 100 bâtonnets Code produit Identification Description Présentation61611 R1 N. meningitidis B/E. coli K1
Latex Suspension de latex rouge sensibilisé avec un anticorps monoclonal de souris spécifique deN. meningitidis du groupe B/E. coli K1
Conservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 %
de sulfate de gentamicine0,40 ml x 1 flacon
compte-gouttes à bouchon blanc /61616 R3 H. influenzae b
Latex Suspension de latex blanc sensibilisé avec des anticorps de lapin spécifiques H. influenzae bConservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 %
de sulfate de gentamicine0,40 ml x 1 flacon
compte-gouttes à bouchon orange /61614 R4 S. pneumoniae
LatexSuspension de latex vert sensibilisé avec des
anticorps de lapin spécifiques de S. pneumoniaeConservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 %
de sulfate de gentamicine0,40 ml x 1 flacon
compte-gouttes à bouchon vert / prêt61613 R5 Streptococcus B
Latex Suspension de latex jaune sensibilisé avec des anticorps de lapin spécifiques des streptocoques du groupe BConservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 %
de sulfate de gentamicine0,40 ml x 1 flacon
compte-gouttes à bouchon jaune /61608 R6 N. meningitidis A
Latex Suspension de latex bleue sensibilisé avec des anticorps de lapin spécifiques de N. meningitidis du groupe AConservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 %
de sulfate de gentamicine0,40 ml x 1 flacon
compte-gouttes à bouchon bleu61610 R7 N. meningitidis C
Latex Suspension de latex rouge sensibilisé avec des anticorps de lapin spécifiques de N. meningitidis du groupe CConservateur : 0,3 % de ProClin 300 et 0,005 %
de sulfate de gentamicine0,40 ml x 1 flacon
compte-gouttes à bouchon rouge [FR] 51.2. Stockage et conditions de manipulation
Les réactifs peuvent être utilisés la ails soient conservés à +2-8 y compris après ouverture).NE PAS CONGELER LES RÉACTIFS LATEX.
bouchons des flacons compte-gouttes soient bien fermés ou dessèchement des réactifs.Stocker les flacons de réactifs latex à la verticale (dans la mousse d'origine fournie dans le kit).
Identification Conservation (après première ouverture)R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7,
R8, R9 Après première ouverture +2-8°C.
R10 Après reconstitution : 1 mois à +2-8°C ils sont congelés à -20°C (ne pas recongeler une fois décongelés).5. PRÉCAUTIONS
Pour le diagnostic in vitro. Pour un usage médical professionnel.2.1. sécurité
La manipulation de ce test est exclusivement réservée à un personnel qualifié formé aux procédures de
laboratoire et connaissant les risques potentiels. Porter des vêtements de protection adaptés, des gants et
des lunettes ou masque, et procéder de manière appropriée en appliquant les Bonnes Pratiques de
Laboratoire.
Éliminer tous les échantillons et le matériel utilisé pour réaliser le test comme des déchets infectieux. Les
déchets de laboratoire, chimiques ou biologiques dangereux doivent être manipulés et éliminés conformément
à toutes les réglementations locales, régionales et nationales.Pour connaître les recommandations liées aux risques et les précautions relatives à certains produits
chimiques contenus dans ce kit, consulter le(s) pictogramme(s) figurant sur les étiquettes et les informations
fournies à la fin de cette notice. La fiche de données de sécurité (FDS) est disponible sur www.biorad.com.
2.2. Précautions relatives à la procédure
2.2.1. Préparation
mentionné veiller àadapter la vitesse optimale pour le test avec le réactif R10, afin de garantir une agglutination homogène dans
la totalité des cercles. Il esnuellement.Éviter impérativement
rotation 'est pas exposé au fluxEn cas -e étuve sèche,
que la température de 100°C est bien atteinteAvant utilisation, patienter 10 minutes pour permettre aux réactifs de se stabiliser à température ambiante
(18-25°C).Il est conseillé de ranger les réactifs latex selon le plan de distribution inscrit sur les cartes.
Ne pas toucher la surface réactionnelle
Le réactif R10 doit être reconstitué avecUtiliser les bâtonnets en plastique fournis dans le kit pour mélanger les réactifs avec les échantillons ou les
colonies bactériennes.Ne pas utiliser de réactifs périmés.
2.2.2. Mode opératoire
100°C soient stabilisés
-marie pour chauffer les échantillons de LCR à 100°C, il est recommandéAgiter doucement les réactifs avant chaque utilisation. Puis vérifier que la suspension de latex reste
homogène avant utilisation.Maintenir les flacons compte-gouttes à la verticale pour garantir un dépôt correct des gouttes.
Essuyer lcompte-gouttes du réactif des gouttes correctement calibrées. Changer de bâtonnet mélangeur pour chaque réaction.Éliminer tous les matériaux jetables utilisés dans une poubelle autoclavable ou un bac désinfectant.
[FR] 66. ÉCHANTILLONS
Échantillons de liquide céphalo-rachidien : une fois prélevés, les échantillons de LCR doivent être testés aussi
rapidement que possible. Lorsque ce le cas, il est possible deune température comprise entre +2 et +8°C. Les analyses bactériologiques (cultures bactériennes) doivent
être effectuées prioritairement
pour effectuer le test Pastorex Meningitis est de 500 µl. dans les échantillons de LCR contenant un taux anormal de concentration en hémoglobine mg/mL, imitant une hémolyse).Hémoculture positive : les échantillons doivent être testés immédiatement. Certains milieux d'hémocultures
peuvent entraîner des réactions non spécifiques ou des interprétations erronées. Pour anticiper ce type de
situations, il est recommandé de réaliser un contrôle négatif en utilisant une hémoculture inoculée avec du
sang stérile ou avec un microorganisme autre que ceux détectés par Pastorex Meningitis.Groupage de bactéries provenant de colonies isolées : le test doit être effectué avec des colonies fraîches et
bien isolées, sur un milieu de culture gélosé.7. PROCÉDURE
4.1. Matériel fourni
Tout le matériel figurant dans le paragraphe " Réactifs » et les contrôles correspondants
quotesdbs_dbs31.pdfusesText_37[PDF] tp svt groupe sanguin
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