[PDF] Rédaction manuscript these toxicité testiculaire chez le rat

View - Download Rédaction manuscript these

Previous PDF

Next PDF

UNIVERSITÉ PARIS-SUD 11

ECOLE DOCTORALE :

INNOVATION THÉRAPEUTIQUE ͗ DU FONDAMENTAL A L'APPLIYU

PÔLE : PHARMACOLOGIE ET TOXICOLOGIE

DISCIPLINE : Biologie Cellulaire et Moléculaire

ANNÉE 2008 - 2011 SÉRIE DOCTORAT N° 1131

THÈSE DE DOCTORAT

soutenue le 18/11/2011 par

Sophie LUDWIG

Comportement d'un ΗPerturbateur EndocrinienΗ et d'un "non Perturbateur Endocrinien" vis-à-vis de la toxicité testiculaire chez le rat

Directeur de thèse : Marc PALLARDY Professeur, INSERM UMR-S 996, Université Paris-Sud

Sophia Antipolis

Composition du jury :

Président du jury : Moïse PINTO Professeur, Université Paris-Sud

Rapporteurs : Robert BAROUKI Professeur, INSERM UMR-S 747, Université

Paris Descartes

René HABERT Directeur de Recherches, CEA - UMR 967,

Fontenay-aux-Roses

2

REMERCIEMENTS

expérience inoubliable. Je remercie les Professeurs Robert Barouki et René Habert pour avoir accepté de respectueux. assuré de ma respectueuse considération. projet de recherche, malgré la distance qui nous a éloignés. Merci à Helen Tinwell pour son encadrement tout au long de ces trois années de pour lui exprimer toute ma gratitude et toute ma reconnaissance pour son soutien scientifique

méritait un véritable investissement. Tu as été une directrice hors pair, et la confiance que tu

3 Je remercie également David Rouquié qui a joué un rôle clé durant ma thèse. Merci pour ton soutien, ton enthousiasme de tout instant et tes conseils scientifiques avisés. Nos biologie moléculaire et a su me faire partager ta passion pour ce domaine. Ces années de thèse ont été riches en émotions et en rencontres, tant sur le plan

Un grand Merci.

Daniel. Ceci restera gravé. Vous êtes les bienvenus en Alsace, où je vous promets, entre

merci pour ton exubérance, et ton côté tellement décalé : un vrai ouragan dans un monde

Une pensée affectueuse pour mes "co-galériens", Ihab et Céline, les deux autres thésards, avec qui nous formions le trio infernal. En particulier, un grand merci à Céline,

dans les magasins et à la plage, et pour tous vos soutiens professionnels, mais surtout

4 personnels. Céline, ta disponibilité, ton assistance pour les puces, ta joie de vivre communicative, nos délires, et je dois surement oublier bon nombre de tes qualités : pour

plage, shopping et films, je te remercie pour ta gaieté et surtout ta présence : cette expérience

être efficace dans son travail, et dieu sait que je lui en ai demandé beaucoup (broyage de testicules !). Devenue une collègue, nos fous rires et discussions partagés (scientifiques ou non) vont me manquer. Ces trois drôles de dames ont bien égayé mon quotidien et vont distances qui nous sépareront. Vous connaitre a été pour moi un grand plaisir.

notamment Dominique, Annelise et Maud. Maud, tu as toujours répondu présente à mes

et surtout ton amitié, qui a éclot au cours de cette thèse. A Angeline, François et Daniel, toujours de très bonne humeur et communicative, ainsi que Teureu et Tau, avec qui les petites blagounettes étaient sans fin et toujours très créatives. compassion. A toute la petite famille de Bayer, qui a égayé mon quotidien au cours de ces trois

années passées à vos cotés, merci pour votre sympathie et vos encouragements : Olivier, qui

5 meilleur de toi-même ; René, mon petit papi qui a toujours pris de mes nouvelles ; Valérie, pour les dosages hormonaux ; Patrice, pour les demandes de formulations de dernières oubliées de citer. $ PHV SMUHQPV PM V°XU HP PM JUMQG-mère, qui ont toujours cru en moi tout au long de mon parcours universitaire, même dans mes moments de doute. Vous avez toujours respecté

et encouragé mes choix, merci d'avoir été là pour me soutenir à tout moment, et ceci malgré

toujours fait confiance. Vous avez su être présents et discrets, comprendre et partager mes joies et mes peines. A Aude mon amie de toujours, présente malgré la distance. Ton soutien et ton A Stéphane, un énorme merci pour ta patience, ton écoute, tes conseils et ta présence 6

