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FICHE TECHNIQUE TP HISTOLOGIE - PREPARATION DUNE

PREPARATION D'UNE LAME HISTOLOGIQUE -. OBJECTIFS SPECIFIQUES : ? Décrire les étapes de prise en charge d'un prélèvement histologique humain.



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1- Préparation des coupes pour observation au microscope optique. Pour l'étude histologique classique la préparation des coupes fines se fait en plusieurs 



TP 7 Histologie Les techniques de MO et de ME sont utilisées en

diverses (préparation des échantillons) que l'on applique au matériel. étapes successives : fixation inclusion



MODULE 1 – Introduction Comment préparer un prélèvement de

Dans cette vidéo nous allons parler d'aspects plus techniques liés à l'histologie. Savez-?vous comment on obtient une lame histologique comme celle-?ci?



Les techniques de préparation des coupes pour les microscopies

Le plus souvent le matériel histologique (= cellules contenues dans un tissu) est fixé



Aperçu des principales colorations histologiques et intérêt pour le

permettant d'obtenir des sections (coupes histologiques) de 3 à 5 microns d'épaisseur. http://www.dako.com/08066_12may10_webchapter15.pdf.



Préparation des tissus : information générale

Plateforme d'Histologie IRIC – Local 3440. Préparation des tissus : information générale. Tissus inclus dans la paraffine.



HISTOLOGIE

3.1 Préparation des échantillons pour la microscopie électronique à transmission (ou MET) Figure 1.2 Préparation des coupes histologiques en paraffine.



La technique Prélèvement

Il est indispensable de fixer un prélèvement avant analyse histologique Le bloc est coupé en fines tranches de 3 à 4 ?m. Technicien.



PRÉPARATIONS MICROSCOPIQUES

72100 Histologie: Cellules animales et division cellulaire Les bois coupe transversale



Chapitre II : Méthodes d’étude de la cellule TD N°2

Pour l’étude histologique classique la préparation des coupes fines se fait en plusieurs étapes : a) Prélèvement Le prélèvement effectué sur un organe doit se faire aussi délicatement que possible afin de ne pas meurtrir les tissus Une fois obtenu ce prélèvement doit immédiatement être immergé dans un



FICHE TECHNIQUE TP HISTOLOGIE PREPARATION D’UNE LAME

fixer à une molécule (antigène) de la coupe histologique Ces anticorps produits chez l’animal à partir de la protéine purifiée est couplé à: une enzyme (peroxydase) qui catalyse une réaction avec production de couleur un marqueur (fluorophore) le plus souvent fluorescent On parle alors d’immunofluorescence



Les colorations histologiques - Université Paris-Saclay

Le plus souvent le matériel histologique est fixé inclus coupé et coloré afin de pouvoir l’observer au microscope Le matériel peut être prélevé par biopsie ou provenir d’une pièce opératoire ou d’une autopsie La fixation a pour buts la conservation des structures et le durcissement des tissus Elle doit se faire



1 Méthodes d'études en histologie - editions-ellipsesfr

B La congélation permet la conservation de pièces histologique qui pourront servir plusieurs années après encore à des études moléculaires et enzymatiques C Une coupe et une coloration par l’hématéine éosine safran (HES) peuvent être réalisées sur un bloc de tissu fixé par le liquide de Bouin inclus en



FICHE DE TD D’HISTOLOGIE : TISSU OSSEUX & OSSIFICATION

Titre : Coupe Histologique transversale montrant un os compact (système Haversien) Coloration : Os déshydraté traité à l’encre de Chine Interprétation: Il s’agit d’une section transversale d’un os compact montrant des ostéones ou systèmes de canaux haversiens ainsi que des lamelles interstitielles

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Cours de Biologie Cellulaire Enseignant responsable / Dr. ZOUAGHI Youcef

Année universitaire 2020/2021 Dr. ZOUAGHI Youcef Page 1

1- Préparation des coupes pour observation au microscope optique

a) Prélèvement

Le prélèvement effectué sur un organe, doit se faire aussi délicatement que possible afin de ne pas

meurtrir les tissus. Une fois obtenu, ce prélèvement doit immédiatement être immergé dans un

grand volume de liquide fixateur. b) Fixation La fixation a pour but la conservation des structures et le durcissement des pièces.

Les liquides fixateurs les plus utilisés en pratique courante sont le formol ou le liquide de Bouin

varient selon le volume des prélèvements. On recommande un volume de fixateur égal à 5 fois le

volume du prélèvement. c) Déshydratation vu que la paraffine est hydrophobe. d) Inclusion (Enrobage)

utilisé est la paraffine. Le prélèvement baigne dans de la paraffine fondue (chauffée à 56° C) donc

est coulée dans un petit moule en métal " barres de Leuckart ». Après refroidissement, on se

incluse. e) Coupe (Microtomie) Le passage du bloc de paraffine dans un microtome qui permet de réaliser des tranches de section

de 2 à 5 µm d'épaisseur disposées en série régulières sous forme de rubans. Les coupes sont

recueillies sur des lames de verre. f) Déparaffinage Éliminer la paraffine en passant les lames dans des bains de toluène ou de xylène. g) Réhydratation h) Coloration tissulaires. TD N°2 : Techniques de préparation des coupes histologiques

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Année universitaire 2020/2021 Dr. ZOUAGHI Youcef Page 2 i) Montage et observation microscopique

toluène), les coupes colorées sont montées entre lame et lamelle avec une résine synthétique "

lien : https://www.youtube.com/watch?v=glgxx6_J6V0&feature=youtu.be]. Figure1 : Préparation des coupes pour observation au microscope optique

2-Préparation des coupes pour observation au microscope électronique

La séquence de manipulation est analogue à celle qui a été exposée pour la microscopie optique.

a) Fixation

Elle se fait habituellement dans la glutaraldéhyde C5H8O2, suivie d'une post-fixation à l'acide

b) Déshydratation

Les échantillons vont être passés dans des concentrations croissantes d'éthanol puis dans l'oxyde

de propylène.

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Année universitaire 2020/2021 Dr. ZOUAGHI Youcef Page 3 c) Inclusion

Les échantillons sont inclus dans une résine (araldite) qui permet une solidification de

d) Coupe (Ultramicrotomie)

couteau de verre ou de diamant qui permet d'obtenir des coupes ultrafines d'environ 80 nm

d'épaisseur. e) Contraste Les coupes cellulaires sont recueillies sur une grille en cuivre. La grille est trempée dans une

solution de métaux lourds (l'acétate d'uranyle et citrate de plomb) pour noircir les structures

cellulaires et augmenter le contraste. La grille est ensuite introduite dans le MET pour Figure2 : Préparation des coupes pour observation au microscope électronique à transmissionquotesdbs_dbs32.pdfusesText_38
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