Résumé

vis-à-vis de la toxicité testiculaire chez le rat Depuis plusieurs années, des agents exogènes environnementaux appelés perturbateurs reproduction et de développement chez de nombreux organismes vivants. Au travers de ce travail, nous avons tenté de combler certaines lacunes afin de mieux comprendre les dangers posés par ces produits. Des études ont été menées visant à caractériser la toxicité testiculaire, chez le rat adulte, induite toxique divers (PE et non PE)in fine comportement propre aux PE. En évaluant les effets d -androgène flutamide, nous ession géniques dose-reliés pour les voies

métaboliques majeures associées à la lésion du testicule (ex. métabolisme des acides gras), et

démontré "dose sans effet moléculaire" inférieure à la NOAEL définie sur la

base des changements phénotypiques adverses. Des études ont également été conduites avec

le 1,3-dinitrobenzène, composé décrit dans la littérature comme système endocrinien et ayant pour cibles les cellules de Sertoli. Nous avons établi cette substance affecte aussi la stéroïdogénèse, remettant quelque peu sa toxicité. En conclusion, nos résultats nous ont permis des toxique des deux molécules examinées fier des doses sans effet pour cha. Ils contribuent également au débat portant sur la définition des critères requis pour la détermination des propriétés de PE. Mots clés : rat mâle, testicule, perturbateur endocrinien, toxique testiculaire à , transcriptomique, dose sans effet, comportement 7 Evaluation of testicular toxicity in rats to determine whether endocrine disrupters are fundamentally different to non-endocrine disrupters in their comportment For several years, certain environmental chemicals known as endocrine disrupters (ED) have been suspected to modulate essential functions like reproduction and development in intact organisms. Through this work, we have tried to fill some of the gaps in the understanding of the dangers posed by these products to man. Studies in adult rats were conducted to characterize testicular toxicity induced by compounds with different mechanisms of toxicity (ED and non-ED), in order to determine ultimately whether or not there exists a behavior specific to EDs. By assessing the effects of the anti-androgen, flutamide, we identified dose-related gene expression changes for the major metabolic pathways associated with testicular injury (eg, fatty acid metabolism) and demonstrated the existence of a "molecular no effect dose" preceding the NOAEL based on adverse phenotypic changes. Studies were also conducted with 1,3-dinitrobenzene (DNB), a compound considered as a direct-acting testicular toxicant and not as an ED. We established that, in addition to inducing germ cell apoptosis and affecting cell cycle progression, DNB interferes with the biosynthesis of steroid hormones, bringing into question the classing of this molecule as a non-ED. In conclusion, our results allowed us to address relevant issues within the field of ED, leading to new insights about the mechanisms of toxicity for the two molecules examined, and the identification of doses without effect for each of them. Our data also contribute to the debate concerning the definition of criteria required for the determination of endocrine disrupting properties. Keywords: male rat, testis, endocrine disrupter, direct acting testicular toxicant, transcriptomics, no effect dose, comportment Intitulé et adresse du laboratoire : Thèse préparée au sein du : Université Paris-Sud, Département Toxicologie

INSERM UMR-S 996 Recherche

Faculté de Pharmacie Bayer S.A.S.

5 rue Jean-Baptiste Clément 355, rue Dostoïevski, BP 153

92290 Châtenay-Malabry 06903 Sophia Antipolis Cedex

8

Table des matières

ILLUSTRATIONS ............................................................................................................................................ 14

ABRÉVIATIONS .............................................................................................................................................. 17

AVANT PROPOS ......................................................................................................................................... 22

INTRODUCTION DU SUJET .............................................................................................................. 25

1. CONTEXTE ............................................................................................................................................... 25

2. TRAVAUX DE RECHERCHE ....................................................................................................................... 27

INTRODUCTION GENERALE ............................................................................................................ 30

CHAPITRE I LE SYSTEME ENDOCRINIEN ..................................................................................... 31

1. LE SYSTEME ENDOCRINIEN : DEFINITION................................................................................................. 31

2. LES GLANDES ENDOCRINES ..................................................................................................................... 32

3. CHIMIE DES HORMONES ........................................................................................................................... 43

4. MÉCANISME DE LACTION HORMONALE .................................................................................................. 45

5. RÉGULATION DU SYSTÈME ENDOCRINIEN ................................................................................................ 48

6. PERTURBATIONS DU SYSTEME ENDOCRINIEN ........................................................................................... 49

A. Perturbateurs Endocriniens : Définitions .......................................................................................... 49

B. Substances et origines ........................................................................................................................ 50

I. Les substances naturelles ............................................................................................................................... 51

i. Les hormones naturelles ........................................................................................................................... 51

ii. Les Phyto- ............................................................................................................................... 52

iii. Les myco- ............................................................................................................................... 54

II. Les substances synthétiques ........................................................................................................................... 55

i. Les hormones de synthèse ........................................................................................................................ 55

ii. Les composés pharmaceutiques et autres produits chimiques .................................................................. 55

I. Effets sur la faune .......................................................................................................................................... 59

7. EVALUATION DE LA SECURITE DES PRODUITS CHIMIQUES POUR LOMME : DETECTION DES

PERTURBATEURS ENDOCRINIENS ....................................................................................................................... 63

A. Généralités ......................................................................................................................................... 63

B. Tests de criblage et modèles in vitro .................................................................................................. 64

I. Tests de liaison au récepteur ......................................................................................................................... 65

III. Test de stéroïdogénèse sur des cellules H295R .............................................................................................. 66

9

I. Test utérotrophique ........................................................................................................................................ 67

II. Test Hershberger ........................................................................................................................................... 68

III. Tests pubertaires ............................................................................................................................................ 68

IV. Etudes de toxicité après administrations répétées ......................................................................................... 69

D. Outils utilisés en toxicologie .............................................................................................................. 70

I. Outils conventionnels ..................................................................................................................................... 71

II. Nouveaux outils "-RPLTXHV" ....................................................................................................................... 72

III. "B GRQP OM PR[LŃR-transcriptomique............................................................................................................... 73

CHAPITRE II EUR MALE .................................................................. 76

1. GENERALITES .......................................................................................................................................... 76

2. LE TESTICULE .......................................................................................................................................... 77

A. Compartiment tubulaire et fonction exocrine .................................................................................... 79

I. La spermatogenèse au sein des tubes séminifères .......................................................................................... 79

i. Structure des tubes séminifères ................................................................................................................. 79

ii. La spermatogenèse ................................................................................................................................... 80

Phases de la spermatogenèse ..................................................................................................................... 80

Cycle de la spermatogenèse ...................................................................................................................... 82

II. La cellule de Sertoli ....................................................................................................................................... 84

i. Généralités et structure de la cellule de Sertoli ......................................................................................... 84

ii. Fonctions de la cellule de Sertoli, cellule de soutien pour la spermatogenèse .......................................... 85

III. Contrôle endocrinien de la spermatogenèse .................................................................................................. 89

i. Contrôle par les hormones ........................................................................................................................ 90

Les gonadotrophines hypophysaires ......................................................................................................... 90

La testostérone .......................................................................................................................................... 91

quotesdbs_dbs23.pdfusesText_29

[PDF] Facteurs de croissance GH et IGF : physiologie de cet axe

[PDF] BIOCHIMIE DE L 'AXE HYPOTHALAMO-HYPOPHYSAIRE

[PDF] Qu 'est-ce qu 'un ayant droit?

[PDF] Identification de l 'ayant droit économique - Credit Suisse

[PDF] Konsep Jiwa dalam Al-Qur 'an Solusi Qur 'ani - Digital Library UIN

[PDF] I/ Compréhension :

[PDF] Indices par commune

[PDF] Protocole général de collaboration - Azimut

[PDF] Guide Juris - SOQUIJ

[PDF] Fiche pédagogique «Azur et Asmar»

[PDF] Azur et Asmar

[PDF] Fiche d 'exercice ( a + b )2 = a2 + 2ab + b2 (1) ( a - b )2 - Mathadoc

[PDF] Règlements Atome Bpdf

[PDF] Deaura Cleopatra Mask Superieur

[PDF] B #8212 Wikipédia